蜂胶中类黄酮化合物分析方法的研究进展

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1、万方数据3蜜蜂杂志(月刊)JOURNALOFBEE(Monthly)NO．32010Mar．蜂胶中类黄酮化合物张翠平，(浙江大学动物科学学院，摘要：类黄酮类化合物具有抗氧化、抗菌等诸多生物活性，是蜂胶中最重要的生物活性物质。综述了国内外蜂胶中类黄酮类化合物分析方法的研究进展。测定过程包括类黄酮的提取、分析分离以及定性和定量；分析技术包括分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法以及色谱技术联用等。关键词：蜂胶；类黄酮；分析方法中图分类号：S896．6文献标识码：A文章编号：l003-9139(2010)03-0003—05AdvancesintheAnaly

2、sisofFlavonoidscompoundsinPropolisZHANGCui—ping，HUFu—liang(CollegeofAnimalScienceS．ZhejiangUniversity,Hangzhou310029)Abstract：Flavonoidsarethemostimportantbiologicalsubstancesinpropolis,whichhavemanybiologicalactivitiessuchasantioxidativeandantibacteria]activities．WeDre—senthereanoverviewofcu

3、rrentanalyticalmethodsformeasuringflavonoidsinpropolis．TheanalyticalprocedureincludestheirextractionfromthecrudepropoliSanalyti-calseparation。quantificationandquality．Thetechniquesincludespectrophotometry'thinlayerchromatography,gaschromatography,highpressureliquidchromatography,capil—-laryel

4、ectrophoresisandHyphenatedChromatographicTech—_niques．Keywords：propolis；flavonoids；analyticalmethods类黄酮是蜂胶中最丰富、活性最强的物质。它随蜂胶来源的不同I而有很大变化，这些差异口r能会影响蜂胶的生物活性及临床作用。因此。蜂胶中类黄酮物质分析方法的研究，对蜂胶及其制品的质量控制有十分重要的作用。本文x,-J-近年来国内外蜂胶中类黄酮化合物分析方法的研究进展作了综述。1样本制备方法原胶不能直接利用，必须用溶剂提纯。提纯可以去除非活性物质，保留多酚类成分。用乙醇提纯是最常用的方法，可

5、去除蜡质而保留多酚类化合物。采用分析方胡福良牛法的研究进展浙江杭州310029)的乙醇浓度主要有70％t⋯、80％I蝴、950Jb

6、61及无水乙醇17-81。与无水乙醇相比，用含水乙醇提取可以得到不含蜡的醍剂，而且多酚类物质含量更高191。用不同浓度的乙醇测定其提取物的吸光度发现．80％乙醇提取物在290nm有最大吸收，说明提取出的类黄酮浓度最高(特别是山奈素、金合欢素和异鼠李索)，而用其他浓度的乙醇时，可以提取出更高浓度的其他类黄酮。如60％乙醇提取最多的为异樱花素、槲皮素和山奈酚，而70％乙醇主要提取出松属素和樱花素【IOl。此外。也有用纯水【10l、甲醇I“1、己烷、丙酮1

7、12-uI和氯仿1141提取的。原胶提取方法为：从蜂箱中取下的蜂胶先冷冻脱水．粉碎成粉末，然后，一定量的粉末溶解于溶剂中(通常为I：10，w／v)，室温下放置24h嗍，或者在70℃下振荡提取30minflel。然后过滤，重复几次以使多酚提取完全。然后减压蒸干溶剂再溶解13I或者离心获得上清液№to]，然后进行进一步的分析。2分光光度法紫外分光光度法具有重复性好、准确、简便、易掌握和不需要复杂仪器设备等优点，是最常规的分析方法睁一m。该方法可以确定蜂胶中总酚或总类黄酮嗍，总二氢黄酬或二氢黄酮醇，总黄酮或黄酮醇I圳。GB／T20574—2006t”I以芦丁为X．-j-照晶。用Al“作

8、显色剂，于415l'lm测定吸光度来确定蜂胶中总黄酮含量。但是。由于蜂胶中成分复杂，富含多种酚类物质，x,-J吸光值产生干扰，影响实验结果的准确性。而且不同类型的类黄酮与Ap+作用形成的复合物的吸收波长与415HB有很大偏差。大部分天然黄酮和黄酮醇的吸收波长在390—4401'1111，而二氢黄酮与二氢黄酮醇的吸收波长在310～320nm。显然，在415am处测定蜂胶中总黄酮含量ml"。没有检测到二氢黄酮和二氢黄酮醇的量。而其又是杨树型蜂胶的主要成分，因此，得到的总黄酮含量偏低。