枯草芽孢杆菌sh7抑菌　物质及其特性

《枯草芽孢杆菌sh7抑菌　物质及其特性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、维普资讯http://www.cqvip.com第34卷第4期植物保护学报Vo1．34No．42007年8月ACTAPHYT0PHYLACICASINICAAug．2007枯草芽孢杆菌SH7抑茵物质及其特性CharacteristicsofinhibitivesubstanceproducedbyBacillussubtilisSH7王静'赵廷昌孔凡玉何月秋张成省(1．中国农业科学院植物保护研究所，植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100094；2．中国农业科学院烟草研究所，青岛266101；3．云南农业大学植物保护学院，昆明650201)Wa

2、ngJing‘ZhaoTingchangKongFanyuHeYueqiuZhangChengsheng(1．StateKeyLaboratoryforBiologyofPlantDiseasesandInsectPests，InstituteofPlantProtection，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beijing100094，China；2．TobaccoResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Qingdao266101，S

3、handongProvince，China；3．PlantProtectionCollege，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，YunnanProvince，China)应用芽孢杆菌Bacillusspp．防治病害是病害生定法检测该粗提物质对RS的抑菌活性。物防治的热点，其中Bacillussubtilis因其菌体本身1．2．2抑菌物质的稳定性测定及其产生的抗菌物质在控制病害发生、促进植株生对热的稳定性测定：将由1．2．1步骤得到的粗长等方面均有良好的表现J，在植物病害生物防提抑菌物质于40、6

4、0、80、100及121oC(高压湿热灭治中显示出了广阔的应用前景。作者从烟草根围土菌)条件下各处理20rain，各取100L检测抑菌活壤中分离到一株对烟草青枯病菌RalstoniaSO—性，以原样品和PBS缓冲液为对照。lanacearum有较强防病效果的拮抗细菌SH7菌株对pH值的稳定性测定：取适量粗提抑菌物质，(经鉴定为枯草芽孢杆菌)J，本试验对其分泌的抑并分别将其调成3．0、5．0、8．0、9．0、10．0、11．0不同菌物质进行提取，并’狈0定其部分理化特性，为进一的pH值，静置20rain后，各取上清液100测其抑步纯化抗菌物质提供依

5、据。菌活性，对照为原样品。1材料与方法对蛋白酶的稳定性测定：取适量粗提抑菌物质1．1供试菌株分别用蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶在最适酶促SH7菌株(Bacillussubtilis)分离自烟草根围土条件下(37oC)反应40rain(酶反应终浓度为1mg／壤；烟草青枯病菌Ralstoniasolanacearum(以下简称mL)，取100L测其抑菌活性，以不用酶处理为RS)，由广东省农业科学院植物保护研究所提供。对照。将SH7菌体接种到NB培养基中，28、180r／min对氯仿的稳定性测定：按照1：1取粗提物与氯条件下振荡培养48h，得到的发酵液

6、于4条件下仿混合均匀，静置10～15rain后离心，待残留氯仿储存备用。挥发后，分别取100L有机相和水相作活性检测，1．2试验方法对照为等量氯仿和原样品。1．2．1SH7分泌抑菌物质的提取及其抑菌活性1．2．3不同有机溶剂萃取采用70％饱和度硫酸铵处理SH7发酵液，沉淀取适量粗提物与等体积的有机溶剂(二甲苯、经透析、冷冻抽干后溶解于PBS(NaC1137mmoL／L、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇和甲醇，极性依次增KC12．7mmol／L、Na2HP044．3mmoL／L、KH，P041．4强)进行萃取，萃取液分层后，待有机溶剂挥发，将mmoL／

7、L，pH值为7．6)中，过滤除杂菌，采用杯碟测剩余的液体和水相分别过滤除菌，各取100L测定基金项日：国家烟草专卖局资助项目(110200201008)，北京市科技计划项目(1)0706005000091)，生物资源保护与利用湖北省重点试验室开放基金(2007006)资助项目作者简介：王静，女，1975年生，助理研究员，从事烟草细菌病害生物防治研究，email：wjing323@163．corn通讯作者(Authorforcorrespondence)，email：tczhao@ippcaas．cn收稿日期：2007—04—12维普资讯http:

8、//www.cqvip.com植物保护学报34卷其抑菌活性，设原样品和有机溶剂为对照。抑菌活性。该结果表明，由SH7产生的抑菌物质包1．