血管紧张素ⅱ对大鼠胰岛β细胞形态功能的影响

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1、血管紧张素Ⅱ对大鼠胰岛β细胞形态功能的影响  【Abstract】AIM:TostudytheeffectsofangiotensinII(AngⅡ)onthefunctionandmorphologyofisletsβcells.METHODS:TheSDratsacceptedAngⅡbyhypodermicinjectionoticminipumpfor2al(8g/LNaCl)orhighsalt(40g/LNaCl)dietrespectively.Thefolloorphologyofisletsβcellsicinjection;attheend

2、of4arkedlyintherateanelargerthanthoseofcontrolgroup(P<0.05);attheendofthe12orphologyofisletsβcells,soitssecretoryfunctionmightbedamaged.  【Keyin)泵入体内,AngⅡ由Sigma公司提供,渗透性真空微量泵(美国Alzetmode2002),埋泵后2.  1.2方法①血压在环境安静,室温28~30℃条件下,用无创血压系统(美国IITTmodel31)尾套法测量大鼠血压;用美国强生血糖仪测量大鼠清醒状态空腹鼠尾血糖;血

3、胰岛素由天津协和胰岛素放免试剂盒测定.②免疫组化染色:常规脱蜡,入水→一抗(小鼠抗人、大鼠、小鼠胰岛素B链)37℃1h左右→生物素化山羊抗小鼠IgG,37℃20min→SABC37℃20min→DAB显色.细胞胞质显色为棕黄色者为胰岛B细胞(一抗、二抗、SABC均购自博士德生物有限公司).③胰岛面积与β细胞面积测定:随机选取5~10个胰岛通过Olympus显微镜连接病理彩色图像分析系统放大200倍测定胰岛面积,并测定胰岛素染色阳性的面积,胰岛素染色阳性的面积与胰岛面积相比即β细胞所占胰岛相对比例;数出胰岛素染色阳性的面积中细胞核的数量,与胰岛素染色阳性的面积相

4、除即β细胞面积.  统计学处理:实验数据以x±s来表示,采用SPSS11.0统计软件进行数据处理,组间比较采用方差分析及LSDt两两比较,P<0.05为差异有统计学意义.  2结果  2.1血压、血糖、胰岛素、β细胞面积AngⅡ输注2wk后,实验组血压明显增高,与对照组有显著性差异(P<0.01),实验组与对照组体质量、血糖、胰岛素、β细胞面积及所占胰岛比例均无统计学差异(P>0.05);停止AngⅡ输注后4wk,实验组血压继续升高,与对照组有统计学差异(P<0.01),实验+高盐组的血压升高更明显,实验+高盐组的β细胞面积明显大于正常对照组

5、(P<0.05),各组血糖、胰岛素及β细胞所占胰岛比例无统计学差异(P>0.05);停止AngⅡ输注后12wk,实验组血压比对照组高,但没有统计学差异(P>0.05),实验+高盐组血压明显升高,与对照组有统计学差异(P<0.01);实验组血胰岛素均明显降低,胰岛β细胞面积明显增大(P<0.05),实验+高盐组变化更明显;各组血糖比较没有明显差异(P>0.05).  表1输注AngⅡ后各观察指标变化(略)  2.2胰岛形态学停止AngⅡ输注后4wk,通过免疫组化染色,可见β细胞胞质着色,各组胰岛形态基本规则,细胞排列相对紧密;

6、停止AngⅡ输注后12wk,通过免疫组化染色,可见β细胞胞质着色,实验+高盐组胰岛边界不规则,细胞排列相对松散,实验组有类似改变,但不明显,正常对照组形态规则,细胞排列相对紧密(图1).  3讨论  本试验用渗透性真空微量泵将AngⅡ经皮输入大鼠体内,2RNA及血浆肾素活性明显被抑制,但是肾内的AngⅡ水平明显增加,AngⅡ在肾内摄取的增加是通过AT1受体的调节来完成的[2-3].推测AngⅡ的输入可能引起肾内相互作用因子的激活,排钠能力的降低是导致高血压的发生及长期维持的主要因素.  图1停止AngⅡ输注后12bardiD,GordonKL,Polinsky

7、P,etal.SaltSensitivehypertensiondevelopsaftershorttermexposuretoangiotensinII[J].Hypertension,1999,33(4):1013-1019.  [2]ZouLX,ImigJD,HymelA,etal.ReceptormediatedintrarenalANGIIaugmentationinANGIIinfusedrats[J].Hypertension,1996,28(4):669-677.  [3]ZouLX,HymelA,ImigJD,etal.Renalaccumu

8、lationofcirculating

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