菠萝果浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性研究

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1、广西民族大学学报(自然科学版)第14卷第4期JOURNALOFGUANGⅪUNlYERSITYFORNATIONALITIESVol。14NO．42008年11月(Natur~ScienceEdition)N0v．2008菠萝果浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性研究。易元龙，李媚，谢涛，蓝丽红，廖安平(1．广西大学化学化工学院，广西南宁530004；2．广西民族大学化学-9生态工程学院，广西南宁530006)摘要：为了防止菠萝蛋白酶生产过程中失活，以菠萝果的提取液为对象，研究了温度及停留时间、pH值、金属离子种类和浓度，多元醇和糖等因素对浸提液中菠萝蛋白酶活性的影响．在实验范围内，

2、温度超过5O℃时浸提液中菠萝蛋白酶将明显失活，在浸提液原始pH条件下，浸提液中菠萝蛋白酶稳定性最好；Fe3、Fe2、Eu等金属离子都使浸提液中菠萝蛋白酶稳定性下降，Fe”的影响最大；Caz含量在20~40mg·L时，可提高浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性，甘油和葡萄糖可明显提高浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性．关键词：菠萝蛋白酶；浸提；稳定性中图分类号：O629．8文献标识码：A文章编号：1673—8462(2008)O4—0076一O30引言萝蛋白酶在提取过程中易失活，极大地影响了其生产菠萝蛋白酶是从菠萝(Ananacomosus)果、茎等和应用．菠萝蛋白酶是一种巯基蛋白酶，对提纯后

3、的菠萝蛋白酶产品中菠萝蛋白酶的稳定性目前已有提取的一种蛋白水解酶，菠萝蛋白酶在医药、食品、化较多研究，但少见对菠萝蛋白酶在浸提液中的稳妆品等方面有广泛的应用，特别是在水解蛋白制备营定性的报道．本文以菠萝果提液中菠萝蛋白酶为对养口服液上有着良好的应用前景u．1891年，Marca-n0首先发现菠萝汁中含有蛋白水解酶，随后国内象，研究了pH值、温度、停留时间、稳定剂等因素对菠萝果浸提液中菠萝蛋白酶稳定性的影响．为优化菠外学者对菠萝蛋白酶的提取及酶学特征进行了广泛萝蛋白酶浸提条件，提高菠萝蛋白酶的收率提供理论研究．菠萝蛋白酶存在于果、皮和茎部中，存在于指导，获得了较好的实验结果．

4、茎部的称为茎酶(StembromelainE．C．3．4．22．4)，存在于果质中酶称为果酶(FruitbromelainE．C3．4．22．5)．酶是一种蛋白质，凡是能使蛋白质变性的因1实验部分素，都可能使酶失去活性，如物理因素(时间、温度、压1．1实验材料与仪器力、光、磁场)，化学因素(氧化、还原、溶剂、金属离子、菠萝果(市场购买)，SP一752型紫外可见分光光离子强度、pH)和生物学因素(酶修饰和酶降解)．菠度计(上海光谱仪器有限公司)，C5Ol一3C超级恒温收稿日期：2008—10—03．作者简介：易远龙(1983一)，湖南岳阳人，广西大学化学化工学院O6级化学工艺

5、硕士研究生．762008年第4期●易元龙，李媚，谢涛。等／菠萝果浸提液中菠萝蛋白酶的稳定性研究器(重庆四达实验仪器有限公司)，SJ一5000型特级用碱液或酸液调浸提液的pH值后，在50~C保捣碎机(广州闪明电器有限公司)，pH计(上分)．温40min，pH值对浸提液中菠萝蛋白酶的影响见图1．2实验方法2所示．1．2．1实验步骤1OO取一定质量的菠萝果，洗净，用捣碎机捣碎榨汁，80榨汁用200目滤布过滤后备用．取一定体积过滤后的浸提液，分别改变浸提液温度及停留时间、pH值、金60属离子种类及浓度，添加剂种类及浓度等因素，以浸40提液的总酶活回收率为考察指标，考察各因素对浸提液

6、中菠萝蛋白酶稳定性的影响．201．2．2酶活性测定方法23456789i0pH浸提液中菠萝蛋白酶酶活力测定采用FIPu。。法，以酪蛋白为底物，经菠萝蛋白酶水解后用紫外分图2pH值对浸提液中菠萝蛋白酶稳定性的影响光光度计测定水解酪氨基酸的浓度，以计算出单位体积浸提液的酶活力．浸提液中酶的稳定性由总酶活回从图2可以看出，菠萝果浸提液中菠萝蛋白酶在pH为3．8左右比较稳定．pH值对酶活性的影响是收率表示．复杂的，既影响酶分子与底物分子中基团的离解状酶活回收率c，一羞}；×。。态，也会使酶分子的空间构象发生变化，影响酶的活性．实验测定菠萝果浸提液的pH一般为3．6至2结果与讨论3。

7、9，因此，在浸提时可以不用调节浸提液的pH．2．1温度及停留时间对浸提液中菠萝蛋白酶活性的2．3金属离子对果汁和茎汁中菠萝蛋白酶活性的影响影响在菠萝蛋白酶的生产过程中，浸提液要经净化和保持浸提过程中菠萝蛋白酶的稳定性，对菠萝蛋浓缩才能进行下一步加工．净化和浓缩需要在操作条白酶的生产十分重要．考虑到生产过程中可能在浸提件下停留一定时间，为了考察浸提液停留时间对菠萝液引入的金属离子种类，分别考察了浸提液中不同浓蛋白酶活性的影响，在不调节浸提液的pH值，在分度的Ca，Mg抖Na，Fe，Fe抖，Ni“，Cu等金别测定了不同