手工免疫检验项目标准操作程序

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1、月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_13页码：第-4-页，共4页检验科免疫SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：20180101SOP_13-6手工免疫检验项目标准操作程序一、目的：统一项目操作规程，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。二、适用范围：免疫学检验项目。三、操作人员：检验科授权工作人员。四、项目内容：抗链球菌溶血素“O”(ASO)类风湿因子(RF)梅毒（TP）抗链球菌溶血素“O”(ASO)【方法】快速胶乳法。【用途】血清中ASO的测定，用于链球菌感染的诊断。【原理】高滴度的病人血清被适量的溶血素中和了正常水平的抗体后还

2、有多余ASO，这些多余的抗体即与ASO胶乳试剂反应，出现清晰、均匀的凝集颗粒。ASO胶乳试剂系羚化聚苯乙烯胶乳与溶血素“O”共价交联的产物。【试剂】以1g／L叠氮钠防腐。1．溶血素“0”溶液2瓶：每瓶可测定100人次，用时摇匀。2．ASO胶乳试剂2瓶：每瓶可测定100人次，用时摇匀。3．阳性控制血清1瓶：已稀释灭活，可直接使用。4．阴性控制血清1瓶：已稀释灭活，可直接使用。【操作】1．血清标本用生理盐水1：15稀释(血清0．1ml+生理盐水1．4m1)。2．在反应板(和妊娠诊断胶乳试剂使用的相同)各格子上分别滴加稀释待检血清1滴(约50ml)以及阳性和阴性控制血清1滴

3、，再各滴加溶血素“0”溶液1滴，轻轻摇动1分钟，使其充分混匀，均匀分布于方格内。3．每格各滴加ASO胶乳试剂1滴，轻轻摇动3分钟(室温为18～20℃)，将反应板平放在实验桌上，有清晰凝集者为阳性，不出现清晰凝集者为阴性，阴性者的ASO≤250IU／ml。4．阳性者的1：15稀释血清，进一步稀释为1：30和1：60，再重复步骤2和3，出现凝集的血清稀释度和ASO滴度问的关系大致如下：稀释度ASOIU／mll：15400编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四时间：20180101时间：20180101时间：20180101月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_

4、SOP_13页码：第-4-页，共4页检验科免疫SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：201801011：308001：6016013【附注】1．ASO胶乳加入后，轻轻摇动到本说明指定的时间时应立即记录结果，超过规定时间后再出现的凝集不列为阳性。阳性控制血清应在本说明指定的时间内出现清晰凝集，但不能将阳性控制血清出现凝集的时间视为判断结果的时间界限。2．溶血、脂血、高胆红素血症、高胆固醇血症、类风湿因子阳性以及标本被细菌轻度污染都不会影响本试验的结果。3．胶乳试剂不可冰冻，放置在4℃冰箱保存有效期可达1年，用前应该摇匀。4．室温降低IO℃，在胶乳试剂加人后应延长反

5、应时间1分钟；室温升高10℃，应缩短反应时间1分钟。5．所用的滴管口径以及装胶乳试剂的塑料瓶的口径应同样大小，保证液滴大小一致。6．本试剂盒以丹麦Copenhagen斟立血清研究所的世界卫生组织标准品标定。国际权威机构德国Heidelberg大学等系统鉴定本试剂后的评价报告指出：“此试剂的质量相同于欧洲市场上同类产品质量，能半定量测定血清中的ASO”。对所有阳性血清应进行半定量测定，才能对临床医生的判断有更大的帮助。类风湿因子(RF)【方法】免疫胶乳凝集法。【原理】类风湿因子(RF)是一种抗“自身IgG”的抗体(亦称抗球蛋白抗休)。它具有与人变性免疫球货白结合的能力。

6、利用人IgG致敏的胶乳与病人血清反应，根据产生凝集与否，可以测定RF及其滴度。【特点】本试验具有操作简单，结果清晰，比曙红胶乳试验更准确、敏感的特点，根据RF的滴度可用于类风湿疾病的诊断。【试剂】1．胶乳试剂。2．阳性控制血清(可直接使用)。3．阴性控制血清(可直接使用)。【试验方法】血清用生理盐水作1：20稀释，加l滴稀释血清(约0．05m1)和l滴本胶乳试剂于玻璃板的小方格内，立即持续转摇均匀。在1～3分钟内出现均匀凝集颗粒着为阳性，无凝集者为阴性。操作程序如下图：编写者：张三三审核者：李四四批准者：李四四时间：20180101时间：20180101时间：2018

7、0101月亮县中医院项目文件编号：YCXZYYJYK_SOP_13页码：第-4-页，共4页检验科免疫SOP手册版本：第3版，第1次修订生效日期：20180101阳性阴性阳性阴性【注意事项】1、阳性控制血清是用来考核胶乳抗原质量的，在本说明指定时间内出现清晰的凝集，但不能将阳性控制血清出现凝集的时间视为判断结果的时间界限，也不能将阳性控制血清出现的凝集程度作为区分阳性和阴性的界限，不必每次测定都使用控制血清，有需要时使用。2、胶乳试剂不可冰冻，放置在4℃冰箱保存，有效期可达一年，用前应该摇匀，并预温到室温。3、本试验用的滴管口径和装胶乳试剂的塑料瓶的口