逐淤化痰汤对脑出血大鼠脑含水量及sod活性的影响

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1、逐淤化痰汤对脑出血大鼠脑含水量及SOD活性的影响【关键词】逐淤化痰汤脑出血脑含水量SOD脑出血(intracerebralhemorrhage,ICH)是急性脑血管病中死亡率最高的。研究表明,逐淤化痰汤(Zhuyuhuatanoralliquid)在脑出血恢复期的治疗中发挥着重要作用。新的观点提出合理应用活血化淤药,宜早不宜迟[1],脑出血急性期应用逐淤化痰药物疗效更好[2],为脑出血急性期使用活血化淤中药提供了参考时间。本实验观察大鼠脑出血急性期应用逐淤化痰汤后血肿周围脑组织含水量的变化及过氧化物歧

2、化酶(superoxidedimutase,SOD)活性的变化情况,为逐淤化痰汤治疗急性期脑出血提供理论依据。1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物普通级SD大鼠,90只,体重250~300g,3~4月龄,雌雄不限。由辽宁医学院实验动物中心提供[许可证号SCXY(辽)2003-0007]。1.1.2药品和试剂逐淤化痰汤(钩藤、生大黄各15g,水蛭、三七、郁金各10g,红参12g,丹参20g):锦州医药公司,取液250mL按1:1浓度水煎,制成含生药1g/mL悬混液,冰箱冷藏备用。SOD测定试剂盒:南

3、京建成生物工程研究所。1.1.3主要实验仪器立体定位仪:美国STOELTING公司微量进样器:上海安亨微量进样器厂。1.2实验方法1.2.1分组及给药随机分为假手术、脑出血组、逐淤化痰汤组,每组30只;按术后1、2、3、5、7d,5个时间点各6只。造模后6h开始灌喂给药,用量为每次1g/kg,2次/日(相当于70kg人相同体表面积用量的3倍)。脑出血组造模后灌喂等量生理盐水,2次/日。假手术组:除不注血外,其余条件同脑出血组。1.2.2制备脑出血模型参照Xue[3]方法制备脑出血模型。定位大鼠右侧尾状

4、核(前囟后0.2mm,矢状缝向右旁开3.0mm,深度6.0mm);在立体定位仪引导下向尾状核注入自体尾血50μL;以25μL/min速度2min内注入50μL血液;留针10min。假手术组除不注血外,余操作同脑出血组。1.2.3指标测定取各时间点动物各6只处死后迅速取脑,去除皮质表面的软脑膜和凝血块,取血肿旁相同位置脑组织进行脑含水量及SOD的测定。1.2.3.1脑含水量检测取血肿旁相同位置脑组织精确称量湿重后放入电热恒温箱内80℃烘烤48h,至恒重后称取干重(两次干重之差<0.2)。干湿重法测脑组织

5、含水量:脑含水量(%)=(湿重-干重)/湿重×100%。1.2.3.2脑组织匀浆SOD的测定取血肿旁相同位置脑组织称重,用生理盐水作匀浆介质,按1g:10mL比例在冰水溶液中用匀浆机充分匀浆,以4000r/min离心15min后取上清液,制成10%的脑组织匀浆,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。1.2.4数据处理采用SPSS13.0统计分析软件完成。实验数据用x±s表示,组间比较均采用重复测量的方差分析。2结果2.1假手术组脑含水量无明显变化,低于出血对照组和逐淤化痰汤组(P<0.01或P<0.05);而

6、出血组和逐淤化痰汤组脑含水量24h开始升高,第3天达高峰;且逐淤化痰汤组脑含水量低于出血组(P<0.05或P<0.01)。见表1。表1逐淤化痰汤对实验性大鼠脑出血脑组织含水量的影响注:与出血组比较*P<0.05;**P<0.01  2.2逐淤化痰汤对脑出血大鼠SOD的影响出血24h后SOD含量逐渐减少,3d达最低值,之后又逐渐增高。逐淤化痰汤组高于出血组(P<0.05或P<0.01)。见表2。表2逐淤化痰汤对实验性大鼠脑出血SOD含量的影响脑出血后产生大量自由基是造成神经细胞损伤又一重要因素。自由基是

7、指带有不成对电子的分子、原子、基团或离子的总称,包括超氧阴离子自由基、羟自由基、烷氧自由基等[7]。SOD为体内主要的自由基清除剂,可催化超氧自由基发生歧化反映,生成过氧化氢和氧,而超氧自由基又是其他自由基产生和增殖的关键步骤,SOD在清除自由基同时本身被消耗[8]。大脑含有大量的多不饱和脂肪酸(PUFA),且大脑对氧的需求量极大,所以对自由基的损伤极为敏感。当脑细胞缺血、缺氧时,产生的自由基能作用于PUFA,从而发生脂质过氧化反应,使DNA、RNA、蛋白质等大分子物质发生交联和氧化反应,使多糖分子聚

8、合和解聚[9]。本实验显示:与ICH组比较逐淤化痰汤组相同时间点脑含水量显著减少(P<0.05或P<0.01);而相同时间点SOD活性显著增加。研究表明,脑出血后脑水肿的高峰在3~5d,这种高峰与临床上病情的继发性加重的过程一致[10],故认为脑出血后血肿周围组织水肿是神经细胞性损伤的重要机制。综上所述,逐淤化痰汤作为中药制剂在脑出血急性期应用具有减轻脑水肿,增加SOD活性的作用,为临床脑出血急性期应用活血化淤中药提供了实验依据。【参考文献】[1]杨金生

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