糖类脂肪蛋白质的检测

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1、实验原理淀粉还原糖(如:葡萄糖、果糖、麦芽糖)蛋白质脂肪斐林试剂苏丹Ⅲ染液碘液双缩脲试剂橘黄色紫色蓝色水浴加热试剂待检有机物颜色变化+++++砖红色沉淀苏丹Ⅳ染液红色一、还原糖的鉴定可溶性还原糖+斐林试剂砖红色沉淀水浴加热葡萄糖、果糖、麦芽糖是。蔗糖不是在水浴加热的条件下,还原糖和斐林试剂反应,生成砖红色沉淀。A:实验原理:B:实验步驟:选材:含糖量高,颜色为白色或近于白色。制备样液:苹果块----研磨-------过滤水浴加热苹果汁注意:斐林试剂不稳定,一般配成甲乙液,现配现用,用时将甲乙两液等量混合后再加入样液中斐林试剂:甲液0.1g/

2、ml的NaOH溶液;乙液0.05g/ml的CuSO4溶液苹果汁斐林试剂颜色变化:浅蓝色--棕色--砖红色设置对照组1.怎样配制斐林试剂?用浓度为0.1g/mlNaOH(甲液)与等量的0.05g/mlCuSO4(乙液)混合均匀而成。NaOH+CuSO4Cu(OH)2蓝色沉淀+……Cu(OH)2+还原糖Cu2O砖红色沉淀+……问题思考2.为什么斐林试剂可检验还原糖的存在?斐林试剂的本质是Cu(OH)2的悬浊液,还原糖把Cu(OH)2还原成Cu2O沉淀。3.为什么要用新配制的试剂?因为斐林试剂稳定性较差,要现用现配,混合使用。二、脂肪的鉴定A:实验原理

3、:脂肪+苏丹III染液橘黄色脂肪+苏丹IV染液红色B:实验步驟选材:花生种子最好,浸泡.制备样品:花生去皮------切薄片.鉴定:花生切片d显微镜观察c制片b50%酒精漂洗a苏丹III染色实验现象:脂肪+苏丹III染液橘黄色脂肪+苏丹IV染液红色显微镜三、蛋白质的鉴定A:实验原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色反应B:实验步驟:选择:大豆豆浆或鸡蛋蛋白(稀释),鲜肝提取液.制备样液:大豆----研磨------过滤鉴定步驟:豆浆b再加双缩脲试剂B液a先加双缩脲试剂A液0.1g/ml的NaOH溶液,先为实验制造碱性环境.0.01g/ml的Cu

4、SO4溶液蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应①B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。②鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免实验后粘住试管壁,不易洗刷注意事项:斐林试剂与双缩脲试剂比较原理不同:斐林试剂的实质是新配制的Cu(OH)2溶液;双缩脲试剂实质是碱性环境中的Cu2+。四、淀粉的检测与观察淀粉遇碘变蓝做还原糖的鉴定实验,应该选择含糖量较高且糖具有还原性(如葡萄糖、麦芽糖、果糖)、颜色为白色或近于白色的植物组织,以苹果、梨为最好。做脂肪的鉴定实验,应该选

5、择富含脂肪的种子,以花生种子为最好。做蛋白质的鉴定实验,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆种子,动物材料常用的是鸡蛋蛋白。至于甘蔗茎的薄壁组织和甜菜的块根虽然富含近于白色的蔗糖,但蔗糖无还原性,不能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。

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