导流杂交检测法在宫颈病变筛查中临床应用的研究

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1、导流杂交检测法在宫颈病变筛查中临床应用的研究南昌大学第一'附属医院汀.两南昌330006摘要：目的评价导流杂交法检测女性生殖道人乳头瘤病毒(HPV)分型在宫颈病变筛查中临床应用价值方法从2009年5月一2012年6月在南昌大学第一附属医院妇科行宫颈癌筛查细胞学异常的患者中根据病理诊断选取560例患者，按组织病理学分为炎症组、宫颈上皮内瘤变(CINI)组、CINII组、CINIII组、宫颈原位癌组、浸润癌组和湿疣组各80例，各组随机选40例分別予以导流杂交法和原位杂交法进行检测HPVDNA检测和分型。分析HPV感染状况、结果Hy

2、briMax检测出HPV阳性233例，阳性率为83.2%。原位杂交共检测出HPV阳性例数157例，阳性率为56.1%,两者差异具有统计学意义。结论HybriMax对CINII以上病变的只有较高敏感度和阴性预测值，且能对更多基因型确切分型，可以作为HPV检测和宫颈病变筛查方法推广应用。关键词：导流杂交；人乳头状病毒；宫颈癌筛查宫颈癌是危害我国女性生活和健康的最重要的肿瘤之一，99.8%的宫颈癌样品中司*以检测出人乳头瘤病毒(humanpapillomavims，HPV)的存布，高危型HPV持续性感染被认宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的主

3、要致病因素，所以HPV分型检测对判断疾病类型、随访、流行病学分析及基因疫苗的研制都有重要意义。导流杂交基因芯片技术(flow-throughhybridization),即凯普导流杂交HPVDNA检测法(简称HybriMax)是近年来HPV基因型分型检测热门方法。木研究通过应用HybriMax检测女性生殖道人乳头瘤病毒分型，以原位杂交法(insituhybridization,ISH)检测的结果为对照，探讨HybriMax在HPV检测中的临床应用价值，同时初步探讨宫颈病变中常见的HPV基因型及比例。一材料与方法1.1研究对象与

4、方法1.1.1一般资料选择2009年5月-2012年6月在我院门诊或住院部行宫颈液基细胞学检查异常的患者，年龄25-66岁，所冇患者均按知情志愿的原则,行阴道镜检查后取宫颈活检取得病理诊断，以病理学诊断为金标准，根据病理诊断选择560名患者。1.1.2分组560例患者根据病理诊断随机分组：宫颈慢性炎症(炎症组)80例、宫颈上皮内瘤变(CIN)I组80例、CINII组80例、CINIII组80例、宫颈原位癌组80例、宫颈浸润癌80例、尖锐湿疣组80例，每组的年龄差异无显著性。1.1.3方法各组随机等分，其中每组的40例用导流杂交

5、技术检测基因分型，另40例用原位杂交法检测，观察两种方法对HPV的敏感度、基因分型、检测吋间。1.3结果判定：导流杂交法根据膜条HPV分型分布图，判断阳性点为何种病毒类型分型，由专业的检验科医生判读；原位杂交法杂交阳性信号为棕褐色，定位于鱗状上皮细胞核，在一张切片中发现≥l个阳性细胞即为HPV感染，由病理科医生判读。1.4统计学方法：釆用SPSS17.0软件进行统计分析，采用卡方检验，P<0.05为差异有统计意义。二、结果采用导流杂交法共检出HPV233例，阳性率为83.2%。原位杂交共检测出阳性例数157例，阳性

6、率为56.1%,两者差异具冇显著统计学意义(x2=48.78,P=0.000<0.05)o以病理诊断≥CINlI为金标准，导流杂交法和原位杂交法对CINII以上病变(CINIICINIII、宫颈原位癌、浸润癌)的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值见表1三、讨论近20年来大量研究已经证实高危型HPV持续感染是CIN及浸润癌发病的必要条件。宫颈癌的发生发展是一个相对缓慢的过程，从HPV感染到宫颈癌要几年或10余年，这其中病变处于动态变化中，CIN发展为浸润癌总的风险率是15%［1］。在美国，宫颈癌筛查的主要0标就是

7、治疗CINII或CINIII,而不是宫颈癌，因为宫颈癌的死亡率高，而CIN容易治愈。美国最新子宫颈癌筛查指出30-65岁女性，每3-5年应进行1次高危型人乳头瘤病毒检测，临床研究证明HPV检测可以作为宫颈癌的早期诊断和宫颈病变治疗后的随访指标。HPV亚型分布存在地域性差异，我国地广人多，地区之间HPV亚型分布也奋差异性。张东红和林美珊［2］采用Meta分析法综合评价1999年1月-2008年9月在国内发表的有关HPV在宫颈组织中感染及型别分布的相关研究中，发现南、北方地区HPV分型存在差异，北方地区HPV感染率(55.67%)

8、高于南方地区(42.06%),两地区都以HPV16感染率最高，南方HPV58、18、33常见，北方58、52、33较常见。Chen等［3】通过对台湾地区10000名女性长达16年的跟踪研究发现：HPV16，52，58，18，31是最常见的导致宫颈癌的类型，细胞学正常HPV阳性