亚光液基细胞学制片机课件

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1、亚光市场部张天成LPT制片技术及发展前瞻性宫颈癌现状宫颈癌发病率在全球女性恶性肿瘤中排第二位，全世界每年约有45万名妇女罹患宫颈癌。在我国，每年新发病例约15万，约8万患者死于宫颈癌。宫颈癌是一种可防可治的癌症宫颈癌的发展是一个长期的过程，若能在病变早期进行筛查，就能阻止癌变的发生、发展。宫颈癌筛查的重点，是在无自觉症状时期，发现癌前病变，在非癌时期及早进行临床诊治，从而预防、阻止癌变的发生。TCT产品发展的过程巴氏涂片巴氏涂片指宫颈脱落细胞涂片，是指从子宫颈部取少量的细胞样品，放在载玻片上，然后在

2、显微镜下研究是否异常。等级划分：分5级自60多前问世以来，巴氏涂片使当时宫颈癌病发率在世界范围内下降了70%－90%。TCT产品发展的过程TCT-新柏氏（ThinPrep2000）于95年通过FDA认证，推出市场用于临床，1999年进入中国市场。在美国已逐步被替代。主要方法是将宫颈脱落细胞洗入放有细胞保存液的小瓶中，刮片毛刷在小瓶内搅拌数十钞钟，再通过高精密度过滤膜过滤后，将标本中的杂质分离，取滤后的上皮细胞制成直径为20mm薄层细胞于载玻片上，95%酒精固定，经巴氏染色、封片，由细胞学专家肉眼在显

3、微镜下阅片，按TBS法作出诊断报告。该设备一次处理一份标本。TCT产品发展的过程随后，美国生产商三路影像公司（TriPathImaging）正式推出——LCT-超柏（AutoCyte/PrepStain），即自动细胞学检测系统（autocytoprepcytologictest），又称液基细胞学检测系统（Liquid-basedcytologictest,LCT）。它于99年通过FDA认证，正式推出美国市场，2001年底在我国注册，进入中国市场。它的基本方法是将收集的细胞保存液，通过比重液离心后，经

4、自然沉淀法将标本中的黏液、血液和炎性细胞分离，收集余下的上皮细胞制成直径为13mm超薄层细胞于载玻片上。制片类型膜式离心沉降TCT液基超薄制片技术以美国新百氏机器为代表主要采用了物理震动和高速旋转技术首先将细胞和粘液打散分开；然后在附有膜8微米孔的膜面的膜筒中，加一负气压，将细胞吸附在膜面上，小于8微米的杂质和无用的液体从膜筒中排掉；再在膜筒的膜面压在经过处理的玻片上，并在膜筒中加一正气压，将细胞转移到玻片上，形成薄层细胞玻片。离心涂片法以赛涂、利普，为代表。由人工进行操作，进行离心分离，人工操作进

5、行细胞提取，人工操作进行离心制片，自然沉降法以美国LCT-超柏（AutoCyte/PrepStain）为代表。首先利用专门的设备将取材后的保存液经过抽拉破粹后，在注入到事先注入有一定容量的分层液的上面。手工将其放到离心机上进行2次离心分层；然后人工除上清，再一次放到离心机上形成细胞团，再由人工放在振荡器上混匀。最后放到制片染色机上进行自动制片和染色。总目标为了清晰的观察分析细胞的组织形态，必须在液基中将细胞大量提取，并将细胞薄层排列在组织玻片上，所谓细胞薄层制片，并经细胞染色后，供临床观测分析和诊断

6、。其中关键性技术主要是：A由于细胞与粘液等组织裹在一起，要得到比较清晰的细胞制片，就必须将细胞与其它不用的粘液等分离开来；并有效提取。B制成薄片：为了有效的在显微镜下对细胞结构、形态进行观测和分析，细胞薄层不能厚，否则极大影响观测效果。C自动化制片，最大限度排除人为干扰。超柏制片机制片方法1.核对保存液标签与申请单信息.2.确认无误后将保存液置于标本架上；取已打印的条形码，一式三份；一份粘贴在申请单上，一份粘贴在离心管上，第三份备用，将离心管置于标本架对应标本后面.3.将所有标本核对完毕，依次放到标

7、本架上。超柏制片机制片方法4.依次向离心管内加入梯度密度液；5.震荡标本小瓶，双手各握1只小瓶，在震荡器上震荡15~20s，并相应变换小瓶震荡的角度；6.取注射器置于标本架对应标本前面。超柏制片机制片方法7.用标本转移机将小瓶中的保存液转移缓缓加至离心管内梯度密度液的上层.制片方法8.将转移后的离心管从标本架上取下，依次放到离心盒内，待所有离心管置于离心盒内；9.将离心盒放到离心机内，配平，进行一次离心.制片方法10.将一次离心完的离心盒取出，利用真空泵用黄Tip头吸取离心管上层的液体，注意不要吸到

8、下层的液体11.将离心盒放到离心机，进行二次离心.12.离心结束后，用手将离心管内的液体轻轻倒掉，注意不要将底部收集到的上皮细胞倒出13.震荡器上震荡离心盒，使收集的上皮细胞充分分散为个体细胞，时间：15~20s14.将载玻片平铺于制片板上，玻片磨砂面朝上，光滑面朝下。将制片舱依次拧到制片板上，将第三份条形码依次贴到玻片磨砂面上。15.将薄片制片机中4根管束依次伸到相应的试剂瓶中.16.将震荡后的离心盒放到薄片制片机相应位置.制片方法17.开启电脑、薄片制片机、压力泵