大孔吸附树脂同步提取湖北麦冬总多糖和总皂苷

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1、大孔吸附树脂同步提取湖北麦冬总多糖和总皂苷作者:刘霞张琼光向阳詹亚华陈科力【摘要】  目的研究湖北麦冬中总多糖和总皂苷的提取、分离方法。方法应用大孔吸附树脂提取湖北麦冬中的总多糖和总皂苷。结果分别得到含量为66.52%的总多糖及含量为81.15%的总皂苷。结论运用大孔吸附树脂可以同步提取湖北麦冬中的总多糖和总皂苷,有利于湖北麦冬中总多糖和总皂苷的综合利用。【关键词】湖北麦冬总多糖总皂苷综合利用  湖北麦冬Liriopespicata(Thunb.)Lour.var.proliferaY.T.Ma是中药山麦冬的主要来源之一,是湖北省的道地药材,具有养阴

2、生津、润肺清心的功效,用于肺燥干咳、虚劳咳嗽、津伤口渴、心烦失眠、肠燥便秘等症[1]。湖北麦冬含多糖及皂苷类成分[2],两者都是湖北麦冬的活性成分,其多糖有降血糖、延缓衰老、抗疲劳辅助抑制肿瘤、抗辐射等作用[3];所含皂苷类成分在免疫系统、心血管系统等方面具有良好的活性[4]。  对于湖北麦冬中的总多糖及总皂苷,目前多为单独提取和纯化,常造成了另一大类有效成分的浪费,不利于湖北麦冬的综合利用。本文运用大孔吸附树脂法同步提取湖北麦冬中的总皂苷和总多糖,有利于湖北麦冬中总多糖和总皂苷的综合利用。  1材料与仪器  Agilent8453紫外-可见分光光度

3、仪,R205星海旋转蒸发器(无锡市星海王生化设备有限公司),DZF-2002真空干燥箱(上海浦东荣丰科学仪器有限公司)。  湖北麦冬购自湖北省襄樊市欧庙镇,经湖北中医学院鉴定教研室陈科力教授鉴定为湖北麦冬Liriopespicata(Thunb.)Lour.var.proliferaY.T.Ma。麦冬皂苷D对照品由中药固体制造技术国家工程研究中心提供,批号:1214-080228,纯度≥98%。D-无水葡萄糖对照品由中国药品生物制品检定所提供,批号:110833-200503。D-101大孔吸附树脂(天津农药股份有限公司),水为蒸馏水,其他试剂均为分

4、析纯。  2方法与结果  2.1总多糖的含量测定方法[5]    2.1.1供试品溶液的制备取总多糖0.1g,精密称定,用蒸馏水溶解并定容至100ml,精密吸取0.2ml分别置于干燥具塞试管中,补加蒸馏水至1.0ml,摇匀,得供试液。  2.1.2线性关系考察精密称取105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖对照品10.40mg,置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2ml,分别置干燥具塞试管中,补加蒸馏水至1.0ml,再各加苯酚试液1.0ml,摇匀,滴加浓硫酸5.0ml,迅速摇匀,放置5min,置

5、沸水浴中加热15min,取出,冷水冷却至室温。另取蒸馏水1.0ml,加苯酚试液同法操作,作为空白对照。按分光光度法在486nm波长处测定吸光度,以浓度为横坐标(X)、吸光度为纵坐标(Y),绘制标准曲线,求得回归方程:Y=9.1051X+0.0934,r=0.9991。  2.1.3总多糖的含量测定供试品溶液按“2.1.2”项下自“加苯酚试液1.0ml”起,同法操作,测定吸光度。2.2总皂苷的含量测定方法  2.2.1供试品溶液的制备取总皂苷0.1g,精密称定,置100ml量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,精密量取1ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀

6、释至刻度,摇匀,即得。  2.2.2对照品溶液的制备精密称取麦冬皂苷D对照品10.42mg,置50ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。  2.2.3测定波长的选择精密称取葡萄糖10.31mg,按对照品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各2ml,置具塞试管中,挥去甲醇,加入高氯酸10ml,混匀,65℃水浴加热15min,冰水浴冷却,终止反应后按分光光度法测定吸光度,对照品溶液、供试品溶液在317nm处有最大吸收峰,阴性对照溶液无干扰。结果见图1。因此选317nm为麦冬总皂苷的测定波长。  1.对照品

7、2.供试品3.葡萄糖    图1湖北麦冬总皂苷含量测定波长选择图(略)  2.2.4线性关系考察精密吸取麦冬皂苷D对照品溶液0.4,0.6,0.8,1.0,1.5,2.0ml,分别置干燥具塞试管中,挥去甲醇,加入高氯酸10ml,混匀,65℃水浴加热15min,冰水浴冷却,终止反应后按分光光度法测定吸光度,以浓度为横坐标(X)、吸光度为纵坐标(Y),绘制标准曲线,求得回归方程:Y=6.9914X+0.0352,r=0.9999。  2.2.5总皂苷的含量测定精密吸取供试品溶液1ml,按“2.2.3”项下自“置具塞试管中,挥去甲醇,加入高氯酸10ml”起

8、,同法操作,测定吸光度。  2.3大孔吸附树脂的前处理取D-101大孔吸附树脂,用乙醇浸泡过夜,使充分溶胀,

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