肝炎的分子诊断与临床应用ppt课件

《肝炎的分子诊断与临床应用ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、肝炎分子诊断项目开展介绍目录1、了解肝炎分子诊断2、分子诊断在HBV中的临床应用3、分子诊断在HCV中的临床应用4、ADICON已开展的肝炎分子诊断项目我国乙肝病毒感染率概况《2006－2010年全国乙型病毒性肝炎防治规划》显示，中国是乙型肝炎病毒感染和发病人数最多的国家，全国有6.9亿人曾感染过乙肝病毒，其中1.2亿人长期携带乙肝病毒。目前全国慢性乙肝病人2000万人，每年死于与乙肝相关的肝病患者达28万例，发病率和死亡率都位居前三位。每年造成的直接经济损失约达3600亿元人民币。我国乙肝病毒感

2、染率概况什么是分子诊断在临床上应用核酸（DNA/RNA)和分子生物学技术,在基因水平诊断和监控疾病情况和疗效，评估疾病的检测方法。分子技术在乙肝诊断与治疗中应用高灵敏度乙肝DNA检测高精度病毒载量检测系统（COBASAmpliPrep/CobasTaqMan）高灵敏度乙肝DNA检测优势定量PCR技术检测患者的血清HBVDNA含量，能更准确地反映病毒复制程度，对HBV相关疾病的诊断、治疗、判断预后意义重大。QF-PCR是国内常用的定量检测血清HBVDNA水平的方法，COBAS系统是美国食品药品监督管

3、理局(FDA)批准用于血清HBVDNA定量检测的方法。它具有灵敏度高，线性范围广，实时监控，重复性好，可检测A、B、C、D、E、F、G、前C区变异等多基因型DNA载量优点。由于本QF-PCR试剂盒的线性范围为1.0x103copies／mL～1.0x108copies／mL，对于低于1.0x103copies／mL标本的检测结果不能给出具体拷贝值，有存在漏检的可能。而COBAS系统线性范围为20-1.7×108IU/mL，因此，COBAS系统更能准确反映血清HBVDNA含量。COBAS®Ampli

4、Prep/COBAS®TaqMan®HBVTest,v2.0COBAS®AmpliPrep/COBAS®TaqMan®HBVTest,v2.0检测灵敏度20IU/mL线性范围20–1.7x108IU/mL检测基因型A-H检测样本量650mLSampleType血清或EDTA抗凝血浆SFDA注册证Q3Cobas®高灵敏度乙肝：20IU/mL准确判断治疗起点/终点线性范围乙肝：20-1.7×108IU/mL极佳的重复性，结果可靠正确指导抗病毒治疗每批试剂均使用WHO标准品校准保证定量结果的准确性和可溯

5、源性每个样本使用同源性内标定量避免结果不准确采用AmpErase酶减少交叉污染目前在国内唯一满足治疗指南和专家共识的HBVDNA和HCVRNA检测试剂HBVDNA监测的重要性口服核苷（酸）类似物疗效评估部分病毒学应答60–2,000IU/mL加其他药物治疗每3个月监测HBVDNA开始治疗---基于HBVDNA、ALT水平和疾病发展阶段治疗第12周评估是否存在原发性无应答(较基线下降<1log)治疗第24周评估完全病毒学应答<60IU/mL继续治疗每6个月监测HBVDNA不充分病毒学应答>2,00

6、0IU/mL改用或加用更强药物每6个月监测HBVDNA*Keefe,E.ClinGastroHepatology.2007;(5):890-897.抗病毒治疗应将HBVDNA降至尽可能低的浓度，理想是低于实时定量PCR方法（灵敏度10-15IU/mL）的最低检出限11.EASLHBVGuidelines.JHepatology.2009;50:277-242CHB疾病管理:治疗目标HBsAg清除及血清学转换治疗终点ALT正常组织学改善HBVDNA降低/消失HBeAg血清学转换HBeAg消失cccD

7、NA清除*Lok,A.S.Fet.al.“ChronicHepatitisB:Update2009.”HEPATOLOGY,Vol50,No.3,2009,pgs8-9治疗终点2009年EASL指南提出的治疗终点：最理想的治疗终点：持续的HBsAg消失，伴或不伴抗HBs抗体出现。满意的治疗终点：在HBeAg阳性患者中，出现持续的HBeAg血清转换次级的满意治疗终点：尽可能降低病毒DNA水平（降至实时定量PCR检测限以下：10-15IU/ml）HBV基因分型根据HBV全基因核苷酸序列的差异，分为不同

8、基因型:A.B.C.D.E.F.G.H共8个型不同的基因型具有不同地域分布我国主要是BC型为主，偶有A型北方－C型HBV基因分型检测临床意义特征基因型B型C型感染性低高HbeAg阳性率低高HbeAg自然清除时间短长HBVDNA载量低高致病性轻重HCC发生率低（低年龄组高）高（高年龄组高）干扰素治疗完全应答率高低抗病毒治疗效果高低肝癌手术治疗预后好差癌栓栓塞治疗效果好差HBV变异的基础乙肝病毒:高变异性1/10524h一万亿-十万亿拷贝*变异：一千万—一亿复制过程:DNA-RNA-