综合评分法优化黑豆汁炖何首乌炮制工艺

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1、综合评分法优化黑豆汁炖何首乌炮制工艺　　关键词：何首乌；炮制；正交实验设计；综合评分　　AbstractObjectiveTooptimizethetechnologiesofprocessinginHeshouizedbyusingorthogonaldesignic-2-o-D-glycosides,emodininHeshouizedprocessingbraisingfor36hours,drying9hoursat80℃izedtechnologiesofprocessing.　　KeymultiflorumThu

2、nb.的干燥块根。生品性平，味苦涩，微甘，功能生津润燥，解毒散结；制品性变温，味转甘，具补肝肾、益精血、强筋骨、乌须发的作用。临床多采用制何首乌入药。何首乌中主要含蒽醌、二苯乙烯苷、卵磷脂、糖类等成分。蒽醌具有泻下作用；二苯乙烯苷能降低血清中的胆固醇，具有保肝作用；卵磷脂是构成神经组织特别是脑脊髓的主要成分，也是血球和其他细胞膜的原料，能促进血液中细胞的新生，具有良好的滋补作用，还能使血糖升高，有抗衰老、减轻动脉粥样硬化的作用［1］；多糖有良好的抗衰老、补益、强壮作用［2］。《中国药典》2005版虽收载了何首乌的炮制方法，但

3、仅做了一般原则性的规定，未规定其关键炮制工艺参数。本实验采用正交实验设计，综合评分法，按照2005版《中国药典》方法炮制何首乌，测定其多糖、二苯乙烯苷、大黄素指标，优化出炮制工艺参数。　　1器材　　1.1药材何首乌药材购于贵州省凯里地区施秉GAP药材种植基地，经我院周汉华副教授鉴定为蓼科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥根。经鉴定、含量测定均符合2005版《中国药典》（Ⅰ部）标准。　　1.2仪器AgilentHP1100型高效液相色谱仪（美国），AB204-S型电子分析天平（万分之一，瑞士梅

4、特勒-托利多公司），AE240-型电子分析天平（十万分之一，瑞士梅特勒-托利多公司）。Cintra-20紫外分光光度计（澳大利亚），CS-9301双波长飞点薄层扫描仪（日本岛津），CAMAG-Linomat-IV半自动点样仪（瑞士卡玛），薄层色谱数码相机系统。　　1.3试药大黄素对照品（批号：756-8902），二苯乙烯苷对照品（批号：110844-200404）均由中国药品生物制品检定所提供，含量测定用。乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯，硅胶G板（青岛海洋化工厂）。苯酚试剂的制备：取苯酚500g，加铝片0

5、.5g与碳酸氢钠0.25g，蒸馏收集180℃馏分，称取此馏分34g，加水500g置棕色瓶中备用。　　2方法　　2.1黑豆汁的制备取黑豆100g，加水适量，煮约4h，熬汁约150g，豆渣再加水煮约3h，熬汁约100g，合并黑豆汁约250g。　　2.2黑豆浸出率的测定参照《中国药典》2005版水溶性浸出物含量测定项下方法测定，结果3批次浸出物含量为11.05%～16.46%（n=2）。　　2.3炮制品取何首乌片与黑豆汁拌匀，闷润，置蒸锅内密闭，隔水分别炖至药物内外呈棕褐色，取出，干燥［3］。每100kg净何首乌片，用黑豆10kg

6、。用正交实验方法，按炖制时间、干燥温度、干燥时间作为考察的3个因素，各取3个水平设计实验方案。炮制得到9个样品，粉碎过4号筛，备用。见表1～2。　　表1因素水平（略）　　2.4考察指标的测定　　2.4.1糖含量测定参照《中国药典》2005版金樱子含量测定项下方法测定［3］。结果见表3。　　2.4.2二苯乙烯苷含量测定参照《中国药典》2005版制何首乌含量测定项下方法测定［3］。结果见表3。　　表2L9(3)4正交实验方案（略）　　2.4.3大黄素含量测定薄层色谱条件：硅胶G板10cm×10cm，110℃活化1h，原点状点样，

7、展开剂为苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸（15∶5∶0.3）。薄层扫描条件：双波长反射法锯齿扫描。λS=450nm，λR=550nm，狭缝宽度0.4mm×0.4mm。对照品溶液的制备：精密称取大黄素标准品14.9mg置50ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.298mg/ml大黄素对照品溶液。供试品溶液的制备：取何首乌粗粉约2g，精密称定，置150ml平底烧瓶中，精密加入95%乙醇35ml，加热回流至沸腾，并保持微沸1h。放冷后，取下，用干燥滤器滤过，置干燥蒸发皿中，在水浴上蒸至10ml以下，将浓缩后的滤液转移置10ml容量

8、瓶中，定容至刻度，密闭，即得。标准曲线的制备：用自动点样仪，分别将大黄素对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0μl点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，扫描，以峰面积积分值为纵坐标，点样量为横坐标，绘制标准曲线。得回归方程为：A=3056.2C+808.