ctgf mrna在糖尿病大鼠心肌中的表达及葛根

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1、CTGFmRNA在糖尿病大鼠心肌中的表达及葛根【摘要】目的：观察结缔组织生长因子(CTGF)在糖尿病大鼠心肌组织中的表达情况及葛根素(Pue)、氨基胍(AG)对CTGF表达的调节作用。方法：给大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病模型，用葛根素(Pue1组，160mg·kg-1·d-1;Pue2组，120mg·kg-1·d-1;Pue3组，80mg·kg-1·d-1)、氨基胍(AG组，100mg·kg-1·d-1)治疗12周;采用RT-PCR检测心肌组织CTGFmRNA的表达，透射电镜下观察心肌细胞的形态学改变。结果：

2、糖尿病组大鼠心肌组织CTGFmRNA的表达升高，Pue2组、Pue3组和AG组CTGFmRNA的表达明显降低;电镜下可见糖尿病组大鼠心肌细胞肌原纤维含量明显减少，治疗组大鼠心肌病变明显减轻。结论：葛根素(120和80mg·kg-1·d-1)和氨基胍能下调CTGFmRNA的表达，对糖尿病大鼠心肌具有保护作用。【关键词】结缔组织生长因子;葛根素;氨基胍;糖尿病;心肌;基因;大鼠　　Abstract:Objective:ToobservethemRNAexpressionoftheconnectivetissuegroyocar

3、dialtissueinratsellitus(DM)andtheadjuslingeffectsofpuerarin(Pue)andaminoguantdine(AG)onCTGFexpression.Methods:Thediabetesmellitus(DM)ratsmodelsadebyintraperitonealinjectionofstreptozotocin(60mg/kgbodyRNAofmyocardialtissueinederasechainreaction(RT-PCR).Morphologyof

4、myocardiumofratsissionelectronmicroscope(TEM).Results:TheCTGFmRNAexpres-siong·kg-1·d-1、80mg·kg-1·d-1)andAGtreatedgroups(P<0.01).ItshoyofibrillacontentsinmyocardialcelldecreasedsignificantlyunderTEMindiabeticgroup.Thepathologicalchangesofmyocardiumyocardiumofdia

5、beticratmaybedoRNAexpression.　　Keyinoguanidine;diabetesmellitus;myocardium;geneexpression;rat　　糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病最常见的慢性并发症之一，被认为是糖尿病死亡的首要因素。已有研究表明，糖尿病心肌病变以舒张功能异常为早期临床特征，间质纤维化是其发生的主要原因[1]。结缔组织生长因子(CTGF)是新近发现的与纤维化形成密切相关的细胞因子[2]。近年来有研究提示CTGF参与了心肌纤维化的发生[3-4]。本研究观察了CTGF在糖

6、尿病大鼠心肌组织中的表达情况以及葛根素和氨基胍对CTGFmRNA表达的影响。　　1材料和方法　　1.1动物、试剂与仪器清洁级(II级)Sprague-Daa公司产品，葛根素注射液(2mL:0.1g)为浙江康恩贝制药有限公司产品;TrizolreagentRNA提取试剂盒、RT-PCR试剂盒、DNAMarker由宝生物工程(大连)有限公司提供;CTGF及GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)引物序列由上海生物工程技术服务有限公司合成;血糖仪及测试条由强生(中国)医疗器材有限公司提供。　　1.2动物分组和处理随机取10只大鼠作为对

7、照组(C组)，余60只大鼠禁食12h后，用链脲佐菌素60mg/kg一次性左下腹腔注射，72h后取尾血用快速血糖仪测血糖，≥16.8mmol/L为糖尿病大鼠。成模后再将糖尿病大鼠随机分为5组：糖尿病组(DM组)、葛根素高剂量(160mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue1组)、葛根素中剂量(120mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue2组)、葛根素低剂量(80mg·kg-1·d-1)治疗组(Pue3组)、氨基胍治疗组(AG组，100mg·kg-1·d-1)。C组及DM组每天腹腔注射丙二醇，容积为2mL/kg，其余各组大鼠每天

8、在相同时间内腹腔注射相应的药物，于同等条件下饲养12周。大鼠给药处理12周后，股动脉放血处死，开胸取出心脏，留取电镜标本后，迅速用4℃生理盐水冲洗血液，放入液氮中速冻过夜后移至-70℃冰箱中保存备用。　　1.3心肌组织CTGFmRNA表达的测定取冻存的心肌组织，经Trizol一步法提取总RNA，紫外分光