黑木耳多糖对小鼠免疫功能的影响

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1、动物医学进展。2009，30(7)：23—25ProgressinVeterinaryMedicine黑木耳多糖对小鼠免疫功能的影响张会新，刘洪雨。，刘畅，刘玉芬h(1．哈尔滨师范大学生命科学与技术学院，黑龙江哈尔滨150025；2．黑龙江省动物卫生监督所，黑龙江哈尔滨150020)摘要：从黑木耳中提取多糖，研究其对小鼠免疫功能的影响。通过灌胃的方法检测不同剂量黑木耳多糖对小鼠免疫器官发育、溶血素生成和巨噬细胞吞噬功能的影响。结果显示，黑木耳多糖可明显提高小鼠脾脏和胸腺指数，促进脾脏及胸腺的发育，促进巨噬细

2、胞的吞噬活性，明显增强小鼠的体液免疫功能。研究表明黑木耳多糖具有明显的增强小鼠免疫功能的作用。关键词：黑木耳；多糖；免疫功能；小鼠中图分类号：$852．43文献标识码：A文章编号：1007—5038(2009)07—0023—03黑木耳(Auriculariaauricula)是一种药用和作用1h；对提取液10000r／min离心10min，取上食用的大型真菌，属层菌纲木耳科木耳属n]。自古清用无水乙醇沉淀后再次10000r／min离心以来，就有用黑木耳治疗多种疾病的记载。现代研10rain，取沉淀用冻干机

3、冻干后为粗制黑木耳多糖。究表明黑木耳的多种生物学活性与其多糖成分密切将粗制黑木耳多糖进行DEAE—cellulose52层析柱相关，如可以明显降低空腹和餐后的血糖水平，增加分布洗脱，以蒽酮一硫酸法检测黑木耳多糖的含量，胰岛素的分泌l2]。目前，人们对多糖成分进行了深试验前用生理盐水配置成8g／L。入的研究，发现其可通过多条途径对免疫系统进行1．2．2对小鼠免疫器官指数的影响参照文献调节。黑龙江省作为具有丰富林木资源的地区，黑[7—9]，取小鼠4O只，随机分为4组，每组10只。1木耳的栽培地域广泛，历史悠久，

4、是百姓餐桌上备受组、2组及3组分别灌胃黑木耳多糖50、100、欢迎的食品，然而关于黑木耳多糖对免疫系统调节150mg／kg，4组为对照组，灌胃等体积的生理盐水。作用的报道较少。本研究从黑木耳中提取多糖成连续灌胃10d后各组小鼠称重，颈椎脱臼处死小分，观察其对小鼠免疫器官的发育及巨噬细胞吞噬鼠，取脾脏和胸腺吸干后称重，计算脏器指数，即免功能的影响，为开发黑木耳多糖在功能性食品、保健疫器官重量(rag)／体重(g)。品和医药领域的应用提供依据。1．2．3对小鼠血清溶血素水平的影响参照文献l材料与方法[7，i0]

5、，取3只豚鼠，心脏采血制备混合血清，然后用1．1材料生理盐水配制1O9／6的混合血清，作为补体备用。实验实验动物为普通级昆明系小鼠，雌雄各半(4周动物分组及剂量同i．2．2。1组、2组和3组按照不同龄，体重20g-L_-3g)，购自哈尔滨医科大学实验动物剂量灌胃黑木耳多糖持续共9d，仅在第2天灌胃后中心；豚鼠，由哈尔滨兽医研究所实验动物中心提每只小鼠腹腔注射5的鸡红细胞生理盐水0．2mL，供；黑木耳购自黑龙江省嘉荫县；DEAE—cellulose52进行免疫，在第9天灌胃2h后IIII取血，离心分离血由哈尔

6、滨伊事达生物工程有限公司提供。清，用生理盐水以1：100稀释血清，再取1mL稀释1．2方法后的血清与5鸡红细胞0．5mL和1O补体0．5mL1．2．1黑木耳多糖的制备依据参考文献[3]进行混匀，37℃孵育30min，0℃冰箱终止反应，离心取上提取并测定含量。具体为将黑木耳磨碎成粉状，用清液于540nm处测定oD值。同时设立不加血清的pH5．0的磷酸盐缓冲液初步浸提；再用纤维素酶在空白管，取上清液作为空白对照。50℃作用4h，80℃作用30min后调整pH到7．0；1．2．4对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响采用鸡

7、再加入蛋白酶于液体中分别在45℃作用3h，80℃红细胞吞噬试验，参照文献[11—12]进行，实验动物收稿日期：2009—03-26基金项目：受蔡火石生命科学发展基金会全额资助作者简介：张会新(1978-)，男．黑龙江哈尔滨人，讲师，硕士。主要从事动物生物学研究。*通讯作者24动物医学进展2009年第3O卷第7期(总第192期)分组及剂量同1．2．2。于灌胃10d后制备5的肉吞噬指数一200个巨噬细胞吞噬红细胞总数／200汤，取1mL注射小鼠的腹腔，连续2d，第3天颈椎1．2．5数据处理采用方差分析方差齐则计

8、算F脱臼处死小鼠后，打开腹腔用Hanks液反复冲洗，值并进行组间比较，若不齐则进行变换再进行方差收集冲洗液，巨噬细胞计数，调整浓度为10／mL备分析，统计过程采用SSPS11．5判断有无显著性差用。取4成年公鸡红细胞0．5mL与2mL上述巨异。噬细胞于离心管中混匀，37℃孵育30min，2结果l000r／min离心10min，弃上清后用生理盐水重悬2．1黑木耳多糖对小鼠免疫器官指数的影响沉淀细胞，推成薄片，吉姆萨