大肠癌组织rhoe、p53的表达及临床意义

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1、大肠癌组织RhoE、p53的表达及临床意义【】目的探讨凋亡抑制蛋白RhoE、p53蛋白在大肠癌组织中的表达与不同临床病理特征的关系，以及二者在大肠癌发生过程中的相关性。方法采用免疫组织化学法检测48例大肠癌组织和30例正常肠组织中RhoE、p53蛋白的表达。结果肠癌组织中RhoE、p53蛋白阳性表达率分别为14.58%和62.5%，较正常组织差异非常显著(P＜0.01)；RhoE蛋白表达与Dukes分期明显相关(P＜0.01)及淋巴结转移相关(P＜0.05)；肠癌组织中p53与RhoE蛋白表达显著负相关(

2、P＜0.01)。结论RhoE在大肠癌组织中表达下调，并与大肠癌的Dukes分期密切相关，有可能作为判断病情和评价预后的新指标；RhoE蛋白的表达与p53蛋白的表达呈负相关，提示RhoE与p53蛋白可能存在相关信号通路，有望为大肠癌基因治疗提供新的靶点。【关键词】大肠癌;RhoE;p53;免疫组织化学Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionofRhoEandp53incolorectalcarcinomatissueandtherelationshipmuno

3、histochemicalassayin48colorectalcarcinomasamples,30normalcolorectaltissues.ResultsExpressionofRhoEandp53proteinincolorectalcarcinomatissuephnodemetastases(P＜0.05).TheexpressionofRhoEcorelatedasuggestedthatRhoEmayplayaroleinthepathightbeusedtoevaluateprogn

4、osis．Thecloserelationshipbetightbeidentifiedasapotentialtherapeutictargetincolorectalcarcinoma.Keya;RhoE;p53;immunohistochemistry大肠癌(colorectalcarcinoma，CC)是一种常见的消化道恶性肿瘤，各种癌基因突变激活及抑癌基因失活在大肠癌发生发展中起重要作用。目前，大量研究显示RhoE很可能是一种新的抑癌基因，但RhoE在大肠癌组织中的表达及与大肠癌患者临床病理相关

5、因素的关系未见报道。本研究观测了RhoE在大肠癌组织中的表达，并分析其在大肠癌的发生、发展及转移中的作用。1材料与方法1.1材料随机抽取重庆市肿瘤医院存档的1996年到2006年期间手术切除和病理证实的大肠癌标本48例，其中乳头状腺癌18例，管状腺癌22例，粘液腺癌8例；高分化腺癌26例，中分化腺癌16例，低分化腺癌6例；有淋巴结转移30例，无淋巴结转移18例。Dukes分期：A期和B期共32例，C期与D期共16例，术前均未接受化疗和放疗。另选正常大肠组织30例作为对照。1.2试剂　　鼠抗人RhoE多克隆

6、抗体为中科院武汉分院惠赠，鼠抗人p53单克隆抗体、超敏SP试剂盒和DAB显色试剂盒购于北京中杉生物技术有限公司。1.3方法　　蜡块切片（厚4μm）后，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)染色法检测RhoE、p53蛋白的表达。用PBS代替一抗作阴性对照，以已知阳性片作阳性对照。三种蛋白均采用37℃孵育1h，再放入4℃冰箱过夜，DAB显色，苏木素复染。1.4结果判断　　RhoE阳性反应为淡黄至棕黄色颗粒，位于胞浆，p53蛋白阳性反应为棕黄至棕褐色颗粒，位于胞核。在此基础上，参照文献［12］评分方法，

7、首先将染色强度评为1～4分，再按阳性细胞所占的百分比评为0～4分。染色强度与阳性细胞的分值相加，大于等于3分为阳性(+)，每张切片选择有代表性的区域，在400倍视野下计数，共计5个视野，取平均值。1.5统计学方法　　所得数据用阳性率(％)表示，采用SPSS11.5软件进行卡方检验和Pearson相关分析。P＜0.05为统计学相差显著。2结果2.1肠癌和正常肠组织中RhoE、p53蛋白的表达阳性染色呈棕黄色，RhoE在肿瘤细胞的胞浆中表达，较弥散（图1）；p53则在肿瘤细胞的胞核中表达（图2）。　RhoE蛋

8、白在肠癌组织中的表达率14.58%(7/48)，在正常肠组织的表达率为60％（18/30），前者显著低于后者；p53蛋白在肠癌组织中的表达率达62.5%（30/48）。2.2RhoE、p53表达与肠癌临床病理分期的关系在实验中，RhoE表达与Dukes分期显著相关(P＜0.01)，且与淋巴结转移相关(P＜0.05)；而p53则与Dukes分期、淋巴转移无相关性（P＞0.05），见表1。2.3肠癌中RhoE表达与p53表达的相关