刺五加关节腔注射干预兔膝骨性关节炎的实验研究

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1、湖北中医学院博士学位论文刺五加关节腔注射干预兔膝骨性关节炎的实验研究姓名：杨锦华申请学位级别：博士专业：中医骨伤科学指导教师：熊昌源20090520中文摘要目的：探讨刺五加关节腔注射治疗原发性膝关节骨性关节炎的作用机制。方法：进行实验研究，64只新西兰白兔随机分为4组(每组16只)，16只不造模作为正常组，其余48只用内侧半月板部分切除的方法造模，最后分为正常组、刺五加组、透明质酸钠组，模型组，正常组既不造模也不给药，刺五加组给予刺五加注射液0．5ml／y,术侧关节腔注射，透明质酸钠组给予0．3ml／Y,术侧关节腔注射，

2、模型组只造模。术后2周开始用药干预，直到处死前1周。分6周和10周两个时相点采集血清和关节液，测定血液和关节滑液中NO、iUOs、SOD、MDA水平。同样，分两个时相点处死动物取材，肉眼观察关节软骨及滑膜，骨赘和软骨溃疡，拍膝关节X线片，观察软骨下骨的硬化情况。制备软骨及滑膜石蜡切片HE及AB-PAS染色，对软骨和滑膜分别在光镜下进行病理评分。用末端原位标记检测软骨细胞凋亡状况，免疫组化法检测bcl-2在软骨中的表达，并检测尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在滑膜上的表达。结果：正常组关节面光滑有光泽，软骨透明，无明显缺损

3、和新生物，滑膜无充血。6周时，可见刺五加组和HA膝关节有轻度病变，模型组病变较前者稍重。10周时，模型组关节面不光滑，无光泽，软骨不透明，有明显缺损和新生物，滑膜色暗充血肿胀；刺五加组软骨色泽较暗，可见溃疡形成较表浅，透明度差，有少到中等量骨赘形成．透明质酸钠组关节面见溃疡生成较表浅，滑膜肿胀，骨赘形成较多。随时间增长病变有加重的趋势，病理学评分分值增高。x线检查显示手术3组动物在6周时内侧关节间隙狭窄，胫骨平台软骨下骨密度轻微增高，可有少许骨赘生成；10周时上述变化更加明显。HE及AB-PAS染色可见：除正常组外，软骨

4、的完整性均不同程度的遭到破坏。AB-PAS不同程度的基质失染，表示各手术造模组蛋白多糖有不同程度的丢失。还可见软骨中不同程度的新生血管和纤维化变，其中以模型组最严重，且1O周组较6周组病变严重。6周时模型组血清及滑液中的NO较正常组有明显的升高(P<0．05)，刺五加组和HA组的NO值无明显升高(P>0．05)，HA组和模型组iNOs较正常组有所升高(P<0．05)，刺五加组未见明显变化(P>O．05)，HA组iNOs较刺五加组上升明显(P

5、模组MDA较正常组有明显增高。1o周时各手术造模组的血清及关节滑液中的NO、iNOs、MDA水平较正常组有明显的升高，以模型组升高最明显(P

6、5)。两个时相点，刺五加组和HA组的凋亡率低于模型组(P0．05)。在6周时，手术造模各组滑膜中uPA表达强于正常组(P

7、2、刺五加有可能通过其活血化瘀，免疫稳定和糖皮质激素样作用，减轻滑膜病变，抑制巨噬细胞活化，从而下调iNOS从而减少No的生成量，并且下调uPA在滑膜中的表达，减少炎症细胞因子的生成，从而降低细胞凋亡指数，减轻软骨的病变。3、刺五加是抗氧化剂，可升高关节液中SOD和软骨中的bcl-2水平，降低MDA水平，从而减少氧化应激对软骨细胞的损害，抑制软骨细胞凋亡。关键词刺五加；中医药疗法；骨性关节炎；实验研究；关节内注射ⅡAbstractT、●-o^●'●^···EXper1menta1StUdyor-Intraart1CUla

8、r1n】eCt10notACantnopanaXsentiCOSUStointervenekneeOSteoarthritiSofrabbitSpecialty：OrthopedicsandTraumatologyofTraditiona1ChineseMediCineAuthor：JinHuaYangTutor：P