hplc---基线漂移的各种问题及解决的方法

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1、HPLC一基线漂移的各种问题及解决的方法原因解决方法1柱温波动。（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其•它光电类检测器。）1.1控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图2流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。）2.1使川HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使川屮使川氦气。3流通池被污染或有气体3.1用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸）4检测器山口阻塞。（高压造成流通池

2、窗口破裂，产生噪咅基线）4.1収出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。5流动相配比不当或流速变化5.1更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。6柱平衡慢，特别是流动相发生变化时6.1用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。7流动相污染、变质或由低品质溶剂配成7.1检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂8样品屮有强保留的物质（髙K'值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。8.1使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中

3、，定期用强溶剂冲洗柱子。9使用循环溶剂，但检测器未调整。9.1重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。10检测器没有设定在最大吸收波长处。lo.i将波长调整至最大吸收波处基线噪咅（规则的）原因解决方法1、在流动相、检测器或泵中有空气1、流动相脱气。冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。2、漏液。检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析岀和不正常的噪咅。如有必要，更换泵密封。3、流动相混合不完全。用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂4、温度影响（柱温过高，检测器未加热）4、减少差异或加上热交换器5、在同一条线上有

4、其他电子设备5、断开LC、检测器和记录仪，检查千扰是否来自于外部，加以更正。6、泵振动。在系统中加入脉冲阻尼器基线噪音（不规则的）原因解决方法1、漏液图1、见第三部分。检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪咅。如有必要，更换密封。检査流通池是否漏液。2、流动相污染、变质或由低质溶剂配成2、检查流动相的组成。3、流动相各溶剂不相溶3、选择互溶的流动相4、检测器/记录仪电子元件的问题4、断开检测器和记录仪的电源，检查并更正。5、系统内有气泡5、用强极性溶液淸洗系统6、检测器内有气泡6、清洗检测器，在检测器后而安装背景压

5、力调节器7、流通池污染（即使是极少的污染物也会产生噪音。）7、用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池8、检测器灯能量不足8、更换灯9、色谱柱填料流失或阯塞9、更换色谱柱10、流动相混合不均匀或混合器工作不正常10、维修或更换混合器，在流动相不走梯度时，建议不使用泵的混合装置0、宽峰原因解决方法1、流动相组成变化1、重新制备新的流动相2、流动相流速太低2、调节流速3、漏液（特别是在柱子和检测器之间）3、见section3。检查接头是否松动、泵是否漏液、是否有盐析出以及不正常的噪咅。如果必要更换密封。4、检测器设定不正确4、调整设定5、

6、柱外效应影响a、柱子过载图b、检测器对反应时间或池体积响应过大c、柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大d、记录仪响应时间太长5、a、小体积进样（例如：10ul而不是100ul）以1:10或1:100的比例稀释样品b、减少响应时间或使用更小的流通池c、使用内径为0.007-0.01的短管路d、减少响应时间6、缓冲液浓度太低增加浓度7、保护柱污染或失效更换保护柱8、色谱柱污染或失效，塔板数较低更换同样类型的色谱柱。如果新柱子可以提供对称的色谱峰，则用强溶剂冲洗旧柱子。9、柱入口塌陷打开柱入口，填补塌陷或更换柱子10、呈现两个或多个

7、未被完全分离的物质的峰选择其它类型的色谱柱以改善分离效果11、柱温过低提高柱温。除非特殊情况，温度不宜超过75°C12、检测器时间常数太大使用较小的吋间常数13、分离度降低(1)流动相污染或变质(引起保留时间变化)重新配置流动相(2)保护柱或分析柱阻塞图去掉保护柱进行分析。如果必要则更换保护柱。如果分析柱阻塞，可进行反冲。如果闷题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏，建议使川恰当的再生程序。如果W题仍然存在，进口可能阻塞了，更换入口处的筛板或更换色谱柱。14、所有的峰而积都太小(1)检测器衰减设定过高减少衰减的设定(2)检测器吋

8、间常数设定太大设定较小的时间常数(3)进样量太少增大进样量(4)记录仪连接不当使用正确的连接15、所有的峰面积都太大(1)检测器袞减设定过低采取较大的衰减(2)进样过多减少进样量(3)记录仪连接不正确正确连接记录仪16、HPLCH常维护办法之四：进