糖类、蛋白质、脂肪的鉴定

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1、实验生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定思考题：1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理2、常见的还原糖有哪些？取材的要求3、斐林试剂的组成，使用时的注意事项4、双缩脲试剂的组成，使用时注意事项5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何1.实验原理：化学试剂+有机化合物→特定的颜色(1)还原糖+斐林试剂水浴加热砖红色沉淀(2)脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色2、常见的还原糖有哪些？

2、取材的要求还原糖：可被氧化充当还原剂的糖。(常见的有：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖)注意：蔗糖不是还原糖3、斐林试剂的组成，使用时注意事项斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：等量混合，现配现用（NaOH+CuSO4）1.点拨：还原糖+斐林试剂砖红色沉淀可溶性还原糖与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。（放在盛有50-65℃温水的大烧杯）水浴加热颜色变化：浅蓝色棕色砖红色1步骤：样液制备:（取材5g，加入石英砂和5ml水）(1)

3、取样液2ml于试管中(2)加入新配制的斐林试剂1ml（甲液和乙液等量混合均匀后再加入）盛有50-65℃温水的大烧杯）(3)水浴加热2min左右(（4）观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）注意事项：（1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果》梨》白萝卜。思考：西瓜、甘蔗、甜菜可以吗？为什么？（2）试剂：斐林试剂(等量混合、现配现用)甲液：0.1g/mL的NaOH溶液乙液：0.05g/ml的CuSO4溶液4、双缩脲试剂组成，使用时注意事项双缩脲试剂组成：A液：0.1g/mL的NaOH溶液B液：

4、0.01g/mL的CuSO4溶液使用注意事项：先加A液1mL于样液中，再加B液4滴于样液中（1）蛋白质+双缩脲试剂→紫色2步骤：（1）试管中加样液2mL（2）加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环境），摇匀（3）加双缩脲试剂B液4滴，摇匀（4）观察颜色变化（紫色）注：①样液浓度不宜过高，以免实验后黏住试管壁，洗不干净。②B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分鉴定物质添加顺序方法反应条件反应现象5.比较斐林试剂和双缩脲试剂0.1g/mLNaOH同

5、甲液0.01g/mLCuSO40.05g/mLCuSO4还原性糖蛋白质等量混合后再加入先加A液1mL，摇匀，再加B液4滴50-65℃水浴加热砖红色沉淀紫色络合物不需加热，摇匀6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色？借助什么来观察？3.脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色（2）步骤材料的选取：含脂肪量高的组织，如花生的子叶。①取材：取一粒浸泡过的花生种子，去掉种皮②切片③制片：（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央④染色：滴2～3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min，用吸水纸吸去染

6、液，再滴体积分数50%的酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去多余的酒精（苏丹Ⅲ易溶于酒精中，避免影响实验结果），滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片⑤镜检观察：光学显微镜对光→低倍镜寻找着色圆形小颗粒→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒8、如何鉴定淀粉，颜色反应如何用试管取2mL待测组织样液，向试管内滴加1～2滴碘液，观察颜色变化。4、淀粉+碘→蓝色加1~2滴碘液1.鉴定生物组织中可溶性还原糖的试剂A．斐林试剂B．双缩脲试剂C．苏丹Ⅲ染液D．苏丹Ⅳ染液2.能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是A．淀粉B．果糖C．蔗

7、糖D．纤维素3.下列哪个实验用到显微镜（）A可溶性还原糖的鉴定B．蛋白质的鉴定C．脂肪的鉴定D．淀粉的鉴定ACB4.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化过程为（）A．无色一砖红色（沉淀）B．浅蓝色一砖红色（沉淀）C．浅蓝色一蓝色一砖红色（沉淀）D．浅蓝色一棕色一砖红色（沉淀）5.下列物质中，能被苏丹IV染液染成红色的是（）A马铃薯块茎B．浸软的蓖麻种子C．蛋清液D．苹果DB6.还原糖的实验中，加入斐林试剂时必须要A．先加入斐林试剂甲液，后加入乙液B．先加入斐林试剂乙液，后加入甲液C．将斐林试剂

8、的甲液和乙液混合均匀后再加D．以上A、B、C三种操作方法都正确7.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂正确做法是A．先加A液，混合后再加B液摇匀观察B．先加B液，混合后再加A液摇匀观察C．A、B液混合后加入，摇匀后观察D．A、B液同时加入样液，摇匀后观察CA即：还原糖中的醛基（–CHO）被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原成砖红色的Cu2O沉淀还原糖的鉴定原理：还原糖+斐林试剂——砖红色沉淀斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分鉴定物质添加顺序方法反应条件