细胞培养基本知识 ppt课件

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1、细胞培养教材细胞培养（Cellculture）司徒镇强任教老师申艳娜shenyanna@sina.com岳丹yuedan1980@yahoo.com.cn李晓蕾leileili1225@yahoo.com.cn授课6次理论课+2次实验课细胞培养细胞培养(cellculture):动植物细胞在体外培养的条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织。细胞培养分为动物细胞培养和植物细胞培养，其中动物细胞培养是指在体外无菌条件下，模拟体内正常生理状态下的基本条件和环境，分离培养机体组织细胞或建立细胞系，并使得细胞在体外培养容器中长期生长或繁殖的方法。应用领域广泛病毒

2、学免疫学遗传学肿瘤学分化及发育细胞毒试验临床医学及生物技术第一章细胞培养的基本知识1.掌握培养细胞的生长特点和生长条件。2.熟悉培养细胞的特性。第二章细胞培养室的设置、设备和准备工作1.掌握细胞培养实验室的设备使用方法和保养。2.掌握实验器材的清洗和消毒灭菌方法。3.了解细胞培养实验室的设置。细胞培养的基本知识体外培养细胞的分型贴附型大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞，大致分成以下四型：成纤维细胞上皮型细胞游走细胞型多型细胞型1、成纤维细胞型名称：凡在培养中形态与成纤维细胞类似的来源：由中胚层间充质组织起源的组织如：真正的成纤维细胞，心肌，平滑肌

3、，成骨细胞，血管内皮形态：胞体梭形或不规则三角形，胞质向外伸出2—3个长短不等的突起，中有卵圆形核生长特点：排列成放射状，漩涡状细胞—细胞接触易断开而单独行动，游离的单独的成纤维样细胞，常有几个伸长的细胞突起成纤维细胞HUVECs人脐静脉内皮细胞1.细胞种类：人脐静脉内皮细胞；2.培养的天数：4d；原代培养；3.放大倍速：倒置显微镜X20；4.培养基种类：DMEM+15％胎牛血清；5.细胞状态与特征简述：细胞呈梭形，扁平形或多角形，贴壁生长。骨髓间充质干细胞1.细胞种类：人骨髓间充质干细胞原代；2.培养天数：7天；3.放大倍数：200倍，倒置显微镜；4.

4、培养基种类：DF12+10％FBS；5.细胞状态与特征简述：使用percoll密度梯度离心法分离人骨髓细胞。首次换液48h，这是7天后的骨髓间充质干细胞扩增情况。2、上皮型细胞名称：仅形态上似体内，实际上不完全相同来源：来源于外胚层、内胚层细胞,如：皮肤及其衍生物,消化道，乳腺，肺泡,上皮性肿瘤形态：类似体内的上皮细胞扁平，不规则多角形，中有圆形核生长特点：易相连成片，相靠—紧密相连—成薄层—铺石状生长时呈膜状移动，很少脱离细胞群而单个活动上皮型细胞SKOv3（卵巢癌细胞）1.细胞种类：SKOv3（卵巢癌细胞）2.培养的天数：传代后3d；3.放大倍速：倒

5、置显微镜X10；4.培养基种类：DMEM+5%胎牛血清；5.细胞状态与特征简述：细胞贴壁生长，生长速度较快。CCL-1491.细胞种类：大鼠肺泡上皮细胞；2.培养的天数：1d（种在48孔板中）；3.放大倍速：倒置显微镜X20；4.培养基种类：F12K+10%胎牛血清；5.细胞状态与特征简述：细胞呈梭形，透亮贴壁生长，3－4天传代一次，Giemsa染色。3、游走细胞型：呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。CNE11.细胞种类：高分化鼻咽癌细胞系；2.培养的天数：3d；3.放大倍速

6、：相差100；4.培养基种类：PMI1640+10%CS；5.细胞状态与特征简述：贴壁细胞，梭型成团生长。4、多型细胞型有一些细胞，如神经细胞难以确定其规律和稳定的形态，可统归于此类。SD大鼠神经元原代1.细胞种类：脑皮质细胞；2.培养的天数：4-5天；3.放大倍速：电镜20000；4.培养基种类：DMEM+10%小牛血清+10%马血清；5.细胞状态与特征简述：贴壁细胞，有多量轴突和树突。悬浮型概念：培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长来源：自血，脾或骨髓，尤以血中白细胞癌肿细胞特点：在悬浮中生长良好细胞圆形，单个或小细胞团优点：生存空间大，提供数量大，传

7、代方便(不需消化)，易于收获，可获得稳定状态缺点：观察不方便，很多细胞不能悬浮生长(尤以正常细胞)HL-60分化细胞Giemsa染色1.细胞种类：HL-60；2.培养的天数：ATRA1微摩尔作用5天；3.放大倍速：倒置显微镜X10；4.培养基种类：1640+8％胎牛血清；5.细胞状态与特征简述：悬浮细胞，分化的细胞核浆比例减小，核仁减少或消失，胞核呈杆状或分叶状。KU8121.细胞种类：人嗜碱细胞性白血病细胞系；2.培养的天数：5d；3.放大倍速：倒置显微镜X20；4.培养基种类：RPMI1640+10%新生牛血清；5.细胞状态与特征简述：细胞呈圆形，悬

8、浮生长。HeLa细胞1.细胞种类：人HeLa细胞传代培养；2.培养的天数：7d；