血小板计数标标准操作程序

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1、血小板计数标准标准操作程序1方法目视显微镜计数法。2原理将血液用适量的稀释液作一定量的稀释后，混匀注入计数池内计数，再算出每升血液中血小板数。3试剂3.1血小板稀释液：3.2储存条件：室温保存；3.3使用期限：1年。4实验器材显微镜、滴管、改良牛鲍氏计数池、A级移液管、吸耳球、玻璃试管、乳胶手套、移液器等。5标本要求5.1取混匀静脉血20ml，充入含血小板稀释液0.38ml的小试管内，混匀。在小试管外用记号笔标明编号。5.2采血后室温条件下，立即送检。6操作步骤6.1取6×70mm小试管1支，加入稀释液0.38ml，在小试管外标上明确标示。6.2取血20ml，擦去管尖外附着血液，置于血小板稀释

2、液内，立即充分混匀。6.3取上述混匀的血小板悬液1滴，注入计数池内，做2份，静置10-15分钟，使血小板下沉。6.4用高倍镜计数中央1个大方格（即400个小方格）内四角与中央五个中方格的血小板。6.5计数时，在两次重复计数误差≤25%或±20×109/L的前提下，取平均值，否则需重做，并查找原因。7计算血小板数=5个中方格总数×5×10×20×106/L=5个中方格总数×109/L如：高倍镜下计数四角与中央5个中方格的血小板数分别为30，33，35，25，28，则血小板数为（30+33+35+25+28）×109/L=151×109/L8改良牛鲍氏计数池校证每半年进行手工记数与仪器计数比对，随

3、机取两份不同浓度标本充入计数池，手工记数两次重复误差WBC≤10%或PLT≤25%。9参考范围（100—300）×109/L10临床意义10.1血小板减少见于：10.1.1血小板生成障碍：再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病等。10.1.2血小板破坏增多：原发性血小板减少性紫癜（ITP）、脾功能亢进。10.1.3血小板消耗过多：DIC。10.1.4家族性血小板减少：巨大血小板综合征（Bernard-Souleir综合征）等。10.2血小板增多见于：10.2.1骨髓增生综合征：慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症等。10.2.2急性反应：急性感染、急性失血、急性溶血等。10.2.3其他：脾切除术

4、后。11注意事项11.1血小板稀释液要清洁，配成后应过滤，以防止微粒和细菌污染。试管和吸管也应清洁、干净。11.2每周做一次稀释液空白计数，若发现混有杂质、微粒，在排除计数板、滴管污染的情况下，过滤稀释液，再检验，必要时需重新配制稀释液。11.3血液加入稀释液内要充分混匀，滴入计数池后一定要静置10~15分钟。室温高时注意保持计数池周围的湿度，以免水分蒸发而影响计数结果。11.4计数时光线要适中，不可太强，应注意有折光性的血小板和杂质、灰尘相区别。附在血细胞旁边的血小板也要注意，不要漏数。11.5如在位相显微镜或暗视野显微镜下计数，效果更佳，计数更准确。11.6PLT<60´109/L或PLT

5、>400´109/L。PLT<60×109/L，可能有血小板聚集、巨大血小板或血小板卫星现象的标本，需推血片瑞氏染色，镜下观察是否有血小板聚集、巨大血小板或血小板卫星现象，如有血小板聚集、巨大血小板或血小板卫星现象导致血小板计数假性降低，在报告中注明。PLT>400´109/L需推血片瑞氏染色，镜下观察是否有小红细胞等。11.7如遇危急值，应上报临床科室，并记录在危急值报告记录表。具体的危急值指标：PLT<30´109/L。11.8当血小板计数＜20×109/L，需增加观察视野重新计数，计数中央1个大方格内25个中方格的血小板。计算公式为：血小板数=25个中方格总数×109/L511.9估计血

6、小板数=瑞氏染色血片中每个视野（油镜）血小板数×2012结果的报告将血小板计数的结果手工输入计算机，在血常规报告单上以“血小板：（×××）×109/L”方式报告。13记录结果记录在《复检样品记录表上》。14参考文献14.1《全国临床检验操作规程》（第4版）