浅论白色念珠菌细胞壁β

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1、浅论白色念珠菌细胞壁β【目的探究白色念珠菌（CandidaAlbicans）细胞壁不同溶解性的β-葡聚糖（β-glucan）对环磷酰胺（cyclophosphamide，endoxan，cytoxan，CTX）所致小鼠外周血白细胞减少的回升功能。方法采用CTX所致的小鼠外周血白细胞减少模型，探究白色念珠菌细胞壁β-葡聚糖对小鼠外周血白细胞数的影响。结果三种溶解性的白色念珠菌细胞壁β-葡聚糖均能升高小鼠外周血白细胞、中性粒细胞和单核细胞数。各组小鼠脾脏指数增加，脾脏、骨髓巨核细胞系增生。不溶性的β-葡聚糖功能更明显。结论白色念珠菌β-葡聚糖尤其是不溶性β-葡聚糖对CTX

2、所致的白细胞减少有回升功能，是一种很有前途的免疫调节剂。【白色念珠菌；β-葡聚糖；生物学活性；提取分析；免疫药理功能【AbstractObjectiveTostudythepharmacologicaleffectofthebasicβ-glucan，acidicβ-glucanandinsolubleβ-glucanextractsofCandidaalbicansontheleukocytopoiesis-promotingintheleukopeniamice.MethodsMiceofeachgroupexcepttheuntreatedcontrolgrou

3、pinisteredcyclophosphamideintraperitoneally［100mg/(kg·d)forthreedays］todevelopleucopenia.TheexperimentalgroupinisteredthreekindsofCandidaalbicansβ-glucanintravenouslyforsixdaysseparately.Theperipherialleukocytesofallmicebersofleukocytes，neutrophilicgranulocytesandmonocytesintheperiphera

4、lblood.Thespleenindexineachgroupanimalareincreased，andmegakaryocytesareincreasedinspleenandmarromunomodulatorbersofleukocytesintheperipheralblood.【Keymunomodulatorβ-葡聚糖（β-glucan）是白色念珠菌细胞壁中含量最高的多糖。作为一类条件致病真菌多糖，白色念珠菌β-葡聚糖有着多种生物学活性和免疫药理学功能，在抗炎、抗肿瘤、刺激造血等方面都有很高的药效学功能［1］，但有关不同性质的白色念珠菌β-葡聚糖升白细

5、胞功能的探究甚少。本探究制备三种溶解性的β-葡聚糖，观察其对环磷酰胺（cyclophosphamide，endoxan，cytoxan，CTX）所致的小鼠外周血白细胞减少的回升功能，为进一步确证白色念珠菌β-葡聚糖刺激造血系统使白细胞升高的功能机制，和进一步探究白色念珠菌β-葡聚糖有效成分或有效因子，为确立药物质量控制标准和量－效关系提供理论依据。1材料和方法1.1动物和试剂昆明种小白鼠，4～6周龄，体重20±2g，昆明医学院动物科（云南省实验质量合格证0000481号）。沙氏液体培养基（Sabouraud’sdextroseagar）：蛋白胨10g、葡萄糖40g、溶

6、于1000ml蒸馏水，高压灭菌后备用；α淀粉酶：分子量～9600，酶活力：50μ/mg（上海伯奥生物科技有限公司）；白色念珠菌碱溶性β-葡聚糖（Candidaalbicansbasicβ-glucan，CABBG）、酸溶性β-葡聚糖（Candidaalbicansacidicβ-glucan，CAABG)和不溶性β-葡聚糖（Candidaalbicansinsolubleβ-glucan，CAIBG）：均按文献方法制备［2］。1.2仪器LRH-250Z型震荡培养箱（广东医疗器械厂）；81-2型恒温磁力搅拌器（上海司乐仪器厂）。1.3白念珠菌的培养和三种白色念珠菌β-葡

7、聚糖的制备取少量保存于密封无菌容器中的纯白色念珠菌菌落，接种于沙氏液体培养基，接种后37℃恒温摇床160次/min震荡培养6～7天，3000rpm离心30min，收集菌体，冷冻保存。提取β葡聚糖的流程，见图1。1.4小鼠白细胞减少模型的建立除空缺对照组外，各组小鼠腹腔注射CTX100mg/(kg·d)，连续3天，建立小鼠外周血白细胞减少模型。1.5确定三组β-葡聚糖的给药剂量参照急性毒性实验摸索LD50值，各组给药剂量最后如表1。1.6统计学处理急性毒性学实验结果采用Bliss法计算LD50值。药效学实验采用SPSS11.5统计软件进行数据处理分析，