螺旋藻干粉中β胡萝卜素提取工艺研究

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1、万方数据2010年第06期中国食物与营养FoodandNutritioninChinaNo．06，2010螺旋藻干粉中p一胡萝卜素提取工艺研究王海英1，杜为民2，李雯2，李路宁2，岳洋2(1西宁市工程咨询院，西宁810000；2北京林业大学生物学院，北京100085)摘要：B一胡萝卜素具有清除氧自由基以及抗癌、预防心血管疾病、抗辐射等多种生理功能，藻类中含有大量的的D一胡萝卜素。在探讨了革取剂、温度、时间、固液比对D一胡萝卜素提取率影响的基础上，找到了从螺旋藻干粉中提取B一胡萝卜素的最佳提取工艺件为：以乙酸乙酯为革取荆，

2、固液比为1：1o(mg／mO，65。c下恒温处理6h。关键词：螺旋藻；D一胡萝卜素；有机溶剂提取D一胡萝h素是一种良好的活性氧猝灭剂，清除羟基自由基的能力很强，对单线态氧(10：)的淬灭能力也明显高于a一生育酚和维生素C⋯，因此D．胡萝h素能预防DNA和脂蛋白的氧化损伤【2】，具有防治癌症，预防心血管疾病等多种生理功能，在保健品市场有良好的商业价值。p．胡萝h素广泛存在于动植物中，在藻类中含量最高。螺旋藻是一种新兴的食疗品，其中D一胡萝卜素的含量较高，69螺旋藻中的D一胡萝h素含量相当于牛乳28瓶或鸡蛋20个口1。目前从

3、天然植物中萃取D一胡萝h素的技术主要是有机溶剂提取、超临界萃取等，超临界萃取具有萃取效率高，速度快，无污染，工艺简单，萃取物色味纯正等优点，但设备投资大，生产成本高，不适合大规模工业化生产。因此本实验尝试投资少的有机溶剂提取法来研究从螺旋藻干粉中提取D-胡萝h素的最佳工艺。1材料与方法1．1材料螺旋藻干粉，2008年10月购于北京特诚农林副产品经销部，然后置于阴凉抽屉中保存。1．2试剂与仪器石油醚(沸程90～120℃)、丙酮、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷，均为分析纯，北京化工厂，D一胡萝h素标样，sigma公司；722S紫

4、外可见分光光度计，上海棱光技术有限公司；DHP一9272型电热恒温培养箱，上海一恒科技有限公司。1．3D一胡萝卜素含量的测定∞】准确配制浓度分别为0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0“g／ml的p一胡萝h素标准溶液于25IIll棕色容量瓶中，以石油醚定容，；{!E450nm处测定其吸光度值，绘制标准曲线。1．4样品的测定样品测定时，先将有机溶剂用旋转蒸发仪将蒸干，然后加入石油醚萃取，再经过过滤，转移至50ml容量瓶中，最后用石油醚定容至刻度，塞紧盖子颠倒10下至混合均匀，在450nm处测定OD值。每个样品测定3

5、次，取平均值。对照标准曲线图得到每个样品的D-胡萝h素含量。1．5萃取溶剂的选择在5个具塞试管中各加入0．19螺旋藻粉后，再加入10ml石油醚、丙酮、正己烷、，乙酸乙酯，二氯甲烷。于50"C封口避光保持3h。1．6料液比的单因素实验在5个具塞试管中加入0．19螺旋藻粉后，再分别加入5ml、10ml、15ml、20ml，25ml最佳萃取溶剂，于504C封口避光保持3h。测定D一胡萝h素含量，方法同1．4。1．7萃取温度的单因素实验在5个具塞试管中加入0．19螺旋藻粉、10ml最佳萃取溶剂后，分别于50℃，55℃，60"(2

6、，65℃，70"(2下处理3h，测定D一胡萝h素含量，方法同1．4。作者简介：王海英(1968～)，女，青海西宁人，助理研究员，研究方向：食品企业投资咨询等。通讯作者：杜为民万方数据王海英等：螺旋藻干粉中D一胡萝h素提取工艺研究651．8萃取时间的单因素实验在5个具塞试管中加入o．19螺旋藻粉、lOml最佳萃取溶剂后，于最佳温度条件下，密封避光处理3h，4h，5h，6h，7h。测定D一胡萝h素含量，方法同1．4。1．9正交实验设计采用L。(33)正交试验表，以乙酸乙酯为提取溶剂，选取料液比、萃取温度、萃取时间为3个因素，

7、每个因素取3个水平，其因素水平见表1。表1正交实验的因素水平2结果与分析2．16一胡萝卜素标准曲线图由图1可以看出，D一胡萝卜素标准曲线的线性关系较好，能应用于D一胡萝卜素的检测。y=3．7176x-0．02OO．20．40．60．8吸光光度值围lD一胡萝卜录的标准曲线2．2有机溶剂种类的影响由表2可以看出，提取率由高到低排分别为：乙酸乙酯，丙酮，正己烷，石油醚、二氯甲烷，乙酸乙酯的提取效果最好。在下面的实验过程中，均以乙酸乙酯为萃取剂。表2不同萃取溶剂提取D一胡萝卜素的含量2．3料液比的影响由表3所示，当料液比为1：1

8、5g／ml时，萃取效果较好，此时萃取物中的D一胡萝卜素含量达到最高值。表3不同料液比萃取后的D一胡萝卜素含量2．4萃取温度的影响由图2可知，随着温度的增加，B一胡萝b素的含量先呈上升趋势，当温度达到60"(3时，D一胡萝h素含量最大，达1．233“g／ml。此后随着温度的增加，D一胡萝h素的含量开始平缓地下降。说明适