维生素a和锌摄入对大鼠卵巢脂质过氧化影响

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1、维生素A和锌摄入对大鼠卵巢脂质过氧化影响维生素A(VA)和锌(Zn)均是机体生长发育必需的微量营养素，但过量摄入VA和Zn对机体具有一定的损伤作用。研究发现，两者的过量可降低脾脏的抗氧化功能，造成脂质过氧化损伤〔1〕。本研究通过建立初成年SD雌性大鼠VA和Zn过量摄入模型，探讨VA过量、Zn过量、VA和Zn联合过量对初成年雌性大鼠生殖系统的影响，从氧化应激角度探讨过量摄入VA、Zn对雌性大鼠生殖系统的可能毒性机制。　　1材料与方法　　11材料　　111实验动物动情周期正常的初成年健康SD雌

2、性大鼠(SPF级)72只，8周龄，体重(180±15)g，(甘肃中医学院实验动物中心，动物证号：SCXK(甘)2004-007)。　　112试剂VA醋酸酯(粉剂)，纯度为325万U／g(北京嘉康源化工有限公司)；硫酸锌(ZnSO4·7H2O)，分析纯(莱阳化工实验厂)；超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。　　113仪器722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；SHA-B

3、型水浴恒温振荡器(常州国华电器有限公司)；TGL-6G-A型高速冷冻离心机(上海安亭化学仪器厂)；120型台式电子天平(德国赛多利斯天平有限公司)。　　12方法　　121剂量选择与分组阴道涂片法连续涂片10d，筛检动情周期连续2次为4～5d的初成年健康SD雌性大鼠72只，分笼单只喂养，喂饲营养均衡饲料，饮双蒸水，随机分为6组，每组12只，每日定时等容积(05ml)灌胃给予大鼠受试物，具体剂量〔2〕为，正常对照组(CG)：双蒸水05ml／d；Zn实验组(ZnG)：累计剂量相当于大鼠20倍

4、推荐摄入量(RNI)；VA实验组(VAG)：累计剂量相当于大鼠30倍RNI；VA和Zn联合实验I组〔(VA+Zn)IG〕：VA和Zn累计剂量分别相当于大鼠10倍、20倍RNI；VA和Zn联合实验Ⅱ组〔(VA+Zn)ⅡG〕：VA和Zn累计剂量分别相当于大鼠30倍、20倍RNI；VA和Zn联合实验Ⅲ组，〔(VA+Zn)ⅢG〕：VA和Zn累计剂量分别相当于大鼠50倍、20倍RNI，1次／d，连续30d，期间正常喂饲双蒸水，每隔3d称重1次。　　122卵巢组织匀浆制备于染毒第31d处死大鼠，分离血清

5、，卵巢称重后剪碎，用玻璃匀浆器加入001mmol／LTris-HCl缓冲液〔001mol／L蔗糖、01mmol／L乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)〕制成10％(m／v)组织匀浆，5000r／min离心10min，取上清液待测。　　123指标测定血清和卵巢组织中SOD、GSH-Px活性、T-AOC、MDA含量的测定依据试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书进行，卵巢组织蛋白以总蛋白浓度来校正。　　13统计分析采用SPSS115软件进行单因素方差分析，并进行对照组与实验组的两两比较

6、。　　2结果　　21VA和Zn摄入对SOD、GSH-Px活性的影响在卵巢组织中，各实验组SOD、GSH-Px活性与CG比较明显降低各实验组与CG比较，差异均有统计学意义，(P001)；(VA+Zn)ⅡG与ZnG比较GSH-Px活性降低(P005)；(VA+Zn)ⅡG与VAG比较GSH-Px活性降低(P005)；(VA+Zn)ⅡG与(VA+Zn)ⅢG比较GSH-Px活性降低(P005)。在血清中，各实验组SOD活性与CG比较，除ZnG降低外，其余各实验组均升高，但差异无统计学意义；(VA

7、+Zn)IG与ZnG比较SOD活性升高(P005)，各实验组GSH-Px活性与CG比较，除ZnG、(VA+Zn)IG降低外，其余各实验组均升高，但差异无统计学意义；(VA+Zn)ⅢG与ZnG比较GSH-Px活性升高(P005)，见表1。　　表1VA和Zn摄入对雌性大鼠卵巢及血清SOD活性、GSH-Px活性的影响（略）　　注：与CG比较，aP001；与ZnG比较，bP005；与VAG比较，cP005；与(VA+Zn)ⅡG比较，dP005　　22VA和Zn摄入对T-AOC活力、MDA含

8、量的影响在卵巢组织中，各实验组T-AOC活力与CG比较明显降低(各实验组与CG比较，差异均有统计学意义，P001，其中(VA+Zn)IG和ZnG与CG比较，P005；各实验组MDA含量与CG比较，除ZnG与VAG升高外，其余各联合实验组均降低，但差异无统计学意义；(VA+Zn)IG与ZnG比较，MDA含量降低(P005)；(VA+Zn)ⅢG与ZnG比较，MDA含量降低(P005)。在血清中，各实验组T-AOC活力与CG比较降低，(VA+Zn)ⅡG和(VA+Zn)ⅢG与CG比较，差异有统计