维生素a和锌摄进对大鼠卵巢脂质过氧化影响

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1、维生素A和锌摄进对大鼠卵巢脂质过氧化影响维生素A(VA)和锌(Zn)均是机体生长发育必须的微量营养素，但过量摄进VA和Zn对机体具有一定的损伤功能。探究发现，两者的过量可降低脾脏的抗氧化功能，造成脂质过氧化损伤〔1〕。本探究通过建立初成年SD雌性大鼠VA和Zn过量摄进模型，探索VA过量、Zn过量、VA和Zn联合过量对初成年雌性大鼠生殖系统的影响，从氧化应激角度探索过量摄进VA、Zn对雌性大鼠生殖系统的可能毒性机制。　　1材料和方法　　1?1材料　　1?1?1实验动物动情周期正常的初成年健康SD雌性大鼠(SPF级)72只，8周龄，体重(180±15)g，

2、(甘肃中医学院实验动物中心，动物证号：SCXK(甘)2004-007)。　　1?1?2试剂VA醋酸酯(粉剂)，纯度为32?5万U／g(北京嘉康源化工有限公司)；硫酸锌(ZnSO4·7H2O)，分析纯(莱阳化工实验厂)；超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)检测试剂盒(南京建成生物工程探究所)。　　1?1?3仪器722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；SHA-B型水浴恒温振荡器(常州国华电器有限公司)；TGL-6G-A型高速冷冻离心机(上海安亭化学仪器厂)；120型台式电子天

3、平(德国赛多利斯天平有限公司)。　　1?2方法　　1?2?1剂量选择和分组***涂片法连续涂片10d，筛检动情周期连续2次为4～5d的初成年健康SD雌性大鼠72只，分笼单只喂养，喂饲营养均衡饲料，饮双蒸水，随机分为6组，每组12只，逐日定时等容积(0?5ml)灌胃给予大鼠受试物，具体剂量〔2〕为，正常对照组(CG)：双蒸水0?5ml／d；Zn实验组(ZnG)：累计剂量相当于大鼠20倍推荐摄进量(RNI)；VA实验组(VAG)：累计剂量相当于大鼠30倍RNI；VA和Zn联合实验I组［(VA+Zn)IG］：VA和Zn累计剂量分别相当于大鼠10倍、20倍RN

4、I；VA和Zn联合实验Ⅱ组［(VA+Zn)ⅡG］：VA和Zn累计剂量分别相当于大鼠30倍、20倍RNI；VA和Zn联合实验Ⅲ组，［(VA+Zn)ⅢG］：VA和Zn累计剂量分别相当于大鼠50倍、20倍RNI，1次／d，连续30d，期间正常喂饲双蒸水，每隔3d称重1次。　　1?2?2卵巢组织匀浆制备于染毒第31d正法大鼠，分离血清，卵巢称重后剪碎，用玻璃匀浆器加进0?01mmol／LTris-HCl缓冲液［0?01mol／L蔗糖、0?1mmol／L乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)］制成10％(m／v)组织匀浆，5000r／min离心10min，取上清液

5、待测。　　1?2?3指标测定血清和卵巢组织中SOD、GSH-Px活性、T-AOC、MDA含量的测定依据试剂盒(南京建成生物工程探究所)说明书进行，卵巢组织蛋白以总蛋白浓度来校正。　　1?3统计分析采用SPSS11?5软件进行单因素方差分析，并进行对照组和实验组的两两比较。　　2结果　　2?1VA和Zn摄进对SOD、GSH-Px活性的影响在卵巢组织中，各实验组SOD、GSH-Px活性和CG比较明显降低各实验组和CG比较，差异均有统计学意义，(P%26lt;0?01)；(VA+Zn)ⅡG和ZnG比较GSH-Px活性降低(P%26lt;0?05)；(VA+Z

6、n)ⅡG和VAG比较GSH-Px活性降低(P%26lt;0?05)；(VA+Zn)ⅡG和(VA+Zn)ⅢG比较GSH-Px活性降低(P%26lt;0?05)。在血清中，各实验组SOD活性和CG比较，除ZnG降低外，其余各实验组均升高，但差异无统计学意义；(VA+Zn)IG和ZnG比较SOD活性升高(P%26lt;0?05)，各实验组GSH-Px活性和CG比较，除ZnG、(VA+Zn)IG降低外，其余各实验组均升高，但差异无统计学意义；(VA+Zn)ⅢG和ZnG比较GSH-Px活性升高(P%26lt;0?05)，见表1。　　表1VA和Zn摄进对雌性大鼠卵

7、巢及血清SOD活性、GSH-Px活性的影响（略）　　注：和CG比较，aP%26lt;0?01；和ZnG比较，bP%26lt;0?05；和VAG比较，cP%26lt;0?05；和(VA+Zn)ⅡG比较，dP%26lt;0?05　　2?2VA和Zn摄进对T-AOC活力、MDA含量的影响在卵巢组织中，各实验组T-AOC活力和CG比较明显降低(各实验组和CG比较，差异均有统计学意义，P%26lt;0?01，其中(VA+Zn)IG和ZnG和CG比较，P%26lt;0?05；各实验组MDA含量和CG比较，除ZnG和VAG升高外，其余各联合实验组均降低，但差异无统计

8、学意义；(VA+Zn)IG和ZnG比较，MDA含量降低(P%26lt;0?05)；(VA+Zn