体液蛋白质检验ppt课件

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1、1体液蛋白质检验人类白蛋白分子21、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类;个别血浆蛋白质(前白蛋白、白蛋白)的来源和生理功能;血清总蛋白和白蛋白的测定方法和原理。2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类;血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法3、了解其他蛋白质的来源和生理功能;尿液蛋白和脑脊液蛋白的检测。本章教学要求:3第一节血浆蛋白质概述机体蛋白质:体液蛋白质的检测:机体主要的生物大分子含量:人体固体成分的45%种类:10万,3000~5000种/单细胞功能:生长,代谢、血凝、运动、免疫、信息传递等疾病发生体液蛋白质异常4要判断异常首先要清楚正

2、常的血浆蛋白质组成、功能、分类及特点一、血浆蛋白质的功能及分类组成:种类:1000种500种200种含量:μgmgg来源:肝脏是蛋白质主要的加工厂5功能:①维持血浆胶体渗透压:白蛋白维持75%~80%的血浆渗透压;②运输功能:脂溶性物质、激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体;③维持血浆的酸碱平衡:酸性或碱性蛋白质;④免疫与防御功能:血浆免疫球蛋白与补体等免疫分子;⑤凝血、抗凝血及纤溶等功能:除Ⅳ因子外均可⑥营养作用,修补组织蛋白;⑦催化作用:酶的本质;⑧调控物质代谢;作为底物,酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶;6分类:依

3、据来源、分离方法和生理功能来源肝生成:绝大多数血浆蛋白质其他组织细胞生成:免疫球蛋白和蛋白类激素7分离方法盐析法:白蛋白/球蛋白(pH7.0半饱和的硫酸铵溶液)电泳法:醋酸纤维素薄膜电泳:6种琼脂糖凝胶电泳:13种聚丙烯酰胺凝胶电泳:30种SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳:300种分辨率增高---+纤维蛋白原醋酸纤维素薄膜8即时可用的蛋白质电泳标准9功能分类:10二、血浆中几种主要的蛋白质结构:MW=54000,四个相同亚基构成的四聚体。理化性质:pI=4.7,肝细胞合成,半寿期12小时。测定方法:免疫比浊法/免疫扩散技术。(一)前

4、清蛋白(PA)急性时相反应蛋白11功能:营养指标,载体功能(甲状腺素/维生素A)。临床意义:敏感性高的指标;降低:营养不良,肝功不全,急性炎症,恶性肿瘤,肝硬化及肾炎时。参考值:200—400mg/L。12结构:585个aa残基构成的单链多肽,MW=66458,含17个二硫键。理化性质:pI=4-5.8,肝细胞合成但不储存,半衰期为15-19天,占总蛋白的40%-60%,pH7.4时带负电。测定方法:色素结合法:溴甲酚绿(BCG),溴甲酚紫(BCP),盐析等。(二)清蛋白(ALB)急性时相反应蛋白13功能:营养作用,载体功能(高亲和

5、力)和解毒,维持血浆渗透压和正常pH值。临床意义:合成受食物影响,敏感性较低。降低:在营养不良,肝功不全,急慢性肝疾病时;增高:少见,假性升高。参考值:35-50g/L14结构:MW=12-16万,1046个aa残基构成的单链多肽,含糖约10%,每分子铜蓝蛋白可结合6~8个铜原子。理化性质:肝合成,巨噬细胞和淋巴细胞合成少量;pI值为4.4,具遗传基因多态性。测定方法:免疫化学(扩散或比浊)等(三)铜蓝蛋白(CER)急性时相反应蛋白15功能:具氧化酶活性且起抗氧化剂作用,铜的无毒代谢库临床意义:增加—感染,创伤,肿瘤;降低--营养不

6、良,严重肝病及肾综;协助诊断肝豆状核变性(Wilson病):铜蓝蛋白降低,游离铜增加致铜在肝沉积引起肝硬化,脑基底节豆状核变性。参考值:了解16结构:MW=7.7万,单链糖蛋白,含糖约6%。理化性质:肝细胞合成,pI值为5.5-5.9,半寿期7天,可逆结合多价离子如Fe,Cu,Zn,Co等,一分子TRF可结合两个三价铁。测定方法:免疫扩散法,放免法和免疫比浊法等。(四)转铁蛋白(TRF)急性时相反应蛋白17功能:运输铁。临床意义:血TRF浓度受铁供应调节,缺铁TRF升,铁治疗后恢复。可用于贫血的诊断和对治疗的监测。降低:急性时相反应

7、、慢性肝病、营养不良及蛋白丢失时;升高:妊娠或雌激素会使其升高;缺铁性低色素贫血升高。参考值:了解18结构:两对肽链形成四聚体,有变异体。理化性质:肝合成,pI值为4.1,电泳位a2-球蛋白区带测定方法:电泳法,免疫化学法(扩散,浊度),化学法等(五)结合珠蛋白(Hp)急性时相反应蛋白19功能:与红细胞中释出自由Hb结合,防止Hb从尿中丢失保存铁,急性溶血后一周再生恢复。高效的过氧化物酶。需铁细菌的天然抑菌剂。临床意义:升高:急性时相反应;雄激素刺激升高降低:血管内溶血时;雌激素使其降低。参考值:0.5-2.2g/L20结构:394

8、个aa残基构成的单链多肽,含10%~12%的糖MW=5.5万。理化性质:pI值为4.8,占α1-球蛋白区带显色的90%。测定方法:免疫化学法,电泳(酸性凝胶电泳或等电聚焦电泳),利用蛋白酶抑制能力测定等。(六)α1-抗胰蛋白酶(AAT

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