塞来昔布对小鼠膀胱肿瘤的抑制作用

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1、塞来昔布对小鼠膀胱肿瘤的抑制作用【】目的探讨选择性环氧化酶2抑制剂塞来昔布对膀胱肿瘤的抑制作用及其机制。方法建立小鼠膀胱肿瘤模型并随机分为对照组、实验1组和实验2组，分别给予生理盐水和不同剂量的塞来昔布灌胃，观察肿瘤的生长情况，测量肿瘤体积、质量并计算抑瘤率；免疫组织化学方法检测肿瘤原癌基因bcl2和半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3（caspase3）的表达情况，并计算其免疫组化评分（his）。结果实验1、2组肿瘤的平均质量明显低于对照组，差异有显著性（f=64.99,q=4.52、15.66,p0.05）。实验1、2组的抑瘤率分别为43%和58%。3组间

2、bcl2的his比较差异有显著性（f=25.08,q=3.75～9.91,p0.05）；3组间caspase3的his比较差异有显著性（f=16.82,q=3.26～8.15,p0.05）。结论塞来昔布能抑制小鼠膀胱肿瘤的生长，其机制可能与抑制bcl2、增强caspase3的表达有关。【关键词】膀胱肿瘤塞来昔布基因,bcl2半胱氨酸内肽酶类inhibitoryactionofcelecoxibonbladdercancerinmiceliziheng,liuyong,jingtao(departmentofurology,theaffiliate

3、dhospitalofqingdaouniversitymedicalcollege,qingdao266003,china);［abstract］objectivetoinvestigatethedepressanteffectofcelecoxib,acyclooxygenase2inhibitor,onthegroice.methodsamodelofbladdertumorinmiceizedtocontrolgroup,experimentgroupsⅰandⅱ.anintragastricadministrationofnormalsaline

4、anddifferentdosesofcelecoxibororvolumeandeasured,andtumorinhibitingratecalculated.theexpressionsofbcl2andcaspase3proteinsinedimmunohistochemicallyandimmunohistochemicalscorescalculated.resultstheaveragevolumeandorsinexperimentgroupsⅰandⅱongtheexperimentgroupsⅰ,ⅱandthecontrolgrou

5、pongthethreegroupsorinrats,itsmechanismmightbeassociateds;celecoxib;genes,bcl2;cysteineendopeptidases近来有研究表明，环氧化酶2(cox2)能在炎症因子、肿瘤因子的诱导下迅速合成，并参与肿瘤的形成，而其抑制剂很有可能有抑制肿瘤生长的作用。.133229.本实验通过建立小鼠膀胱肿瘤模型，观察在cox2抑制剂塞来昔布的干预下肿瘤的生长情况，探讨其抑瘤作用机制。现将结果报告如下。1材料与方法1.1材料小鼠膀胱癌细胞btt739由青岛大学医学院生理学实验室馈赠

6、，培养于dmem培养液(含有体积分数0.10胎牛血清，10×104u/l青霉素，10×104u/l链霉素)中，置于含体积分数0.05co2的37℃孵箱中扩增，每2～3d换液传代；选择t739小鼠26只，4～8周龄，体质量为15～30g，雌雄兼有，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司；兔抗小鼠bcl2、casapse3单克隆抗体，购于武汉博士德生物工程有限公司；辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠igg抗体，购自华美生物工程公司；塞来昔布由辉瑞公司提供。1.2实验方法1.2.1模型的建立、分组与处理取对数生长期的细胞，胰蛋白酶消化，收集细胞制成悬浊液，调至细胞密度2

7、×1010/l。26只小鼠，每只在右侧颈背部皮下接种0.1ml悬浊液，约1周后可扪及皮下肿瘤，待肿瘤直径长至平均约4mm时，去除肿瘤体积较小的2只小鼠，将小鼠随机分成对照组、实验1组和实验2组。实验1、2组分别给予塞来昔布30、60mg/（kg·d）灌胃给药，对照组同法给予等量生理盐水。定期观察小鼠精神、饮食、排便情况。从给药的当天开始每隔5d，测量肿瘤长径（a）、短径（b），按公式v=ab2/2估算肿瘤的体积[1]。绘制肿瘤生长曲线比较肿瘤生长的差异。35d后杀死全部小鼠并切除肿瘤，称质量并计算抑瘤率。抑瘤率=(1-实验组平均瘤质量/对照组平均瘤质量)×1

8、00%。常规苏木精伊红（he）染色，光镜下观察肿瘤