小槐花抗肿瘤活性成分的研究

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1、摘要癌症是当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。近年来，以细胞周期为药物靶点进行筛选，已成为当今抗癌药研发的重要方向。中草药在中国已有几千年的药用历史，其结构多样性和复杂性的优势一直受到药物开发者的青睐。我们在此基础上筛选了来源于40种植物的2000多个馏分，对其进行细胞毒活性评价，发现小槐花60％乙醇提取物的大孔树脂95％洗脱馏分中间极性部分具有良好的细胞毒活性。因此对活性部位进行了活性成分的研究。本文综合运用硅胶柱层析、ODS柱层析、SephadexLH．20柱层析以及反相HPLC等多种色谱学分离手段，对小槐花60％乙醇提取物的大孔树脂9

2、5％乙醇洗脱部分的化学成分进行了研究，从中分离得到化合物22个。通过理化性质和现代波谱学手段(UV、MS、1H-NMR、”C—NMR和2D-NMR)鉴定了它们的结构。包含黄酮类化合物14个，三萜类化合物4个，甾醇类化合物两个和生物碱类化合物2个。其中四个黄酮化合物9、ll、21、22为新化合物，除化合物6外，所有化合物均为从该种植物中首次分离得到。本文通过MTT实验对小槐花中分离到的化合物进行抗肿瘤活性筛选，发现化合物7、lO、11、14在100IlM条件下对宫颈癌细胞HeLa、人肝癌细胞SMMC．772l、人表皮癌细胞A431三种人癌细胞具有明显的抗肿

3、瘤活性，Giemsa染色进一步说明了这4个化合物对人上皮癌细胞有抗肿瘤活性，且具有浓度依赖性。为了进一步探索黄酮类化合物于癌细胞周期的关系，我们通过流式细胞术PI染色法、WbstemB10tting研究发现，三个活性黄酮化合物化合物7、10、11在50斗M浓度条件下对A431人上皮癌细胞有明显的G1／S期阻滞现象，显著抑制G1期相关蛋白CDK4、CDK6、CyclinDl，且新黄酮化合物11抑制最为显著。通过进一步计算机模拟对接发现，三个活性黄酮化合物7、10、11能够与CDK4蛋白很好的模拟对接。这些结果说明小槐花发挥抗癌活性功能的主要物质基础可能为黄

4、酮类化合物，这些黄酮化合物通过抑制细胞周期Gl期相关蛋白CDK-4、CDK6、CyclinDl，进而发挥抗癌功能。最后，本文还对小槐花中的黄酮结构与抗肿瘤活性之间的构效关系展开了讨论，阐明了黄酮化合物结构与其抗癌活性之间的的部分关系。关键词：小槐花；黄酮；抗癌；细胞周期AbstractC锄cerisoneoftllem旬0rdiseaSes州chseriouslyimpacthl】111aIlhealⅡl锄dtllI。eatenh啪锄life．：I沁ently，peoplepaymuchattentiont0findantic锄cerdmgsthatta

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