非小细胞肺癌中survivin蛋白的表达及其与 p53表达的关系

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1、非小细胞肺癌中survivin蛋白的表达及其与p53表达的关系作者：王静，杨继要，石敏，吴逸明，吴拥军【摘要】目的探讨非小细胞肺癌组织中survivin蛋白的表达与临床病理特征的关系及其与p53表达的相关性。方法采用免疫组化的链霉菌抗生物素过氧化酶法（StreptavidinPeroxidase,SP）检测80例NSCLC组织和20例正常肺组织中survivin、p53蛋白表达情况。结果80例非小细胞肺癌组织中survivin蛋白阳性例数49例，表达率为61.3%，在肺良性病变组织中，未阳性表达，两组比较

2、差异有显著性（P<0.05）；在III～IV期肺癌组织中survivin蛋白阳性表达率显著高于I～II期肺癌组织(P<0.05)，而与组织学分型、分化程度、淋巴结转移与否无关(P>0.05)；survivin、突变型p53蛋白在肺癌组织中的表达呈正相关。结论survivin蛋白表达与肺癌的TNM分期密切相关，有可能成为判断病情和评价预后的指标，survivin有望成为肺癌诊断的肿瘤标志物及基因治疗的新靶点；survivin、突变型p53蛋白在肺癌组织的协同高表达可能促使肺癌病情的恶性发展。

3、【关键词】非小细胞肺癌；survivin；p53；表达CorrespondingAuthor:ethodsTheexpressionofsurvivin,p53protEinallungtissuebyimmunohistochemicalStreptavidinPeroxidase(SP)method.Resultssurvivinaandin0of20(0)casesofnormallungtissuesasignificantlyhigherthanthatinnormallungtissues(P

4、<0.05).ThepositiverateofsurvivininstageⅢ～Ⅳphnodemetastasis(P>0.05),ThereisthepositivecorrelationexistingintheexpressionofSurvivin,mutationP53inlungcarcinoma.Conclusionsurvivinayplayanimportantroleinlungcarcinogenesisandbeidentifiedasadefinitediagnos

5、ticmarkerandapotentialtherapeutictargetinNSCLC.CooperativehighexpressionofsurvivinandmutationP53inlungcancertissuesmaymakelungcancerdevelopquickly.Key的切片，60℃烘烤，脱蜡，3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，微波修复抗原，10%非免疫血清封闭，加入1∶50稀释的兔抗人survivin多克隆抗体（美国Neomarkers公司）和鼠抗人p53单克隆抗体（美国Z

6、ymed公司）4℃过夜孵育，PBS冲洗，滴加1∶300生物素标记二抗，室温下30min，冲洗，滴加1∶40稀释的SP溶液，室温下30min,冲洗后DAB（武汉博士德生物工程公司）显色,苏木素—伊红（HE）复染，封片。对照染色:免疫组化染色设阳性对照，以乳腺癌阳性标本作为阳性对照；阴性对照，以PBS液代替一抗作为阴性对照。1．3免疫组化结果判定及计数方法survivin蛋白阳性反应为淡黄至棕黄色颗粒，定位于胞浆；p53阳性反应为棕黄色颗粒，定位于细胞核。survivin蛋白阳性细胞的计数：按照Sinicrop

7、[2]的标准作组织化学记分：H=N×I。若H>1为阳性，若H≤1则为阴性。阳性细胞数记分（N）5个高倍视野阳性细胞数的百分率。共分5个等级：<5.0%；5.0%～25.0%；26.0%～50.0%；51.0%～75.0%；>75.0%。着色强度记分（I）:1分弱阳性(+)；2分中度阳性（++）；3分强阳性(+++)。p53染色阳性细胞的计数方法：每例标本随机选取10个高倍镜视野，计数1000个细胞，计算阳性细胞百分率。阳性细胞百分率≥25%为阳性，<25%为阴性。阳性细胞

8、不再进一步分级。1．4统计学分析应用SPSS10.0统计分析软件，采用χ2检验，Spearman等级相关性分析，以P<0.05作为差异显著性的判定标准。2结果2.1survivin蛋白在肺癌和肺良性病变组织中的表达survivin蛋白的阳性反应为淡黄色颗粒，表达较强时呈棕黄色，主要定位于胞浆。肺癌组织的survivin蛋白阳性表达率为61.3%(49/80)，但在肺良性病变组织中，未见阳性染色，两组比较差异