二细菌生理及外界因素对细菌的影响课件

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1、实验四球菌、杆菌实验内容一，血浆凝固酶试验（球菌）二，肥达试验（WidalTest）（杆菌）Pyogeniccoccus奈瑟菌葡萄球菌链球菌葡萄球菌Staphylococcusp.106，《医学微生物学》，第二版，贾文祥主编，人民卫生出版社。链球菌Streptococcus肺炎链球菌Streptococcuspneumoniae溶血试验hemolysistestBacteriaaregrownonsheepbloodagarplates(containing5%sheepblood):α-hemolyticreaction,par

2、tialhemolysiswithagreencoloration：β-hemolyticreaction,completehemolysis：γ-hemolyticreaction,nohemolysis:StaphylococcusaureusStreptococcuspyogenesStaphylococcusepidermidismoststrainsStaphylococcussaprophyticusStreptococcuspneumoniae奈瑟菌Neisseria脓汁涂片、革兰染色、镜检血琼脂平板观察菌落特征及溶血情

3、况生化反应、致病力试验及药敏试验37℃24h临床应用举例：脓汁标本病原性球菌的分离鉴定G+、葡萄状排列；菌落中等大小、不透明、金黄色；完全溶血，可能是金黄色葡萄球菌;可进一步做：血浆凝固酶试验甘露醇发酵试验G+、链状；菌落小、半透明；完全溶血，为乙型溶血性链球菌。G+、短链状；菌落小、半透明；绿色不完全溶血环，为甲型溶血性链球菌或肺炎链球菌可进一步做：胆汁溶菌菊糖发酵试验若在中性粒细胞内外发现G-双球菌，可初步诊断为奈瑟菌：若在脑脊液标本中发现，极有可能是脑膜炎奈瑟菌；若在泌尿、生殖系统来源的标本中发现，极有可能是淋病奈瑟菌。一，血

4、浆凝固酶试验（操作）一人一组实验步骤（葡萄球菌血浆凝固酶试验）取一个载玻片，划分3格，标记1、2、3。在格内分别滴加：1：兔血浆一滴2：兔血浆一滴3：盐水一滴以接种环挑取细菌混悬于液滴中：1：金黄色葡萄球菌2：白色葡萄球菌3：金黄色葡萄球菌立即观察结果。实验内容一，血浆凝固酶试验（球菌）二，肥达试验（WidalTest）（杆菌）埃希菌属沙门菌属志贺菌属肠道杆菌HAg(flagella)somaticOAg(lipopolysaccharide)K/ViAg(capsule)二，肥达试验（WidalTest）（操作）4人一组肥达试验（

5、WidalTest）用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及甲型副伤寒、肖氏沙门菌、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒，副伤寒熟悉肥达试验的操作方法结果观察结果分析肥达试验结果观察-凝集反应的强弱标准“++++”液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底“+++”液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底“++”液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物“+”液体较混浊，可见极少量凝集物“-”液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点（与对照管相似）肥达试验结果观察-血清效价能与

6、一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集（即“++”凝集）的血清最高稀释倍数，称为血清的效价。血清的效价代表着血清中抗体的含量，其效价愈高，所含抗体的量愈多。如血清最低稀释倍数（1∶40）仍无凝集，则视为阴性或效价低于1∶40；如血清的最高稀释倍数（1∶1280）仍完全凝集，则示血清效价高于1∶1280。实验步骤取小试管32支，分成4排，每排8支，依次标号，并于小试管内各加入0.5ml生理盐水：1-1、1-2、1-3、1-4……1-82-1、2-2、2-3、2-4……2-83-1、3-2、3-3、3-4……3-84-1、4-2、4-3、4-

7、4……4-8在每一排第1管中各加患者血清0.5ml，吸打混匀，吸取0.5ml加入第2管稀释，从第2管吸取0.5ml加入第3管……依此作对倍稀释至第7管，弃去0.5ml。第8管不加血清作为空白对照。2~4排按同法稀释。第8管均不加血清作为空白对照。按8、7、6、5、4、3、2、1的顺序，分别加入抗原:第1排各管:加入伤寒H抗原0.5ml第2排各管:加入O抗原0.5ml第3排各管:加甲型副伤寒(PA)H抗原0.5ml第4排各管:加乙型副伤寒(PB)H抗原0.5ml。将各管混匀，置37℃水浴箱中16~18小时后观察结果。粪便标本肠道杆菌的分

8、离鉴定克氏双糖铁培养基尿、靛、动培养基分析结果SS平板EMB平板挑取可疑菌落粪便乳糖葡萄糖硫化氢尿素靛基质动力大肠杆菌黄色+--++痢疾杆菌红色+--+/--伤寒杆菌红色++/---+副伤寒杆菌红色++--+变形杆菌红色