在体小肠吸收实验

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1、专业：姓名：鎗实验报告I:;地点：课程名称：指导老师：成绩：实验名称：实验类型：同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、主要仪器设备（必填）四、操作方法和实验少骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析（必填）七、讨论、心得一、实验目的1、掌握大鼠在体肠管泵循环法研究吸收的试验方法。2、掌握药物肠管吸收的机理和计算吸收速度常数（ka）和吸收半衰期t1/2的方法。二、实验原理1、研究药物消化管吸收试验方法：体外试验法、在体试验法和体内试验法。2、消化管吸收药物主耍方式是被动扩散。这种形式的吸收不消耗能量，其透过速

2、度与膜W侧的浓度差成正比，可用下式表示.•-dQ/dt=DKS（C-Cb）/h（1）►-dQ/dt=PSC/h=k’C（2）dQ/dt:分了•型药物的透过述度D:药物在脱

3、Aj的扩散系数k:药物在膜/水溶液中的分散系数C:消化管内药物浓度Cb:血液屮的药物浓度h:膜的厚度式（2）说明药物透过速度属于表观一级速度过程：以消化液中药物量的变化率dx/dt表示透过速度，则：•dX/dt=KaX►lnX=lnXO-KatlnX对取样时叫t作阁，可得一S线，从S线的斜率可求得吸收速度常数ka,吸收半袞期t1/2为：tl/2=0.693/Ka小肠在吸收

4、过程中，不仅吸收药物，也吸收水分，导致供试液体积减少，故不能川直接测定药物浓度的方法计算剩余的药量。酚红不被小肠吸收，因此M供试液屮加入定:ft的酚红，在一定問隔时叫测定酚红的浓度，就可以计算出不同吋间供试液的体积，再根椐测定的药物浓度，就可以得出不同吋间小肠巾剩余的药量或被吸收的药量。三、实验仪器及试剂仪器：蠕动泵试剂：供试液（SD浓度：20ug/ml、酚红浓度：20ug/ml）、酚红液（酚红浓度：20ug/ml）、20%巧拉坦、生理盐水、0.1%NaNO2浓液、lmol/L盐酸、0.2mol/LNaOH、0.5%氨基磺酸铵（NH2SO3

5、NH4）溶液、0.1%萘乙二胺溶液Ui实验步骤1、循环试验的操作(1)恒温水浴调节：将水浴温度调节为37±0.5°C。(2)供试液的准备：fi取75-80ml供试液加入循环裝置的烧瓶中，置恒温水浴中预热至37±0.5°C。(3)生理盐水的准备：収生理盐水适景，预热至37°C备用。(4)蜡动聚流速的调ii':调W流速为5ml/min和2.5ml/mino(5)大鼠麻醉：取大鼠一只称重，按l.lg/kg体重腹腔注射乌拉坦(浓度为20%)麻醉，并固定于固定台上。(6)小肠两端插管；沿大鼠腹部中线打开腹腔(约3cm),在12桁肠上部和回肠下部各切一

6、小口，插入直径为0.3cm的玻璃管，并用线扎紧。(7)肠管洗涤：用注射器将37°C的牛理盐水缓缓注入肠管，洗去肠管内容物至净。(8)作成回路：将肠管两端的坡璃管按图所示与胶管连接，作成回路，幵动蠕动泵，其流速为5ml/min。(9)取样：以5ml/min流速循环lOmin/Ti,将流速调节为2.5ml/min时，立即自供试液烧瓶屮取样两份(1ml和0.5ml各一份)，分别作力SD和船红零吋间样品，另向烧瓶十补加船红液2ml,其后每隔15min亦按M法取样及补加酚红液，共取样9次，停止循环。2、SD的测定取样品lml置10ml带塞试管中+加入

7、lmol/LHCI5ml,摇匀，+加0.1%NaNO2lml,摇匀，放置3min+in0.5%NH2SO3NH4lml,摇匀，放置3min+再加0.1%萘乙二胺2ml,摇匀,放置20min。在550nm的波长处测定吸收度。比色空白液:取酚红液lml代替样品，其余操作与样品处理一致。3、酚红的测定取样品0.5ml置10ml带塞试管屮，加0.2mol/LNaOH5ml,摇匀，在555nm的波长处测定吸收度。比色空白液：0.2mol/LNaOH五、实验数据记录和处理1、标曲问归方程：SD:y=0.0210x-0.0332(R2=0.9981)酚红

8、：y=0.0153x+0.0082(R2=0.9973)2、SD和酚红样品浓度计算计算结果如下表：表I大鼠在体小肠吸收量的计兑取样时

9、Hj(h)SD酚红供试液体积ml剩余药景X(ug)lnXabs浓度ug/mlabs浓度ug/ml循环前20207515007.31300.38720.0100.32620.77172.221444.9927.2760.250.38019.6760.35422.60166.761343.5797.2030.50.36619.0100.35922.92866.071315.5557.1820.750.35418.

10、4380.35122.40567.871339.3597.20010.34417.9620.35522.66767.371325.7057.1901.250.33317.4380