液基薄层细胞学制片技术心得体会

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1、液基薄层细胞学制片技术心得体会　　液基细胞学检查技术已逐渐发展为一种宫颈疾病的普查与筛查手段，越来越受到国人的重视，液基细胞学检查基于制片原理的不同分为膜式法、离心法、自然沉降法、捕获法、离心+手工操作法等[1].无论那一种方法其最终的目的是制作出可诊断的细胞数量多、无重叠的薄层细胞学涂片，我院从2012年开始采用离心涂片法，收集制作妇科住院及门诊液基细胞学标本2652例，现将制片方法和一些体会介绍如下：　　1材料与方法　　1.1材料微电脑控制细胞离心涂片机（武汉汉谷医疗科技有限公司提供），液基细胞保存液，宫颈刷，一次性专用塑料吸管，载玻片夹等。　　1.2方法　　1.2

2、.1标本采集临床医师要严格按照操作程序进行标本的采集，要避免标本含有过多的黏液和血液。标本采集完后直接将宫颈刷头放入液基细胞保存液中，振摇几下，拧紧瓶盖，标注姓名、年龄等信息。若为大量体检标本，应在标本瓶上和申请单上分别编以序号，防止标本错乱，以利病理技术人员制片。　　1.2.2液基薄层细胞学片的制备打开瓶盖，用镊子夹住宫颈刷连接部分，轻轻在细胞保存液中涮洗几次，以便刷头部分的细胞全部进入保存液中，丢弃刷头，拧紧瓶盖，放入细胞离心涂片机中，以1300r/min的速度离心沉淀2min,取出，打开瓶盖,用一次性专用塑料吸管从底部吸取0.8ml左右沉淀物及液体，滴入载玻片夹的

3、微孔滤膜中，用吸管混合均匀，将载玻片夹放入细胞离心涂片机中，以1300r/min的速度离心2min,从机器中取出已涂片的载玻片夹，从载玻片夹中取出已涂片的载玻片，自然晾干，95%乙醇固定，OG/EA染色（即巴氏染色），常规中性树胶封片，镜检。　　1.2.3液基细胞学的诊断液基细胞学的诊断采用2004版TBS诊断标准。TBS（theBethesdasystem,TBS）诊断标准是1988年美国推出的宫颈细胞病理学诊断报告方式，1990年我国开始引进此报告方式，后经多次改良，主要内容包括：对标本质量的评估；对细胞改变的描述及细胞学诊断和建议。　　2结果　　标本经离心涂片机处

4、理后，形成一直径2cm的圆形细胞薄片，背景干净，细胞数量较多，细胞均匀平铺，很少重叠。经巴氏染色后，色彩艳丽，对比鲜明，细胞核呈紫蓝色、蓝色，核仁红色。底层、中层细胞胞浆蓝色至淡紫蓝色不等，表层细胞胞浆呈红色、粉红色。红细胞呈红色或橙红色。黏液呈淡蓝色。　　3讨论　　从传统的巴氏涂片技术到液基薄层细胞学技术，细胞学技术在宫颈细胞学检查领域取得了长足的发展，无论是在标本的收集、保存、制片、染色到诊断上都优于传统的巴氏涂片技术，制片的程序化、标准化使制片质量有了保证，明显提高了异常细胞的检出率，减少了假阴性率[2-4].目前液基薄层细胞学技术已广泛应用于妇科和非妇科领域的细

5、胞学检查。　　液基薄层细胞学制片技术大体可分为膜式和离心沉淀式二种。膜式一次可以处理一个标本，离心沉淀式一次可以处理多个标本。虽然这两种方法做出的涂片质量无明显优劣，但离心沉淀式可显著降低技术人员的工作量，提高工作效率。我科从2012年开始使用离心涂片机制作液基薄层细胞学涂片，用于日常细胞学工作和进行大范围的宫颈/阴道细胞学筛查。液基薄层细胞学制片技术虽然提高了标准化制片水平，克服了因涂片质量差、黏液、血液或炎症细胞过多、细胞过度重叠使异常细胞被遮盖以及大部分细胞被丢失等等的缺陷[6],但是在制片的多个环节仍然需要人工操作,任何环节的操作不当、疏忽或责任心不强均可能影响

6、制片质量。因此应注意以下几个方面：（1）获得高质量的标本是提高液基细胞学涂片阳性率的基础：临床送检的标本应将刷头在保存液中充分涮洗，以便获得较多可诊断的细胞数量，一般要求每张液基细胞涂片要有大约5000个保存完好、结构形态清晰的鳞状上皮细胞[7].（2）标本要及时处理固定：固定的目的在于尽可能的保持细胞原有形态结构，凝固、沉淀细胞内原有产物[8],尽管液基细胞保存液中含有一定量的固定液，但远未达到固定良好的效果，因此临床在采集完标本后应立即将宫颈刷头放入液基细胞保存液中，尽快送检，病理科收到标本后，尽快制作薄层细胞学涂片，自然晾干后，立即放入95%乙醇液中固定15min

7、.（3）处理前应先检查送检标本质量的好坏：造成液基细胞学标本不满意的常见原因为过多的血液和（或）黏液，白带过多等因素[9-11].液基细胞保存液中含有红细胞和黏液溶解剂，一般不用特殊处理。若送检标本含血液过多，可在细胞保存液中加入1ml冰醋酸（保存液与冰醋酸之比为9:1）振摇，离心沉淀即可[12,13].若送检标本含黏液过多，可采用酶消化处理，离心后涂片[14].（4）操作仪器时标本瓶和载玻片应拧紧挂牢：细胞保存液瓶和载玻片夹在离心沉淀、离心涂片前瓶盖要拧紧，悬挂要牢靠，要确保放入卡槽内，否则在高速离心时易将细胞保存液瓶和（或）载玻片夹甩