胶球藻多糖对不同饮食条件下自然衰老小鼠模型的抗衰老作用及其机制

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1、分类号：R363单位代码：10159密级：公开学号：201420056硕士学位论文中文题目：胶球藻多糖对不同饮食条件下自然衰老小鼠模型的抗衰老作用及其机制英文题目：Anti-agingEffectofCoccomyxagloeobotrydiformisonIntrinsicAgingMouseModelunderDifferentDietaryConditions论文作者：魏丹指导教师：孙鲁宁教授学科专业：病理学与病理生理学完成时间：2018年3月中国医科大学硕士学位论文胶球藻多糖对不同饮食条件下自然

2、衰老小鼠模型的抗衰老作用及其机制Anti-agingEffectofCoccomyxagloeobotrydiformisonIntrinsicAgingMouseModelunderDifferentDietaryConditions论文作者魏丹指导教师孙鲁宁教授申请学位医学硕士培养单位基础医学院一级学科基础医学二级学科病理学与病理生理学研究方向衰老与抗衰老论文起止时间2015年9月—2018年3月论文完成时间2018年3月中国医科大学（辽宁）2018年3月中国医科大学硕士学位论文摘要目的：随着国际人

3、口老龄化趋势的加快，探讨衰老机理及抗衰老研究已成为医学领域中热门课题之一。尽管衰老没有明确被定义为是一种疾病，但衰老与许多老年性疾病的病理生理改变之间并没有明确的界限，如不采用适当的手段进行干预，将会导致老年病的发生。本实验中的胶球藻是微小藻中的一种--绿藻，胶球藻多糖(Coccomyxagloeobotrydiformis，CGD)是其多糖体的水提取物。我们在之前的研究中发现：胶球藻多糖不仅能够减轻局灶性脑缺血-再灌注损伤，提高衰老大鼠的学习和记忆能力，还能够明显改善代谢综合征大鼠模型的糖、脂代谢。在

4、本研究中，我们将结合代谢因素的影响，探讨胶球藻多糖在不同饮食条件下的抗衰老作用，并进一步明确其内在机制。研究方法：（1）分组：48只10月龄Balb/c雄性小鼠随机分为六组，每组8只：高热量饮食+NS对照组、高热量饮食+CGD处理组、饮食限制+NS对照组、饮食限制+CGD处理组、正常饮食+NS对照组、正常饮食+CGD处理组。分组后，每组给予相对应的饮食条件喂养并给予相同剂量的生理盐水（NormalSaline，NS)或CGD经口灌胃处理15周。（2）各组小鼠均动态观察一般状况；每5周测体重、腹围和代谢相

5、关指标血糖、血脂（总胆固醇TC、总甘油三酯TG）；处理结束时测血清空腹血清胰岛素、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C、丙二醛MDA水平。以上实验结束后，记录各组实验鼠存活数量，处死、取材进行后续实验。（3）取心、肝、肾、脾、骨骼肌、睾丸组织固定包埋后，制成石蜡切片，行H&E染色，观察上述组织的病理改变情况；对重要器官组织心、肝、肾进行衰老标志物脂褐素染色，观察衰老情况。（4）westernblot方法检测各组小鼠心脏组织的衰老相关基因p53、p16、p21以及SOD1、SOD2蛋白的表达情况、自噬相关蛋白LC

6、3B的表达情况，心脏、肝脏、腓肠肌组织TNFα的表达情况。结果：1.CGD能够改善不同饮食条件下老龄小鼠的一般状态。2.CGD能够调节不同饮食条件下老龄小鼠的代谢水平。I中国医科大学硕士学位论文（1）高热量饮食组与正常饮食组CGD处理后，FBG、FINS、IRI明显下降，饮食限制组CGD处理后FBG、FINS、IRI变化不明显；正常饮食组CGD处理后，TG明显下降，HDL-C明显升高，高热量饮食组和饮食限制组CGD处理后，TG、HDL-C变化不明显；相同饮食条件下CGD处理组TC显著小于比对照组，体重与

7、腹围无明显差异。（2）CGD处理组中，高热量饮食组体重大于正常饮食组，饮食限制组体重和腹围均明显低于正常饮食组和高热量饮食组。饮食限制组FBG明显低于正常饮食组和高热量饮食组，高热量饮食组与正常饮食组FBG无明显差异。高热量饮食组FINS、IRI明显高于正常饮食组和饮食限制组，ISI低于正常饮食组和饮食限制组。饮食限制组与正常饮食组TC、TG无明显差异，但高热量饮食组TC高于正常饮食组，TG明显低于正常饮食组和饮食限制。高热量饮食组、饮食限制组、正常饮食组的HDL-C无明显差异。P<0.05，具有统计学

8、意义。3.CGD能够减轻老龄小鼠组织病理学改变，减少心、肝、肾组织脂褐素形成。4.CGD具有抗氧化的作用：CGD使正常饮食组MDA明显下降，正常饮食组、高热量饮食组和饮食限制组CGD处理，SOD1明显上升。P<0.05，具有统计学意义。5.CGD使蛋白表达改变：CGD使高热量饮食组、饮食限制组和正常饮食心脏p53、p16、p21蛋白表达明显增加；高热量饮食组和正常饮食组CGD处理后，LC3B蛋白表达明显增加，饮食限制组LC3B变化不明显；正