茯苓皮中三萜的提取、分离纯化及其美白皮肤活性基础性研究

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1、华中农业大学硕士学位论文茯苓皮中三萜的提取、分离纯化及其美白皮肤活性基础性研究姓名：沈思申请学位级别：硕士专业：食品科学指导教师：黄文20080601侠苓皮中三萜的提取、分离和鉴定及其美白皮肤活性基础性研究摘要茯苓作为“药食同源”特性的传统中药资源之一，具有显著的生物活性及药理作用。在茯苓加工过程中，茯苓皮当成废料处理，造成了茯苓资源的极大浪费；为了提高茯苓加工利用率，提高资源的附加值，进一步探明茯苓中的活性成分，本文以茯苓皮为研究对象，采用现代分离技术对茯苓皮中的三萜类物质进行了提取、分离、纯化与鉴定；并且测定了三萜物质提取物抑菌、抗炎、抗氧

2、化及抑制酪氨酸酶酶活等方面的生物活性。主要研究结果如下：1茯苓皮三萜提取、含量测定及其定性分析：以湖北大别山区九资河茯苓的皮为原料，采用香草醛．冰乙酸．高氯酸显色法测定出茯苓皮中总三萜的含量为1．59％。采用有机溶剂甲醇提取茯苓皮中的三萜，通过单因素试验和四元二次旋转正交试验确定了最佳提取条件为：提取时间6h，温度为70℃，料液比l：20，提取次数为2次，且提取率可达到95．2％，而样品纯度可达到78．5％。化学定性反应、紫外扫描吸收光谱和红外光谱特征吸收表明茯苓皮甲醇提取物中含有三萜类物质。高效液相色谱与质谱联用推断出茯苓皮三萜粗提物中18种

3、三萜成分。2茯苓皮三萜的分离、纯化、制备及鉴定：采用硅胶柱层析分离法分离茯苓皮三萜粗提物得到不同级分的组分，应用化学显色反应、紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱等方法对分离得到的组分进行鉴定。实验结果表明，3种纯化组分虽然各是几个单一三萜成分的混合物，但较粗提物已具备一定纯度，而且结合紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱等鉴定方法的分析结果可初步推断每种纯化组分中所含的单一三萜成分。3茯苓皮三萜的美白皮肤活性：采用生长速率法的抑菌实验表明：茯苓皮中粗三萜及其纯化组分对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌都有较好且较稳定的抑制作用；小鼠二甲苯耳廓致炎实验

4、表明茯苓皮粗三萜有较好的抗炎活性；体外抗氧化实验则显示茯苓皮粗三萜及其纯化组分也都有较好的抗氧化活性，其中茯苓粗三萜及其纯化组分都能有效清除超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢3种氧自由基，在红细胞自氧化及H202诱导的氧化溶血体系中，茯苓皮粗三萜及其纯化组分都能对红细胞溶血起到一定的抑制作用，而在抗小鼠肝脂质过氧化体系中，茯苓皮粗三萜及其纯化组分对肝脂质自发性过氧化和Fe．H202诱导的过氧化产生的丙二醛(MDA)都有较好的清除效果；抑制酪氨酸酶酶活实验则显示，茯苓皮粗三萜及其纯化组分对酪氨酸酶活的抑制属于双向作用，低浓度时有较好的抑酶活性，高浓

5、度时反而对酪氨酸酶酶促反应有促进作用。关键词：茯苓皮：三萜；提取；分离纯化；美白皮肤活性华中农业大学2008届硕士学位论文“Hoelen”(PD，．iaCOCOSedibleinChina．，havingABSTRACT(Schw．)Wolf)isaspecificandtraditionherbwhichisalsoveryremarkablebiologicactivitiesandpharmacologicalfunctions．DuringprocessingPoriaCOCOS，thesurfacelayerofPoriaCOCOSw

6、asabondonedSOastoleadtothegreatwasteofresource．Forenhancingtheutilizingfrequenciesof“Hoelen'’andtheadditivevalualofitsproduction，orstudyingtheusefulelementsofPoriaCOCOSfurther，Inthispaper，theextraction，isolation，purificationandwhiteningskinactivities，includinganti·bacteria,a

7、nti—inflammatory，antioxidantandinhibitingtyrosinaseactivity，oftriperpenesinthesurfacelayerofPoriaCOCOSwerestudied，．Theresultswereasfollows：1．Determinationofthecontent，theoptimalextractionconditionandthequalitativeanalysisofcrudetriperpenesextractedfromthesurfacelayerofPoriaC

8、OCOS：ThesurfacelayerofPoriaCOCOSproducedinJiuzihevillage，Dabiemountainarea，