细胞分选技术

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1、StemCellTechnologiesInc.细胞分选产品细胞分选和基本原理细胞分选是把一种细胞从多细胞样品中分离出来用抗体标记细胞，同时被用的抗体被萤光标记或连接免疫磁珠或其它利用萤光和免疫磁珠的特性来分离细胞细胞分选常用方法密度梯度离心(Ficoll)离心抗体标记分离免疫密度离心免疫磁珠流式正选和负选正选需要得细胞标记需要得细胞需要得细胞标记不需要得细胞负选正选只需要一种抗体分离出的细胞纯度高对于比例小的细胞群，正选容易得到高纯度正选和负选的比较优点负选需要的细胞没有被抗体等标记对需要的细胞，不需要特异性的细胞标记缺点需要多种抗体标记不需要的细胞需要特异性的靶细胞标

2、记可能引起细胞活化细胞分选产品StemCellTechnologiesInc.的细胞分选原理利用抗体四聚体(TetramericAntibodyComplex,TAC)来分选细胞TACCell磁珠直接标记TACCell磁珠间接标记适用于人的全血细胞样品是一种负选方法基本原理：抗体标记和免疫密度离心法需要的仪器：离心机DirectLabelingofHumanCells不需要的细胞离心把细胞样品置于密度分离液上分选的过程标记把RosetteSep™抗体混合液加入细胞样品中室温下20分钟用缓冲液稀释收集的密度分离液DM-L为了最大限度回收淋巴细胞，StemCell专门研制了一

3、种适合RosetteSep™的密度分离液——DM-LDM-L的密度：1.081g/mLDM-L的渗透压与人外周血的渗透压相同(iso-osmolar)适用于以下的淋巴细胞分选:CD3+Tcells-CD8+TcellsCD4+Tcells-BcellsDensityofFreshLeukocytesFrom:“CentrifugationTechniquesIII”,NycomedAmershamMonocytesLymphocytesBasophilsNeutrophilsEosinophilsErythrocytes1.0601.0701.0801.0901.100D

4、ensitying/mLDM-L:1.081g/mLFicoll:1.077g/mL低温冷藏的外周血单个核细胞人和小鼠脾细胞负选,只需要离心机可以同时分选多份样品取决于离心机的容量分选的细胞量在106cellsinEppendorf-109cellsin50mLtube适用于低温冷藏的人外周血单个核细胞(PBMC)和小鼠脾细胞的特点Sep直接标记人的细胞Anti-cellAnti-particleTetramericAntibodyComplex(TAC)DenseParticle(1mm)UnwantedCell间接标记小鼠的细胞TetramericAntibodyCo

5、mplex(TAC)BiotinylatedAntibodyAnti-Anti-BiotinParticleDenseParticle(1mm)UnwantedCellSpinSep的分选过程LabelLayer&SpinCollectAntibodyCocktailAnti-BiotinTAC(mouseonly)DenseParticles4.LayeroverSpinSep®DensityMediumSpin10-20minat1200xgCollectalmostentirevolume7.WashtoremoveDensityMedium的细胞分选资料人的外周血

6、细胞(PBMC)小鼠的脾细胞Valuesarethemean±SD新型，高效，易行的免疫磁珠分选技术新：不用柱子，只需用磁极，所用的磁珠很小高效：效率-分选过程不用洗细胞(省时省力);效果-分选的细胞纯度高易：操作过程简单易行广：可做正选和负选适应性强：在理论上可以分选任何一种细胞Anti-Anti-CellParticleTetramericAntibodyComplex(TAC)MagneticNanoparticle(160nm)直接标记人的细胞CellMagneticNanoparticle(160nm)TetramericAntibodyComplex(TAC)

7、Biotin/FluoAntibodyAnti-Anti-biotin/FluoParticle间接标记小鼠细胞CellRelativeSizesofMagneticParticlesusedinCellSeparationCell的细胞分选过程Ab(TAC)(人)Abbiotinanti-biotinTAC(小鼠)标记放置磁极中倒出未标记的细胞分选结合磁珠加入免疫磁珠孵育后稀释正选资料人的外周血细胞(PBMC)小鼠脾或骨髓细胞负选资料人的外周血细胞(PBMC)小鼠脾细胞可正选或去除任何一种细胞PE标记的抗体分选KitFITC