茶花蜂花粉中总黄酮的提取与含量测定

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1、万方数据第26卷，第2期209年3月光谱实验室ChineseJournalofSpectroscopyLaboratoryV01．26。No．2March，209茶花蜂花粉中总黄酮的提取与含量测定田宝娟①王孟歌康永胜(保定学院化学系河北省保定市七一东路3027号071000)摘要用超声波辅助乙醇溶液浸提法和索氏提取法提取茶花粉中黄酮化合物。利用分光光度法．以芦丁为标准品．对其进行络合显色，在510nm处测定提取物中总黄酮的含量。对于两种提取方法．茶花粉中总黄酮的含量以芦丁计算分别为11．25％和9．03％，平均加标回收率分别分别为99．20

2、％和98．22％。关键词分光光度法，茶花，蜂花粉．黄酮。中图分类号：R15，0657．32文献标识码：B文章编号：1004—8138(2009)02—0303—031前言茶花蜂花粉是蜜蜂采自茶树花蕊聚集而成，包含了蜜蜂的唾液和花蜜，味甘、微碱性、清凉无毒。有清头目、除烦渴、化痰、消食、利尿、解毒之功效。国内外文献对黄酮的测定多采用HPI，C法‘h削、比色法‰妇等，高效液相色谱方法需要较多单体标准品，且受实验条件所限。本文分别采用超声波辅助乙醇溶液浸提法和索氏提取法提取茶花粉中黄酮类化合物，以芦丁为标准品，利用分光光度法测定了茶花花粉中总黄酮

3、的含量，方法简便、快速、重现性好，可作为检测茶花花粉中总黄酮含量的一种手段。2实验部分2．1仪器与试剂UVl901紫外可见分光光度计(北京普析仪器公司)；B3200S—T超声波清洗器[必能信超声(上海)有限公司]；GZX一9240ME电热鼓风干燥箱(上海博迅实业有限公司)；芦丁对照品(中国生物制品检定所)；无水乙醇，甲醇，石油醚均为分析纯，实验用水为二次去离子水。2．2对照品溶液的制备精密称取在120C干燥至恒重的芦丁对照品10．8mg，置50mL容量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加50％乙醇水溶液至刻度，摇匀，为对照品储备液。2

4、．3供试品溶液的制备精密称取茶花粉细粉约10．og，置250mi。锥形瓶中，加70％乙醇水溶液120ml。，密闭，超声浸提1h，放置过夜，过滤，滤渣用少量70％乙醇水溶液洗涤2次，合并滤液，置鼓风干燥箱中蒸干，残渣加适量50％乙醇溶解，转移至分液漏斗中，用10mI。石油醚萃取2次，弃去石油醚，转移至250mi。量瓶中，加50％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品储备液，取供试品储备液25mL，滤过，置于①联系入·电话：(0312)5972186；E—mail,tbj2001@163．com作者简介：田宝娟(1971一)．女·河北省保定市入·副教授·

5、主要从事仪器分析的教学与科研工作．收稿日期z2008—05—20；接受日期：2008—09—29万方数据光谱实验室第26卷50mI。容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品储备液I。男取茶花粉细粉lg，准确称定，置于索氏提取器中，加人乙醚加热回流提取震提取液光色，弃去乙醚液，药浚挥去乙醚，加甲醇继续提取至无色，提取液在鼓风于燥箱审蒸干，残渣加∞％乙醇水溶液溶解，转移至50mL容量瓶审，加50％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品储备液。取供试品储备液，过滤，准确量取续滤液5mL，麓25mi。容量瓶巾，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品储备液Ⅱ。3结

6、果与讨论3．1校准曲线与线性范围准确量取对照品储备泼l、2、3、4、5、6mI，，分别至25m1。容量瓶啦，各加水至6mI。，加入s％亚硝酸钠溶液lmI。，摇匀，放置6min，加lo％硝酸镪溶液lml，，摇匀，放嚣6min，加4％氢氧化钠试液10mI。，弭加水至刻度，摇匀，放置15rain，以相应试剂为空白，立即在510nm波长处测定吸光度，以吸光度为缴坐标，浓度为横黛标，求线性方程，结聚表醒，在0。oo一5l。84Fg／mI，范围内呈线蛙关系良好，线性相关方程：A=0．01134C+0．00125，线性相关系数为0．9999。3．2样品测

7、定准确量取供试晶储备波l秘l各2mt，，分割莲25mi。容量瓶审，照棱准鼗线裁备顼下的方法，依法显色、测定吸光度，由线性回归方裰计算供试品溶液中芦丁的浓度，本品按干燥品计算，含总黄酮(以无水芦丁计)分别为9．03oA和11．25oA。3。3精密度实骏按提取方法不同，分别准确称取5份茶花粉样品，按上述条件测定总黄酮含量，每个样品平均测定5次，取其平均值，测定结果见表l。表1方滚的精密度提取方法样品号样紫胖均≯粜(R％SD)提取方法样品号榉品质量平均测定结果Rs?tgJtg，k翔，(g)妇)(％)l0。96620．i0532。031’9．825

8、40。88982，8921．00870．11332．152’10．03610．90350．30索氏提取30．99850．11401．97超声浸提3’9．79520．90211．9