5-6肾切除大鼠早期模型中p38mapk的动态变

《5-6肾切除大鼠早期模型中p38mapk的动态变》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、5/6肾切除大鼠早期模型中p38MAPK的动态变【摘要】目的:研究5/6肾切除大鼠模型中p38MAPK磷酸化的动态表达情况。方法:82只雄性SD大鼠分为两组：5/6肾切除模型组72只，假手术对照组10只。模型组造模完成后，分别于肾切除早期（术后1/2h、1h、3h、6h、12h、1d、2d、4d）相应时间点处死，每组9只，假手术组于术后12h处死，称量各组体重及残余肾重，计算肥大指数；下腔静脉取血留取血清测定血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）；以APK活性的表达情况；以病理光镜和电镜观察肾小球、肾小管及

2、肾间质组织形态学及超微结构的变化。结果:模型组与对照组相比，肾脏呈代偿性肥大，肥大指数增高（P<0.05），Scr和BUN升高（P均<0.01）。免疫印迹法显示5/6肾切除术后1/2h、1h、3h、6h、12h磷酸化p38信号呈递增趋势，尤以12h信号最强，之后信号减弱，2d时几乎不可见，4d有较弱的信号，假手术组未见明显信号。光镜下，发现肾小球有轻度系膜细胞增生，基质增宽不明显，肾小管偶有轻度变性，间质偶有炎性细胞浸润。电镜下，偶见足突局灶融合。结论:5/6肾切除大鼠在造模完成后12h时磷

3、酸化p38MAPK表达最强。【关键词】5/6肾切除p38MAPK信号转导磷酸化Abstract:Objective:Toinvestigatethedynamicexpressionofphosphorylating-p38inthe5/6subtotalnephrectomized(STNx)ratmodel.Methods:Eighty-taleSprague-Dalydividedintotgroup(n=10).RatsinSTNxgroupyathalfofanhour,1hour,3hour

4、,6hour,12hour,1day,2dayand4day,9ratsforeach;ratsofshamgroupeasuredandthekidney/bodycreatinine(Scr)andbloodureanitrogen(BUN)ined.Theexpressionsofphosphorylating-p38easuredorphologyandultrastructureoftherenalglomerulus,tubuleandinterstitiumicroscopeandelec

5、tronmicroscope.Results:ThekidneyentedforpensationinSNTxgroupandthekidney/bodygroup,thesameastheScrandBUN(P<0.01).APK;signaltransduction;phosphorylation慢性肾功能不全（chronicrenalinsufficiency，CRI）发展到一定程度将不可逆转，最终将进展到慢性肾衰竭（chronicrenalfailure，CRF）。从CRI的代偿期到失代偿

6、期，是防止其转入CRF的关键阶段，这一阶段发生的任何可导致急性肾损伤的因素都有可能促使肾功能急剧恶化，因此，如何延缓CRI进展，已成为医学界面临的重大课题。目前有关CRF早期的信号转导途径国内外尚未见报道，了解其早期信号转导通路的变化，对揭示CRF发生、发展的分子机制有重要意义。p38MAPK是近年来细胞生物学研究的热点之一，是丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase，MAPK)家族的一个亚类，其信号通路是生物信号引起核反应的重要通路，在细胞生长、死亡、细胞周期、炎

7、症及应激反应的调控中起重要作用[1]；p38MAPK还参与了多种肾脏病发病过程,是肾脏固有细胞重要的信号转导分子。本研究通过5/6肾切除术建立CRF的大鼠模型，观察了造模后早期大鼠体内的p38MAPK信号转导通路的变化，探讨CRF早期的发病机制，为寻找预防或延缓肾功能衰竭的方法提供理论依据。1材料和方法1.1试剂与药物兔抗大鼠磷酸化p38MAPK（phospho-p38MAPK）和兔抗大鼠p38MAPK（购自cell-signal公司）；辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG（购自Santa-Cruz公司）；B

8、CA蛋白定量试剂盒和ECL化学发光底物（购自picece公司）；PVDF膜（购自millipore公司）。1.2动物模型的制备和分组1.2.1实验动物及分组：由温州医学院实验动物中心提供，SD大鼠，雄性，清洁级，5周龄，体重150～170g，适应性喂养1周。大鼠分为两组：5/6肾切除模型组72只和假手术对照组10只。1.2.25/6肾切除模型的制备：3%戊巴比妥纳(30mg/kg)腹腔内注射麻醉大鼠，将大鼠俯卧位四肢固定于鼠板上，以脊胁角为