天麻饮片的hplc指纹图谱鉴别方法分析

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1、天麻饮片的HPLC指纹图谱鉴别方法分析马鑫刁兴彬(泰安市食品药品检验中心271000)【中图分类号】R927【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)25-0268-02【摘要】目的研究分析天麻饮片的HPLC指纹图谱鉴别方法。方法选取5个产地的天麻饮片，根据HPLC指纹图谱鉴别方法，流动相乙腈-0.5%冰醋酸溶液线形梯度洗脱，对波长270nm进行检测，流速为1.0ml•min-l.根据指纹图谱软件对图谱中数值进行比较计算，聚类分析来自不同饮片之间的差异。结果建立天麻饮片的指纹图谱，对5个产地的天麻饮片进行指纹谱图分析，其图谱基木保

2、护抑制，从中检出10个峰，10个样品相似度超过98%,且聚类分析结果同饮片产地是保持一致的。结论该方法可重复使用，同时结合聚类分析方法对天麻饮片进行定性鉴别，可有效保证天麻饮片的质量。【关键词】天麻饮片HPLC指纹图谱鉴别笔者选取5个产地的天麻饮片共8个批次，对其天麻饮片的指纹图谱进行研究分析，建立有效的天麻饮片的HPLC指纹图谱鉴别方法，现总结如下。1仪器与施药采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件，EYELA型旋转蒸发器，EYELA型旋转蒸发器，超声清洗器，选用高效液相色谱仪。乙腈是一种色谱纯，其中所选用的水是纯净水，且纯净水使用之前，应用0.45μ

3、g滤膜进行过滤，其他试剂主要为分析纯。所选取的天麻药材，多是从湖北、河南、陕丙、安徽、四川等地区，且该药材经过相关专家研究，均为干燥块茎，分别将所选取的药材制成8批生天麻饮片，而后对其进行粉碎，放置在干燥器中留作以后备用。2方法与结果2.1色谱条件规定色谱柱KromasilC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相乙腈-0.5%冰醋酸溶液线行梯度洗脱(0-20min,l%-20%A，20-25min，20%-25%A,25%-85%A),检测波长为270nm,其流速为1.0ml•min-l。在所规定的条件下，对不同chad

4、ian的天麻饮片进行检测，从中检出15个峰，对样品出峰检测在一个小吋内可结束，检测后可见，色谱图基线较为平稳，苏中色谱峰分离较为理想，对其进行分析吋间为1小吋。2.2制备供试品溶液严格称取2g天麻饮片粉末，而后将50%50ml甲醇加入其中，利用超声提取15分钟后，对其进行过滤，将滤液进行蒸干，残留物放置到2-3ml水中进行溶解。分别用水将50ml95%EtOH和50ml50%EtOH进行洗脱，将EtOH洗脱液中50%进行收集，实施减压后，对其进行蒸干，使用甲醇对残渣进行溶解，而后将其放置到10ml量瓶中，使用0.45μm微孔滤膜对其进行过滤，然后留作

5、以后备用。2.3方法学考察分别对其进行精密度试验、稳定性试验、重复性试验，从这三组试验中得出仪器具冇良好的性能，样品属性相对稳定，样品制备可重复使用。2.4指纹图谱测定和评价2.4.1共有峰的指定根据相关规定，对不同批次的天麻饮片HPLC进行研究分析，并对其质量进行测定。指定天麻饮片共有峰为10个，其中的6个为参照峰，根据这6个参照峰进行计算分析，基本可以反映较为样品的质量。2.4.2聚类分析在对相似度进行分析的基础上，同吋对所选取的8个批次的天麻饮片的指纹图谱进行聚类分析。艽中湖北天麻为一类，陕西天麻为一类，安徽天麻为一类，河南天麻和四川天麻为一类，从中

6、可见天麻饮片与药材产地具冇一定相关性。3讨论天麻为一种兰科植物天麻的干燥块茎，具有止痉息风平肝之功效，临床上该药物多用于治疗破伤风、癫痫抽搐、小儿惊风、肢体麻木、头痛眩晕等症状［1】。该种药物使用历史悠久，多遍布于湖南、湖北、河南、陕西、西南等地区。相关文献研宄中表明该药物主要含有多糖、逛醇、其苷以及酚类等化学成分，从药理学角度来讲，该药物具冇抗惊厥、镇痛、镇静等作用，同吋也可起到保护免疫系统、心血管系统功效［2】。如何选用优质的天麻饮片，是一个相关重要的问题。采用HPLC指纹图谱对天麻饮片的质量进行有效检测，苏中选择在270nm波长下色谱峰数量保持平稳，

7、在乙腈-5%冰醋酸水溶液中对流动相实施梯度洗脱，保持色谱峰基线的稳定，实施有效分离［3】。从本次研宄中可以看出，建立天麻饮片的指纹图谱，对5个产地的天麻饮片进行指纹谱图分析，其图谱基本保护抑制，从中检出10个峰，10个样品相似度超过98%,且聚类分析结果同饮片产地是保持一致的。由此可见，HPLC指纹图谱对天麻饮片定性较为合适，可有效保证天麻饮片的质量。参考文献［1】麻印莲，肖永庆，耿立冬.天麻饮片的HPLC指纹图谱鉴别［」］.2011,17(19):104-105.［2】孙静，王昌利，杜鹃.不同炮制方法对天麻饮片中多糖含量影响的实验研究［J］.时珍国医国药

8、，2010,62(11)：712-713.［3】万军，周霞，李晓倩