高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质

《高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第一章细胞的分子组成第三节有机化合物及生物大分子实验1：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。水浴加热①还原糖+斐林试剂砖红色沉淀②脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色）③蛋白质+双缩脲试剂→紫色④淀粉+碘→蓝色化学试剂+有机化合物→特定的颜色斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液0.1g/mL0.05g/mL0.1g/mL0.01g/mL成分NaOH溶液CuSO4

2、溶液NaOH溶液CuSO4溶液鉴定可溶性还原糖蛋白质或多肽物质先加入A液1mL，摇匀，添加甲乙两液等量混匀后立即再加入B液4滴（不能过顺序使用（现配现用）量），摇匀反应50～65℃水浴加热不需加热，摇匀即可条件反应样液变砖红色沉淀样液变紫色现象斐林试剂用的是甲液和乙液，须现配现用，混合均匀，水浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液，先加A液，后滴B液，不用水浴加热。比较项目斐林试剂双缩脲试剂甲液和乙液混合均匀后方可使用方法使用时先加A液再加B液使用，且现配现用反应条件需50-65℃水浴加热不需加热即可反应不

3、还原糖中的醛基被Cu（OH）具有两个以上肽键的化合物同反应原理2悬浊液氧化,Cu（OH）2被在碱性条件下与Cu2+反应生点还原为砖红色Cu2O沉淀成紫色络合物颜色砖红色紫色浓度乙液CuSO4浓度为0.05g/mLB液CuSO4浓度为0.01g/mL相同点都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度都是0.1g/mL双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物与碱性硫酸铜作用，生成蓝紫色的复合物斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如下三点不同：①溶液浓度不同。斐林试剂中NaO

4、H的浓度为0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.05g/mL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL，CuSO4的浓度为0.01g/mL。②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2＋。③使用方法不同。使用斐林试剂时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，然后立即使用。使用双缩脲试剂时，先加入NaOH溶液，然后再加入CuSO4溶液。一、可溶性还原糖的检测：水浴加热（1）原理：还原糖+斐林试剂砖红色沉淀。（2）选材：苹果、梨、白萝卜。含糖量较高，颜色为

5、白色或近于白色的植物组织。（3）检测过程：刚配制的斐林试剂2mL50～65℃水浴2mL加热2min组织振荡混匀样液呈现浅蓝色变成砖红色（CuO）2还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2悬浊液。Cu（OH）2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。R—CHO+2

6、Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O甲液乙液等量混合，现用现配，切不可分开滴加，或者久置后才用。制备组织样液砖红色的糖（还原糖）非（斐林试剂）常好吃洗净、去皮、切块梨或苹果研磨过滤滤液取5g，放入研钵中（用单层纱布）显色反应向试管中加入向试管中加入2ml振荡混匀50～65℃水2ml组织样液新配制的斐林试剂浴加热2min或本尼迪特试剂观察现象观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色结论：生成砖红色沉淀，说明梨或苹果中含有还原糖。5065℃水浴加热2ml组织样液1ml新配制的斐林试剂约2min

7、观察颜色变化浅蓝色棕色砖红色【斐林试剂】：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液，使用前等体积混合均匀（生成浅蓝色的Cu（OH）2悬浊液），现配现用（时间一长，Cu（OH）2沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。还原糖的检测结果斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。-CHO+Cu(OH)2悬浊液-COOH+Cu2O↓（砖红色）二、脂肪的检测（1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。（2）检测过程：苏三（苏丹Ⅲ）送了我一个橘黄色的胭脂（脂肪）

8、切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央染色：在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液，染色23min制片洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精12滴制成临时装片：滴12滴蒸馏水，盖上盖玻片视野中有橘黄镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的色颗粒圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液橘黄色（或红色）注意事项：（1）若用花生种子作实验材料，必