高中生物 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

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1、第一章细胞的分子组成第三节有机化合物及生物大分子实验1：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。水浴加热①还原糖+斐林试剂砖红色沉淀②脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）③蛋白质+双缩脲试剂→紫色④淀粉+碘→蓝色化学试剂+有机化合物→特定的颜色一、可溶性还原糖的检测：水浴加热（1）原理：还原糖+斐林试剂砖红色沉淀。（2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为白色或近于白色的植物组织。（3）检测过程：刚配制的斐林试剂2mL50～65℃水浴2mL加热2min

2、组织振荡混匀样液呈现浅蓝色变成砖红色（CuO）2还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2悬浊液。Cu（OH）2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。制备组织样液砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃洗净、去

3、皮、切块梨或苹果研磨过滤滤液取5g，放入研钵中（用单层纱布）显色反应向试管中加入向试管中加入2ml振荡混匀50～65℃水2ml组织样液新配制的斐林试剂浴加热2min或本尼迪特试剂观察现象观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。5065℃水浴加热2ml组织样液1ml新配制的斐林试剂约2min观察颜色变化浅蓝色棕色砖红色【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH）2沉淀在溶液底部无法发生反应。且需

4、要水浴加热。还原糖的检测结果斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。-CHO+Cu(OH)2悬浊液-COOH+Cu2O↓（砖红色）二、脂肪的检测（1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。（2）检测过程：苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪）切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min制片洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片视野中有橘黄镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的色颗粒圆形小颗粒，

5、然后用高倍镜观察。橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液橘黄色（或红色）注意事项：（1）若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形，切片要尽可能的薄。（2）染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色（酒精能溶解苏丹Ⅲ），染色和洗浮色时间不宜过长。三、蛋白质的检测：双（双缩脲）子（紫色）弹（蛋白质）（1）原理：蛋白质+双缩脲试剂紫色络合物（2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆（3）检测过程：3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀2ml组织样液2ml双缩脲试剂A液，摇匀观察颜色变化紫色双缩脲≠双

6、缩脲试剂将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反应式为:双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）在碱性环境（NaOH）中能和Cu2+作用生成紫色的络化物，这个反应叫做双缩脲反应。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似，因此，蛋白质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。2mL双缩脲试双缩脲试组织剂A2mL剂B3-4滴样液（创造碱性条件）（提供Cu2+）无色紫色制备组织样液黄豆组织样液（或鸡蛋清稀释液）浸泡黄豆研磨过滤滤液去皮、切片稀释鸡蛋蛋清液鸡蛋清稀释液显色反应向试管中注入向试管中注入加入3-4滴双缩2ml组织样液2ml双缩脲试剂A脲试剂B观察现象观察颜色变化：无→紫

7、色结论：加入双缩脲试剂A后，颜色呈现为无色，加入B后，变为紫色，说明鸡蛋清中有蛋白质存在。蛋白质的检测结果注意事项：（1）如果用鸡蛋清作为材料，则必须进行充分稀释，否则反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗刷干净。（2）【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mLNaOH，B液：0.01g/mLCuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。（3）过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。（4）先加入A液2ml，摇匀；再加入B液3-4滴，摇匀。四、淀粉的检测：蓝（蓝色）点