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《自噬在骨化三醇降低内化KB细胞的牙龈卟啉单胞菌活菌数量中的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、分类号：R781.4单位代码：10159密级：公开学号：201521172硕士学位论文（口腔临床医学硕士学术学位）中文题目：自噬在骨化三醇降低内化KB细胞的牙龈卟啉单胞菌活菌数量中的作用英文题目：Theroleofautophagyinthecalcitriol-induceddecreaseofthelivingPorphyromonasgingivalisinternalizedintoKBcells论文作者：胡新月啊啊啊啊啊啊指导教师：唐晓琳教授啊啊啊学科专业：牙周病学啊啊啊啊完成时间：2018年5月中国医科大学
2、硕士学位论文自噬在骨化三醇降低内化KB细胞的牙龈卟啉单胞菌活菌数量中的作用Theroleofautophagyinthecalcitriol-induceddecreaseofthelivingPorphyromonasgingivalisinternalizedintoKBcells论文作者：胡新月指导教师：唐晓琳啊啊啊申请学位：医学硕士培养单位：口腔医学院啊一级学科：口腔医学二级学科：口腔临床医学研究方向：牙周病学啊啊论文起止时间：2017年10月-2018年5月论文完成时间：2018年5月啊啊啊中国医科大学（辽宁
3、）2018年5月I中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人郑重声明：本论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果，论文中除加以标注的内容外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本研究提供贡献的其他个人和集体均已在文中进行了明确的说明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：日期：2018年5月15日中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机
4、构送交学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权中国医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密（），在年后解密适用本授权书。（保密：请在括号内划“√”）论文作者签名：指导教师签名：日期：2018年5月15日日期：2018年5月15日II中国医科大学硕士论文摘要目的：P.gingivalis是公认的牙周可疑致病菌之一，并且可广泛内化入各种宿主细胞内，从而与全身疾病、癌症的发生发展密切相关。研究显示P.gingivali
5、s可协助HIV-1进入Hela上皮细胞。本研究目的是观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgingivalis,P.gingivalis）ATCC33277在Hela细胞亚系—KB细胞内的存在状态及与自噬体结构的关系；研究骨化三醇（1α,25-二羟维生素D3，1α,25(OH)2D3，以下简称1,25D）和P.gingivalis对KB细胞自噬表达的影响，分析1,25D降低细胞内P.gingivalis活菌数量的可能机制。方法：1、透射电镜下观察P.gingivalis在细胞内的存在状态及与自噬体结构的关系。实
6、验分为5组，分别为空白对照组、0.1%乙醇组、1,25D组、P.gingivalis组、1,25D+P.gingivalis组。P.gingivalis以感染复数（multiplicityofinfection,MOI）300:1加入P.gingivalis组、1,25D+P.gingivalis组细胞中，6h后将10-8mol/L的1,25D分别加入1,25D组、1,25D+P.gingivalis组，将无水乙醇加入0.1%乙醇，空白对照组细胞不做处理，18h后观察P.gingivalis在KB细胞中的存在形式及与自
7、噬体结构的关系。2、1,25D及P.gingivalis对KB细胞自噬表达的影响。（1）P.gingivalis处理：①空白对照组，MOI值10、100、300、500P.gingivalis与KB细胞共同孵育18h，提取总蛋白。②空白对照组，MOI值100:1P.gingivalis与KB细胞共同孵育0、2、6、18、24h、48h提取总蛋白。(2)1,25D处理：①10-12mol/L、10-10mol/L、10-8mol/L1,25D，0.1%乙醇，分别处理KB细胞18h，提取总蛋白。②10-8mol/L1,25
8、D，0.1%乙醇，分别处理KB细胞0、2、6、18、24、48h，提取总蛋白。（3）1,25D与P.gingivalis联合处理：实验组和对照组分别加入MOI值100:1P.gingivalis与KB细胞共培养18h后，实验组加入10-8mol/L的1,25D，对照组加入0.1%乙醇，18h后提取总蛋白。WesternBlot方法
