枯草芽孢杆菌b9601y2抑菌蛋白活性及产生条件的研究

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1、植物病理学报ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA35(1):30236(2005)枯草芽孢杆菌B96012Y2抑菌蛋白活性及产生条件的研究3汪澈,何月秋,张永庆(云南农业大学植物保护学院,昆明650201)摘要:枯草芽孢杆菌B96012Y2抑菌蛋白可以使棉花红腐病原菌菌丝畸形,呈念珠状,胞壁穿孔,不规则消解,内含物外泄,失活。B96012Y2菌株产抑菌蛋白的最适培养条件为:pH710,37℃培养48h。菌株的马铃薯蔗糖培养液经(NH4)2SO4至80%饱和度盐析能得到011mg/mL以上的粗蛋白,粗蛋白的产量与培养过程

2、中供氧条件、产菌量呈正相关。粗蛋白能耐80℃高温和pH910的碱性,在4℃下,抑菌活性60d内基本不变。关键词:枯草芽孢杆菌;抑菌蛋白;活性;产生条件AntifungalactivityandproductionconditionofcrudeproteinbyBacillussubtilisB96012Y2WANGChe,HEYue2qiu,ZHANGYong2qing(PlantProtectionCollege,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)Abstract:A

3、ntifungalproteinproducedbyBacillussubtilisB96012Y2ledtodeformation,breadstring2like,perforation,irregulardecomposition,protoplasmleakageanddeathofFusariummoniliforme(causingfusariumrotofcotton)hyphae.TheoptimalconditionfortheproteinyieldwastogrowinpotatosugarjuiceatpH71

4、0and37℃for48h,inwhichcrudeproteincouldbeobtainedabout011mg/mLwithammoniumsulphateat80%saturation.Theproteinyieldwaspositivelyrelatedtoairvolumeandthebacterialpopulation.Thepro2teincouldtolerate80℃andpH910andkeepitsantifungalactivitystablefor60daysat4℃.Keywords:Bacilluss

5、ubtilis;antifungalprotein;activity;productioncondition中图分类号:S476文献标识码:A文章编号:041220914(2005)0120030207枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)作为植物病发性抗菌物质的拮抗作用为最主要的防病机[8]害生防细菌之一,具有较强的防病作用。由于该菌理。枯草芽孢杆菌B96012Y2是本实验室分离能产生耐热的芽孢,既易于生产、剂型加工,又利于的一株具有广谱抑菌作用的生防菌株,该菌株对水存活、定殖与繁殖。大量实践证明,枯草芽孢杆菌稻稻瘟病菌、

6、水稻纹枯病菌、小麦根腐病菌、马铃薯制剂的稳定性、与化学农药的相容性和在不同植物晚疫病菌等30多种重要植物病原真菌均有很强的[9]不同年份防效的一致性方面均优于不产芽孢的细抑制作用。了解其抑菌机理及其外泌性蛋白的菌和真菌生防菌株。由于上述优点,其生防作用和抑菌活性,可为进一步开发和应用、纯化抑菌蛋白[1~7]生防机理一直是国内外的研究热点。研究表提供实验依据。本文就该菌株抑菌蛋白的作用机明,该菌的生防机理包括竞争作用、拮抗作用、诱导理和产生条件进行了研究。植物抗性等方面,尤以产生抗生素、抑菌蛋白和挥收稿日期:2003208220;修回日

7、期:2004206229基金项目:云南省应用基础基金资助项目(2000C0052M)通讯作者:何月秋,教授,主要从事水稻分子育种和植物病害生物防治研究;E2mail:heyueqiu@1631net第一作者:汪澈(1976-),女,辽宁省沈阳市人,硕士,从事植物病害生物防治研究。©1994-2016ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net1期汪澈,等:枯草芽孢杆菌B96012Y2抑菌蛋白活性及产生条件的研究31

8、114蛋白粗提液抑菌活性的测定1材料与方法以平板扩散法测定粗蛋白的抑菌活性。将粗111供试菌株及指示菌株蛋白以磷酸缓冲液(pH615)稀释成不同的浓度,生防菌株枯草芽孢杆菌B96012Y2是本实验测定浓度与抑制棉花红腐病

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