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1、淡竹叶中总黄酮提取工艺研究【摘要】目的用正交试验法优选淡竹叶中总黄酮的提取工艺。方法以20g原药材的总黄酮提取量为评价指标,选择乙醇用量(倍)、提取时间(h)、提取次数(次)为考察因素,采用正交试验法L9(34)确定醇提取淡竹叶中总黄酮的最佳工艺。结果最佳提取工艺条件为75%乙醇18倍量提取1.0h,共提取1次,乙醇用量为显著影响因素。结论首次进行了淡竹叶总黄酮正交提取工艺的研究,结果比较可靠。【关键词】淡竹叶；总黄酮；正交试验Abstract：ObjectiveTostudytheoptimumethanolextractionprocessoftotalflavonoids
2、inLophatherungracileBrongn.MethodsTheextractionoftotalflavonoidsentindex.Ethanolvolumnextractingtimeandtimesumethanolextractionprocessumethanolextractingprocessconditionsinantinfluencingfactor.ConclusionThisoptimumextradionprocessoftotalflavonoidsinLophatherumgracleBrongnisreliable.Keygracil
3、eBrongn；totalflavonoids；orthogonaldesign淡竹叶为禾本科多年生草本植物淡竹叶(LophatherumgracileBrongn.)的干燥茎叶,主产于河南、安徽、江苏、浙江、福建、广东、广西等地。该药味甘、淡、寒,归心、胃、小肠经,具有清热除烦、利尿的功效,多用于热病烦渴、口舌生疮、小便赤色淋痛等症[1]。淡竹叶中含有的黄酮类化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖等多种生理活性[2],因而有效地开发和利用淡竹叶中黄酮类化学成分具有重要意义。笔者选择总黄酮提取量[3]为评价指标,利用L9(34)正交试验,筛选醇提取淡竹叶中总黄酮的工艺条件,可为新
4、药研究和充分利用淡竹叶药材资源提供参考依据。 1仪器、试剂与材料HH-S型水浴锅(巩义市英峪华仪器厂)；RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市英峪华仪器厂)；754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)；AY220电子天平(岛津)；DZF-6050真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)。对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所,批号为0080-9705；淡竹叶产地为浙江,加工单位为安徽丰原铜陵中药饮片有限公司,经南京中医药大学中药鉴定教研室吴启南教授鉴定,粉碎后备用。医用酒精；甲醇AR级；蒸馏水；其余所用试剂均为分析纯。 2方
5、法与结果 2.1标准曲线的制备精密称取在105℃干燥下的芦丁对照品0.0200g,置100mL容量瓶中,加适量甲醇溶解,定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1mL中含无水芦丁0.2mg)。 精密吸取上述对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,分别置25mL容量瓶中,各加水至6.0mL,加5%亚硝酸钠溶液1mL,混匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置6min,加4%氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度,摇匀,放置15min,进行全波长扫描,在510nm处均有最大吸收。以510nm得的吸收度A对浓度C回归,以吸光度为纵坐标、浓度为横
6、坐标,绘制标准曲线,计算回归方程为A=3.8657C-0.0525(r=0.9994)。在8～48μg/mL的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。 2.2总黄酮提取量的测定按2.3.3项下方法制备样品。精密称定一定量的干燥品,用甲醇定容至25mL容量瓶中,再精密吸取3mL,置25mL容量瓶中,照标准曲线制备项下的方法,自“加水至6.0mL”起,依法测定吸光度。按照2005版《中国药典》(一部)[4]规定的方法测定。 2.3醇提工艺条件的选择 2.3.1醇提浓度的选择 将浙江产淡竹叶药材粉碎,称取20g/份,共3份,加15倍量的50%乙醇,回流提取2h(85℃),3份提
7、取液分别进行抽滤,将滤液在旋转蒸发仪上浓缩(80℃,0.08Mpa),浓缩液在水浴锅上蒸至成稠膏状,再放置真空干燥箱中(80℃,0.08Mpa),24h后取出,取少量醇浸膏测定总黄酮提取量。同法测定60%、75%、95%醇提液的总黄酮提取量(见表1)。结果表明,以20g原药材中总黄酮提取量为考察指标,75%醇提液得到的总黄酮量最多,故采用75%乙醇提取的工艺。表1醇提浓度的选择（略） 2.3.2提取工艺的正交试验 按照上述单因素考察结果,按表2中的因素水平进行正交试验。表2因素水平表（略
