抗烟草黄瓜花叶病毒多糖筛选及其对烟草防御酶活性的影响

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1、ShortCommunication研究简报微生物学报ActaMicrobiologicaSinica53(8):882－888;4August2013ISSN0001－6209;CN11－1995/Qhttp://journals．im．ac．cn/actamicrocn抗烟草黄瓜花叶病毒多糖筛选及其对烟草防御酶活性的影响*沈小英，宋双，罗晶，张鑫，安德荣旱区作物逆境生物学国家重点实验室，西北农林科技大学植物保护学院，杨凌712100摘要:【目的】筛选出对烟草黄瓜花叶病毒病有良好抑制作用的多糖并探索其对烟叶防御酶活性的影响。【

2、方法】采用半叶法，测定了安络小皮伞多糖等21种真菌多糖在枯斑三生烟上对CMV的钝化、预防及治疗效果，并测定了抗病毒多糖处理后普通烟NC-89体内防御酶的变化。【结果】安络小皮伞多糖对CMV具有较好的钝化及预防效果，其200倍液与等量供试病毒液混合30min后接种，钝化效果为83.41%;喷施安络小皮伞多糖200倍液24h后接毒处理，预防效果可高达93.15%。安络小皮伞多糖对CMV防治机理的研究表明，多糖处理后烟草相关防御酶POD、PAL和PPO活性增强，其中喷施安络小皮伞多糖24h后接毒处理的酶活增加最为显著，该处理烟苗的PO

3、D、PAL和PPO的酶活峰值分别可增加至对照的2.74、3.45和2.82倍。【结论】安络小皮伞多糖通过增强烟草体内防御酶活性而提高烟草对烟草黄瓜花叶病毒病的抗性。关键词:安络小皮伞，多糖，黄瓜花叶病毒，酶活中图分类号:R37文献标识码:A文章编号:0001-6209(2013)08-0882-07黄瓜花叶病毒(CucumberMosaicVirus，CMV)担子菌纲、白磨科小皮伞属真菌，主要活性组分是水属于雀麦花叶病毒科成员，是分布最广，危害最重，溶性多糖，相关医学研究表明其水溶性多糖具有提最具经济重要性的病毒之一。世界范围内

4、所有烟草高机体免疫力，抗肿瘤等多种活性，是一种传统的镇［2］和蔬菜种植区均有该病毒的分布和危害，可侵染约痛和抗风湿的保健中药，对人体无毒副作用。医36科双子叶和4科单子叶的千余种植物。烟草和学研究表明，真菌多糖可通过抑制病毒吸附、干扰病蔬菜感染后造成品质和产量下降，甚至绝收，给农业毒复制和提高机体免疫力等途径，有效抑制人体病［1］［3－4］［5］生产带了严重的经济损失。毒病的侵染传播。Collins等发现云芝多糖不真菌多糖是存在于大型真菌子实体、菌丝体中但能抑制HIV-1与宿主细胞结合，而且能显著抑制通过糖苷键连接多个单糖而构成

5、的高分子聚合物。HIV-l逆转录酶活性，从而抑制病毒复制。但真菌［6］真菌多糖资源丰富、具有丰富的生物活性，而且易被多糖对植物病毒的抑制作用鲜见报道，吴艳兵发微生物降解、对环境无污染，是目前及具开发前景的现毛头鬼伞多糖对TMV具有较强的体外钝化及抑药物新资源。安络小皮伞(Marasmiusandrosaceus)系制TMV侵染复制作用，可有效预防TMV病毒病。基金项目:高等学校学科创新引智计划(B07049);新型生物杀菌剂真菌多糖在烟草病害防治中的研究和应用(110201002024);全国烟草有害生物普查(KJ-2010-0

6、4);烟草白粉病小种鉴定和防治研究(110201002022)*通信作者。E-mail:anderong323@163．com作者简介:沈小英(1986－)，女，广西北海，硕士研究生，研究方向为微生物资源利用。E-mail:sxm20060306@sina．com收稿日期:2012-11-07;修回日期:2013-03-20;沈小英等:抗烟草黄瓜花叶病毒多糖筛选及其对烟草防御酶活性的影响．/微生物学报(2013)53(8)883［7］许玉娟发现喷施苍耳多糖后，可有效抑制TMV侵Virus，CMV)，为西北农林科技大学植物保护学院

7、染心叶烟，推测可能是苍耳多糖通过诱导增强防御保存在防虫温室中普通烟草上。制备供试病毒接种酶活性进而抑制TMV。液时，取1gCMV感病叶片，加少量石英砂，于为了筛选得到对烟草上黄瓜花叶病毒病10mLPBS溶液中研磨成匀浆，纱布过滤，无菌水稀(CMV)具有显著抑制作用的真菌多糖，明确真菌多释至100mL备用。糖处理对烟苗相关防御酶的影响，本实验将采用半1.1.4主要试剂和仪器:邻苯二酚，购于国药集团叶法，从安络小皮伞多糖等21种真菌多糖中筛选出化学试剂有限公司;L-苯丙氨酸，购于国药集团化学对(CMV)具有显著抑制作用的多糖，并探索

8、其对烟试剂有限公司;愈创木酚，购于国药集团化学试剂有苗相关防御酶活性变化的影响，为进一步开发安络限公司;紫外分光光度计(DU800nucleicacid/小皮伞多糖防治CMV病毒病提供理论基础。proteinanalyzer，购于BeckmanCoulter公司