用二种方法检测乙肝病毒表面标志物结果分析

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1、用二种方法检测乙肝病毒表面标志物结果分析刘萍1刘平2吴祥如3（1安徽医学高等专科学校230061）（2合肥工业大学医院230009）（3安徽省立友谊医院230041）【摘要】目的：比较胶体金法与酶联免疫法（ELISA）检测乙型肝炎病毒（HBV）表面标志物（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc,以下简称乙肝两对半）的结果，探讨这二种方法的符合率。方法：分别用酶联免疫法和胶体金法检测200例成人血清标木乙肝两对半，将两种检测结果进行分析、比较。结果:200例标木中，ELISA法和胶体金法检测HBsAg结果差异无统计学

2、意义（P〉0.05）,两法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb总符合率分别为100%、100%、100%、98.00%、99.00%；结论:ELISA法灵敏度高，易观察，适合大规模标木的测定。胶体金法简便快速，特异性较高，不需要特殊设备，易于观察结果，但存在一定假阳性或假阴性率，不能完全替代ELISA法进行乙肝病毒血清标志物的检测，适合在基层医疗单位、急诊标木和单份标木初筛时使用。【关键词】酶联免疫法（EUSA）胶体金法乙肝两对半据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5亿人为慢性HBV感染者

3、，每年约有100万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。据估计，全世界现有乙肝病毒携带者3.6亿，其中我国约有1.3亿。乙型肝炎的流行不仅影响人们的健康，也给社会带来沉重的经济负担。随着人们健康意识的增强，乙型两对半检测已成为人们的U常体检、门诊常规检查项目。目前最常用的是用ELISA法检测乙肝两对半，EUSA法由于具有较高的灵敏度和特异性，且容易开展，因而成为实验室普遍使用的方法，但检测时间长，操作较繁琐，不便单个标木快速检测。胶体金法是近年来开展的一种快速检测方法，其操作简便，不需要特殊设备和条件，可在基层医疗单位

4、开展，目前也常应用于门诊体检和急诊患者的单个标木检测等。现用EUSA法和胶体金法对200名成人血清进行乙肝两对半检测，并对结果进行分析比较，以探讨这二种方法的符合程度。1对象与方法1.1对象收集2011年省友谊医院健康体检者，共200例标本，其中男性108例，女性92例，年龄最大60岁，最小21岁，进行乙肝两对半检测。每人采集空腹静脉血3ml,3000r/min离心，吸取上层血清待检。1.2试剂采用ELISA法检测乙肝两对半，试剂盒由上海科华生物技术有限公司提供，严格按照检测试剂说明书和操作规程操作，每次操作均同吋做质控对照。胶体金法

5、：将测试卡和血清标本恢复至室温，用吸管吸取待测血清50μlo（约1〜2滴），滴于测试卡加样端，在室温下15〜20分钟内判断结果。胶体金测试卡由广州万孚生物技术有限公司提供，均在有效期内使用。1.3方法ELISA所冇标本均用SM-3型自动酶联免疫系统分析仪检测，HBsAg、HBsAb、HBeAg样本OD值S/CO≥1为阳性，反之为阴性;HBeAb、HBcAb样本OD值S/CO≥l为阴性，反之为阳性。胶体金测试卡采用免疫层析法，其中HBsAg、HBeAg采用双抗体夹心法，HBsAb采用双抗原夹心法，HBeAb、HBcAb

6、采用竞争抑制法，按说明书要求操作。阳性结果判断HbsAg、HBsAb、HbeAg测试卡分别出现检测线和质控线，HBeAb、HbcAb测试卡的试纸条只出现质控线，测试卡未出现质控线为失效。1.4结果判断ELISA法的HBsAg、HBeAg阳性判断标准:样品OD值≥临界值者判为阳性，HBsAg阴性判断标准:样品0D值＜临界值者判为阴性;抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性判断标准：样品A值〉临界值者判为阳性，阴性判断标准：样品A值＜临界值者判为阴性。胶体金法的阳性判断标准：在测试区和质控区内各出现一条红色条带；阴性判断标准：仅在质

7、控区出现一条红色条带，在测试区内无红色条带出现；若质控区内未出现红色条带，检测无效。1.5统计处理两种检测方法的数据采用定性实验方法比较表进行分析［1L用卡方检验两种方法检测结果。2结果2.1根据上述的结果判定标准，将两种定性方法对200例检测血清HBV标志物对比分析，结果见表1。通过实验结果进行比对，计算出HBsAg、HBsAb、HBeAg的符合率是100%;HBeAb的符合率为98.00%，卡方检验得出两种方法检测结果差异无统计学意义（x2=0.25，P>0.05）；HBeAb的符合率为99.00%,卡方检验得出两种方法检测

8、结果差异无统计学意义（x2=0.50,P>；0.05）o3讨论ELISA检测抗原（或抗体）在液相中经扩散作用，逐渐与固相表面的抗体（或抗原）结合，同时标记抗体（或抗原）也需要此过程形成标记抗原抗体复合物，检测时间较长