hplc指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶

《hplc指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据陕西农业科学HPLC指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶王小平1。林励2．白吉庆1(1．陕西中医学院，陕西成阳712046；2．广州中医药大学中药学院，广东广州510405)提要：用高效液相色谱法建立蜂胶指纹图谱分析方法。用以鉴别蜂胶和树胶。采用迪马公司Diamonsil(钻石)C18(46mm×250ram，5ptm)色谱柱．甲醇～0．4％的磷酸水为流动相。梯度洗脱，流速为1．0ml／min，检测波长为283nm，柱温：25℃。建立了蜂胶药材的指纹图谱分析方法，可用于区另q蜂胶伪品。本试验所建立的蜂胶HPLC指纹图谱分析方法准确、可靠，重现性好．能够用于控制蜂胶的质量和真

2、伪的鉴另q。为更好的控制蜂胶的内在质量提供了科学依据。关键词：蜂胶；指纹图谱；HPLC；鉴别；真伪蜂胶(propolis)是意大利蜂(ApismelliferciL．)从植物芽苞和树干处采集的树胶，混人意大利蜂(ApismelliferaL．)上颚腺分泌物和蜂蜡等形成的一种具有芳香味的胶状固形物。其主要化学成分为黄酮类、萜烯类、酚酸类化合物等多种生物活性物质[1]。现代药理研究表明，蜂胶具有抗病毒、抗菌消炎、抗肿瘤、抗氧化、降血脂、调节机体免疫功能等多种生物活性作用[。]。目前，蜂胶原料及蜂胶产品的质控标准仅存在有效部位含量测定等指标，无法科学地评价其质量，社会上以次充

3、好、以假当真，屡见不鲜，已显著影响了蜂胶的出口创汇及蜂胶产品的质量[3“’5]。为更有效的控制其内在质量，保证蜂胶质量的稳定，采用HPLC法建立了蜂胶指纹图谱的分析方法。1仪器、试药与材料1．1仪器与材料德国DionexP680A型高效液相色谱仪(PDA一100检测器、STH585柱温箱、P680HPLC泵、ASI—100自动进样器)，chrome—leon色谱工作站；8953Dietikon型电子分析天平(瑞士)；AS2060B型超声仪。1．2试药芦丁对照品(080—9705)、槲皮素对照品(081—9003)、白杨素对照品(111701—200501)、高良姜素对照

4、品(111699—200501)，均由中国药品生物制品鉴定所提供，流动相所用甲醇为色谱醇，其他试剂如：甲醇，磷酸等均为分析纯，蜂胶采自山东、甘肃、内蒙古、山西、辽宁、吉林、山东、青海、河北、东北等地，采集时间为2006—1l，共10批样品(广州市宝生圆提供，经广州市蜂产品研究所卢占列鉴定，为蜂胶)。2方法与结果2．1色谱条件色谱柱：迪马公司Diamonsil(钻石)C18色谱柱(46mm×250mm，5“m)；流动相：A：甲醇，B：0．4％的磷酸水，梯度洗脱(甲醇：0rain为35％，10min为35％，20rain为45％，30rain为45％，35min为50％，5

5、0min为50％，60min为55％，120min为55％)；流速：1．0ml／min，检测波长：283rlm，柱温：25℃；进样量：10“1。2．2溶液的制备2．2．1对照品溶液精密称取干燥至恒重的对照品芦丁、槲皮素、白杨素、高良姜素各适量，加甲醇使溶解，分别制成每mL含芦丁0．268mg，槲皮素0．1096mg，白杨素0．0296mg，高良姜素0．0206mg。2．2．2蜂胶供试品溶液将蜂胶在一10℃冷冻数天后用粉碎机粉碎，取蜂胶样品约1g，精密称定，置索氏提取器中，加100ml丙酮，加热回流至提取液无色，提取液回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至100ml容量瓶中

6、，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2．3方法学考察2．3．1精密度试验取同一供试品溶液(01号-收稿日期：2009—01—08基金项目：广州市科技计划项目(编号s2005Z--E0101)．作者简介：王小平(1976一)，女(汉族)，陕西宝鸡人，陕西中医学院讲师，博士，从事中草药化学成分分析及新药研究．通讯作者：林励．男，教授．万方数据陕西农业科学样品)10肚l，连续进样5针，测定，所得色谱图用相似度软件评价(国家药检局推荐使用的MAT—LAB软件)，结果5次进样在同一仪器测得的色谱指纹图谱与其所得共有模式图谱的相似度(相合系数均值)分别为0．9937、0．9952、0．99

7、73、0．9969、0．9959，满足相似度不小于0．950，并考察色谱峰保留时间和峰面积的一致性，芦丁、槲皮素、白杨素、高良姜素保留时间RSD和峰面积的RSD均小于1．7％。2．3．2稳定性试验取同一份供试品溶液，分别在0时、2时、4时、10时、14时不同时间点进行检测，直观观察指纹图谱的全貌无明显变化，用相似度计算，在同一仪器测得的色谱指纹图谱与其所得共有模式图谱的相似度(相合系数均值)分别为0．9922、0．9932、0．9886、0．9959、0．9951，满足相似度不小于0．950，并考察保留时间和峰面积的一致性，芦丁、槲皮素、