茯苓多糖发酵工艺的优化

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1、万方数据安徽农业科学。JournalofAnhuiAgi.Sci.2006,34(5):920—921责任编辑金琼琼责任校对金琼琼茯苓多糖发酵工艺的优化李慧j,常景玲o(1.平原大学,河南新乡453003;2.河南科技学院,河南新乡453003)摘要研究了茯苓多糖发酵过程中碳源、氮源、pH值对多糖积累的影响。结果表明:葡萄糖、玉米粉、蛋白胨均有利于茵丝的生长和多糖的形成,其作用大小为碳源>氮源>pH值。并通过正交优化实验,确定了茯苓多糖的最佳发酵培养基为:葡萄糖4%、玉米粉4%、蛋白胨0.4%、麸皮6%、(N心)2solo.2%、峨·7坞00.05%、KH2

2、PO,0.1%。利用此培养基在10L发酵罐上进行发酵,茯苓多糖含量最高可达16g/L。关键词茯苓;多糖;发酵中图分类号$567.3+2文献标识码A文章编号0517—66n(2006)05一0920一02stuarOnthe●却崎m衄岫Pn,oe鲻ofPoriaCOBC05FenrtmatationUI“etal(P'mgyuanUmversity,Xinxiang,Henan453003)Al矧a-aet1heinfluenceofearbon啾es.nitrogen$OUl℃eSandpHOilaccountingpolysaccharidesinPori

3、aCOCCO—JFermentationwasstudied.‘rheresultshowedthatglu,Ⅸe,cornstarchandpeptonewereallhelpfultothegrowthofhyphaeandtheformingofpolysaccharides.r111emnkingoftheinfluenceOnfermentationw鹊asfollows:c8rbOll舢es>nitrogensources>pH.Thebestmediumforfermentationwassetbyorthogonaltest:slucme4%

4、,cornstarch4%,peptone0.4%,bran6%,(NH4)2S040.2%,MgS04。7Hz00.05%andKH2P040.1%.7IhetopproductionofPor/acD㈣polysaccharidesinfermenterof10Lcouldreach16g/L.KeywordsPoriacocco$;Polysaccharides;Fermentation茯苓是我国传统的名贵中药材,茯苓多糖是茯苓的最有效成分之一。实验证明,茯苓多糖能提高人体免疫机能,具有防治肿瘤等作用,市场需求量越来越大。发酵生产茯苓多糖具有周期短、成

5、本低、产量大等优点,为进一步获得大量的菌丝体,提高茯苓多糖的产量,降低工业生产成本,笔者对茯苓多糖的发酵工艺进行了深入研究。1材料与方法1.1材料1.1.1菌体。茯苓(Por/a删),由笔者选育保存。1.1.2试剂。苯酚、硫酸、葡萄糖、乙醇等均为国产试剂。1.1.3培养基。斜面种子培养基:马铃薯20g,葡萄糖2g,KH2P040.2%,MgS04·7H200.15%,酵母膏0.5%,琼脂2%,pH值自然。发酵基础培养基:KH2P040.1g,(NH4)2S040.2%,MsSO,·7H200.05%,碳源,氮源,pH值5.6。1.2方法1.2.1菌种活化。将

6、斜面种子培养基配制好后分装,121℃灭菌20min,制成斜面培养基,每支斜面接入0.5~1.0—2菌块,27℃培养72h,菌丝均匀长满斜面。1.2.2摇瓶种子。将种子培养基配制好后,用8层纱布封口,121℃灭菌20min,冷却至室温,将3~4块0.5~1.0矗斜面菌种的表层菌丝(不带培养基)接入装液量50ml/250ml的三角瓶中,在27℃、160r/min的条件下培养48h。1.2.3发酵培养。1.2.3.1碳源实验培养基:氮源为(N地)2s040.2%,碳源分别为葡萄糖4%、玉米粉4%、蔗糖4%和葡萄糖4%+玉米粉4%。1.2.3.2氮源实验培养基:碳源

7、为葡萄糖+玉米粉,氮源硫酸铵、蛋白胨、酵母膏、麸皮、黄豆饼粉按0.2%硫酸胺含氮量折算后分别加入。1.2.3.3优化培养基:在不含碳源、氮源的基础培养基中,按k(33)正交实验表加入最适碳源和氮源。1.2.3.4发酵培养:培养基配制好后,用8层纱布封口,121oC灭菌20min,冷却至室温,将摇瓶培养得到的菌种以10%的接种量转入装液量100ml/500ml的发酵瓶中,在27℃、160r/min的条件下培养至发酵终点,所得发酵液备用。1.2.4茯苓多糖的提取。1.2.4.1胞外多糖的提取(图1)。发酵液坠■上清液壅§浓缩液兰塑§沉淀物垦塑:圣竺鳖.膨侈糖图1

8、胞外多糖的提取工艺1.2.4.2胞内多糖的提取(图2

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