药学专业毕业论文 外文翻译_8

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1、本科毕业论文(设计)外文翻译学院专业药学姓名学号指导老师职称合作老师职称外文题目(原文)High-levelexpressionandpurificationofTat-haFGF19-154译文:高表达和纯化的Tat-haFGF19-154High-levelexpressionandpurificationofTat-haFGF19-154YadongHuang,YulanRao,ChengliFeng,YanmeiLi,XiaopingWu,ZhijianSu,JianXiao,YechenXiao,WenkeFeng,XiaokunLi摘要:人的酸性成纤维细胞生长因

2、子在各种组织损伤后能够刺激修复和再生中央和周围神经,然而,它不能穿过血脑屏障。为了生产具有细胞渗透性的治疗性的酸性成纤维细胞生长因子,我们用Tat-PTD技术融合haFGF19-154基因。在这之后用PCR技术扩增编码序列,使pTathaFGF19-154-His在大肠杆菌BL21中得以表达。最佳表达的可溶性融合蛋白超过了总细胞蛋白的36.7%。Tat-haFGF19-154-His的重组体被具有Ni–NTA活性,葡聚糖凝胶G-25和肝素亲和的色谱柱组合体纯化95%。这数据用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺酰胺凝胶电泳检测得到,最终产率为171mg/l培养物。纯化的Tat-haF

3、GF19-154-His具有在Balb/c3T3细胞中不同的有丝分裂促进活性,用MTT法测量它的半数有效量为3.931×10−4μmol/l。Tat-haFGF19-154-His的蛋白以每剂量为10mg/kg静脉注射在大脑皮层和海马中检测得到。关键词:酸性成纤维细胞生长因子;Tat-PTD表达;纯化;有丝分裂促进活性前言人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)是一个有力的广谱促细胞分裂剂。体外研究显示酸性成纤维细胞生长因子能刺激细胞生长过程中对胚层和神经外胚层来源(Gimenez-GallegoandCuevas1994)的影响。奎瓦斯等在1997年到1998年间发现,酸性

4、成纤维细胞生长因子具有内分泌类的活动,可以作为一个血管扩张,内脏缺血的保护者,调节神经。酸性成纤维细胞生长因子在神经生长和发展中起着举足轻重的作用。以往的研究表明,酸性成纤维细胞生长因子在海马,纹状体和下丘脑神经细胞增殖的同时增强生存能力和刺激睫状视网膜神经节以及刺激周边神经元。这是1988年立顿等人和1991维尔科克厮等人所证明的。haFGF能够促进神经上皮细胞迁移和规范对脑神经祖细胞的分化和促进修复和再生有伤的中枢和外周神经,之后还能营养作用神经元。这是英杰和博恩在1992年及纳曼在1996年所证明的。外源性的haFGF具有以衰减最初的毒物的可创性和持续时间来减轻海马细

5、胞的消亡和神经元细胞的消亡(Cuevasetal.1994;CuevasandGimenez-Gallego1996)。haFGF有效保护了由脑缺血所引起的损害海马锥体细胞的CA1(Sasakietal.1992)。对神经系统的这些作用表明在治疗如毒物(JankowskyandPatterson2001)、帕金森氏病、脑缺血(Sasakietal.1992)以及大脑皮质损伤(Figueiredoetal.1995)等多种疾病时存在一定的潜力(Dateetal.1990;Alexietal.,2000)。事实表明,上述疾病的动物模型试验显示haFGF有良好的治疗效果。在跨越血

6、脑屏障(BBB)的治疗性蛋白质交付限制其规模和生物化学特性。具有154个氨基酸的haFGF蛋白质,不能直接穿过血脑屏障从循环,但可以通过脑内注射入脑室(Lietal.1998;Mufsonetal.1999),渗透性开放的血脑屏障(Rapoport2000;Emerichetal.2001)或病毒载体(Federoffetal.1992).不过,脑内注射可能会损害大脑组织,引起感染。开放是选择性渗透,不可能允许进入大脑的其他物质进入。基因治疗有经验的低效配置和较低的长期蛋白的表达。因此,aFGF对中枢神经系统疾病的治疗在临床方面还受到严重的限制。近年来,新的战略已经发展为加

7、强血脑屏障的通透性(Schwarzeetal.1999;Bayley1999;Dietzetal.2006;Yinetal.2006)。一种方法是融合靶蛋白和穿膜肽细胞(CPPs),如Tat-PTD,控制触角基因的蛋白,单一的疱疹病毒-1VP22,卡波西氏的成纤维生长因子信号序列(Bayley1999;Dietzetal.2002)。Tat-PTD,来自艾滋病毒反式转录激活(TAT)获得的9或11个氨基酸片段,与各种蛋白质进行融合后运送到大脑(ElliottandO’Hare1997)。到目前为止,几个TAT融合蛋

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