质谱技术简介及其在医学检验中的应用课件

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1、质谱技术简介及其在医学检验中的应用MSTechnologyinmedicallaboratory质谱•光谱通常医学检验方法是基于光谱的分析。质谱是运用电磁学原理，对荷电分子、亚稳分子碎片进行分离、分析，与光谱学分析完全不同。随着质谱技术的发展，质谱在质检、环境、临床检验中的应用越来越广泛。准确快速高通量微量检测成本低能够分析分子结构质谱的特征CONTENT目录质谱在临床检验中的应用质谱仪的工作原理质谱仪的分类CONTENT目录质谱仪的工作原理质谱仪是按照离子的质荷比(m/z)不同,来分离不同分子量的分子.测定分子量进行成

2、分和结构分析.离子的生成方式有失去或捕获电荷(如:电子发射,质子化或去质子化)计算机数据处理系统真空系统加速区进样系统离子源质量分析器检测器质谱计框图IonisationsourceDetectorOutputIonseparation离子源质量过滤/分析器检测器进样部分样品板LC或GCEI源FAB源MALDI源ESI源QuadruopoleIontrapTime-of-flight电子倍增器闪烁计数器+++++++++++++++++++++++++++++++++++++离子源和质量分析器的真空度需保持在10–4~1

3、0–5Pa和10–5~10–6Pa。因为：大量氧会烧坏离子源的灯丝；用作加速离子的几千伏高压会引起放电；引起额外的离子－分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。质谱计构造:真空系统在不破坏真空度的情况下，使样品进入离子源。气体可通过储气器进入离子源。易挥发的液体，在进样系统内汽化后进入离子源。难挥发的液体或固体样品，通过探针直接插入离子源。进样系统SampleIntroduction:（直接进样杆）DirectInsertionProbe(DIP)DirectinsertionprobeConceptuallyveryeas

4、y,practicallyverytrickySampleIntroduction:GasChromatogram-MS(GC-MS)GCoutputtomassspectrometerSamplealreadyingasphaseSampleIntroduction:LiquidChromatogram-MS(LC-MS)DirectinfusionofsampleinsolutionSyringepump:slowsteadyinfusionOutputfromHPLCSeparationandidentificat

5、ionofcomponentsVastmajorityofsolutionissolventMustremovesolventto“see”analyteHistorically:extrapumpingandheatingApplicabletoelectrosprayionisationESI:seelater分子失去电子，生成带正电荷的分子离子分子离子可进一步裂解，生成质量更小的碎片离子+.M+.A++B+CD++.中性分子或碎片R.M+eM+.+2eM-.小于1%50-70eV离子源◆质量分析器是质谱计的核心◆

6、不同类型的质量分析器构成不同类型的质谱计◆不同类型的质谱计其功能，应用范围，原理，实验方法均有所不同。质量分析器检测记录系统质量分析器分离并加以聚焦的离子束，按m/z的大小依次通过狭缝，到达收集器。经接收放大后被记录。电子轰击电离ElectronImpactIonization,EI化学离子化ChemicalIonization,CI场电离，场解吸FieldIonizationFD,FieldDesorptionFD快原子轰击FastAtomBombardment,FAB基质辅助激光解析电离Matrix-Assisted

7、LaserDesorptionIonization,MALDI电喷雾电离ElectrosprayIonization,ESI大气压化学电离AtmosphericPressureChemicalIonization,APCI离子化的方法++++:R1:R2:R3:R4:e+M+(M-R2)+(M-R3)+MassSpectrometer(M-R1)+电子轰击电离ElectronImpact（EI）电子轰击电离又称为电子轰击，或电子电离。是应用最普遍，发展最成熟的电离方法。轰击电压50-70eV,有机分子的电离电位一般为7-

8、15eV。可提供丰富的结构信息。灵敏度高，能检测纳克(ng)级样品；有些化合物的分子离子不出现或很弱电子轰击电离EI基质辅助激光解吸电离(MALDI)基本原理：将样品分散在基质分子中并形成共结晶后直接进样,当用激光(337nm的氮激光或355nm的固体激光器)照射晶体时,基质吸收了激光的大部分能量，使基质分子和样品获