富硒蛹虫草提取物硒蛋白多糖对荷瘤小鼠的影响

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1、万方数据第33卷第18期2008年9月中国中药杂志ChinaJournalofChineseMateriaMedicaV01．33，Issue18September，2008富硒蛹虫草提取物硒蛋白多糖对荷瘤小鼠的影响钟鸣4，王丽贺，马慧，郭致富，王成春，刘少霞(沈阳农业大学辽宁省农业生物技术重点实验室，辽宁沈阳110161)[摘要]目的：提取及分析富硒蛹虫草硒蛋白多糖活性成分，初步探讨富硒蛹虫草硒蛋白多糖的抗肿瘤作用。方法：分别应用Folin-酚试剂法(Lowry法)、苯酚一硫酸法和2，3．二氨基萘荧光分光比色法测定蛋白质、多糖及硒含量，建立荷瘤小鼠模型，分为模型

2、组、环磷酰胺组及虫草高、低剂量组(200，100mg·kg“)，通过对小鼠体重及抑瘤率、外周血淋巴细胞转化率、廓清指数K、吞噬系数a、肝脏系数及脾脏系数、GSH—Px和SOD活力及MDA含量的测定，观察富硒蛹虫草硒蛋白多糖的体内抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果：富硒蛹虫草硒蛋白多糖对荷瘤小鼠具有显著的抑瘤作用，抑瘤率高达46．92％；且提高了荷瘤小鼠的免疫功能，抑制了由环磷酰胺造成的荷瘤小鼠肝脏系数和脾脏系数的下降；增强了机体的抗氧化能力。结论：富硒蛹虫草提取物硒蛋白多糖具有良好的抗肿瘤生长作用。[关键词]蛹虫草；硒；抗肿瘤；免疫；抗氧化[中图分类号]R2

3、85．5[文献标识码]A[文章编号】1001-5302(2008)18-2120-04硒是人和动物所必需的微量元素，参与了生命活动的许多重要过程HJ。研究表明，人类的克山病、心脑血管疾病、艾滋病、机体免疫力减退和衰老过程等40余种疾病均与缺硒有关拉剖。硒作为一种抗氧化剂和抗癌物质，早在20世纪70年代，硒的抗肿瘤作用就已经为人所知mJ。人体的硒主要来源于食物，从营养学和生化代谢角度考虑，生物源有机硒以其吸收利用率高、毒副作用小等特点优越于无机硒，一些食用菌可以使无机硒通过菌丝体吸收、转化、富集于子实体中，成为对人类较为理想的补硒食品r加J。蛹虫草是一种药食两用真菌

4、，对增强机体免疫力、抗肿瘤方面的研究早有报道¨引。蛹虫草对于某些微量元素特别是硒具有高度的富集作用，并把无机硒转化为有机硒，有利于人体摄入。本实验采用的富硒蛹虫草是蛹虫草在加硒固体培养中，对无机硒进行生物转化而得到的，通过与普通蛹虫草对比，探索富硒蛹虫草对荷瘤小鼠抗癌、提高免疫能力的影响，为富硒蛹虫草的进一步开发应用提供理论依据。l材料1．1药物普通蛹虫草和富硒蛹虫草由沈阳农业大学蛹虫[收稿日期】2007—1l-10[基金项目】辽宁省农业生物技术重点实验室专项资金[通讯作者】‘钟鸣，Tel：(024)88488171，E—marl：出ming@syatredu．∞

5、·2120·草栽培基地提供。注射用的环磷酰胺(cyclophos—phamide，Cy)为江苏恒瑞医药股份有限公司产品，批号06052021，实验前以蒸馏水配成溶液。1．2动物昆明种小鼠70只，雌雄各半，体重19～20g。由中国医科大学实验动物中心提供，合格证号SCXK(辽)20074307。1．3瘤株S180(小鼠肉瘤细胞)由沈阳药科大学实验室传代保存。2方法2．1硒蛋白多糖的提取及含量测定2．1．1提取工艺流程uu首先将蛹虫草干品研成粉末，经水回流提取、过滤、浓缩，再用60％乙醇沉淀，收集沉淀并用蒸馏水溶解，经大孔吸附柱(D101)洗脱。洗脱液经浓缩、过滤及8

6、0％乙醇沉淀，再经冷冻干燥即得硒蛋白多糖。2．1．2含量测定蛋白质含量测定采用Folin一酚试剂法(Lowry法)、多糖含量测定采用苯酚-硫酸法¨2

7、、硒含量测定采用DAN荧光法(GB／T12399)。2．2半数致死量(LD卯)的测定参照李寿琪等的方法[13

8、，昆明种小鼠，随机分成2组，每组雌性3只，雄性2只，适应性饲养3d；第4天给药前禁食16h，饮水不限，分别以1，2g·kg。1剂量进行灌胃，观察15d，记录出现症状及死亡情况。万方数据第33卷第18期2008年9月中国中药杂志ChinaJournalofChineseMateriaMedicaV01．33．1

9、8吼地18September，20082．3硒蛋白多糖对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响取健康昆明种小鼠70只，10只为正常对照，其他60只建立$180肉瘤细胞荷瘤小鼠模型，即于每只小鼠左前肢腋下皮下注射$180肉瘤细胞悬液0．2mL。24h后随机分组，每组10只，雌雄各半。分别为富硒虫草提取物高、低剂量组(200，100ing·kg“)；普通虫草提取物高、低剂量组(200，100mg·kg一)；环磷酰胺对照组(20mg·kg。1)；模型组(按体重给予相应体积的蒸馏水作为荷瘤小鼠空白对照)。每天灌胃1次，每次0．4mL，连续给药15d，停药5h后颈椎脱臼处死小鼠。无菌条件下

10、，完整剥离