高浓度氧抑制兔动脉平滑肌细胞的增殖

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1、高浓度氧抑制兔动脉平滑肌细胞的增殖　　摘要:目的探讨缺氧和高氧环境对兔主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用，间接判断缺氧与冠脉再狭窄的关系和研究氧疗是否能用于PTCA支架后冠脉再狭窄的防治.方法用含100mL・L-1小牛血清的RPMI1640培养液体外培养新西兰白兔的主动脉平滑肌细胞至3～7代，将含50mL・L-1小牛血清的RPMI1640培养液与动脉平滑肌细胞的混悬液100μL加入96孔培养板中培养，按照实验分组分别在100，210，250，500和750mL・L-1O2及纯氧环境中培养主动脉平

2、滑肌细胞48h.用MTT法和3H-TdR掺入法检测动脉平滑肌细胞增殖的数量.结果以210mL・L-1O2环境下动脉平滑肌细胞增殖的数量为基准对照组，其他各组为实验组.500mL・L-1O2至纯氧环境下动脉平滑肌细胞的增殖显著低于对照组（P<0.05），250mL・L-1O2与210mL・L-1O2环境下主动脉平滑肌细胞的增殖无显著差异（P>0.05），100mL・L-1O2环境下动脉平滑肌细胞的增殖显著高于对照组（P<0.05）.结论动脉平滑肌细

3、胞的增殖随着培养环境中氧浓度升高而降低，缺氧促进动脉平滑肌细胞的增殖，高氧对动脉平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用;氧疗可能有助于降低冠脉再狭窄率，并为高压氧治疗其他以动脉血管平滑肌细胞增殖为主的疾病提供理论根据.　　Keyoothmusclecells;coronaryrestenosisAbstract:AIMToinvestigatetheeffectofdifferentoxygenpercentontheproliferationofaorticsmoothmusclecells（ASMCs），indirectlyasses

4、stherelationbetinalcoronaryangioplasty（PTCA）andin-stent.METHODSNeL・L-1calfplasma.100μlmixtureofASMCsandRPMI1640including50mL・L-1calfplasmaixturethatconsistsofoxygenandN2accordingtoex-perimentalgroups（100mL・L-1O2，210mL・L-1O2，250mL・L-1O

5、2，500mL・L-1O2，750mL・L-1O2，1000mL・L-1O2）.MTTmethodand3H-TdRincorporationmonitoredthenumbersofASMCsproliferation.RESULTSNumberofASMCsproliferationin500mL・L-1O2，750mL・L-1O2，1000mL・L-1O2groupsL・L-1O2group（P<0.05），higherin

6、100mL・L-1O2group（P<0.05），butsimilarin250mL・L-1O2group（P>0.05）.CONCLUSIONTheoxygentherapycouldbeusedtopreventandtreatthecoronaryrestenosisafterPTCAandin-stent.　　0引言　　氧是人体代谢必不可少的元素，缺氧可以导致动脉血管平滑肌细胞（ASMCs）过度增殖1］.但是高氧对ASMCs增殖的抑制作用却很少有报道.ASMCs过度增殖是造成经皮腔内冠

7、脉成形术（PTCA）和支架术后冠脉再狭窄的主要病因［2］，因此，研究高浓度氧对ASMCs增殖的抑制作用具有重要的临床意义.　　1材料和方法　　1.1材料高氧与缺氧细胞培养室:本实验室自制;CO2培养箱（MODEL2300）:美国Sheldon制造公司生产;酶联免疫检测仪（DG3022A）:华东电子管厂生产;新西兰白兔，体质量（1.5±0.5）kg，由本校实验动物中心提供;小牛血清:浙江生物制品研究所生产;RPMI1640培养基:美国Sigma公司生产;2，5-二甲苯基恶唑（PPO），1，4-双-（5-苯基恶唑）苯（POPOP）:上海

8、化学试剂一厂生产;二甲苯:西安化学试剂一厂生产;四唑盐（MTT）:华美生物工程公司提供;3H-TdR:中国科学院上海原子能研究所生产.　　1.2ASMCs的体外培养无菌取出新西兰白兔主动脉段，刮除内膜后，剥脱中膜的平滑肌层，按照Ros